現(xiàn)代生物技術(shù)在豬病診斷和防治中的應(yīng)用研究

張漢武

摘要：養(yǎng)豬業(yè)作為我國主要的肉食品來源，對經(jīng)濟的發(fā)展有重要的貢獻(xiàn)，而為了適應(yīng)市場經(jīng)濟的發(fā)展，推動了養(yǎng)豬業(yè)向產(chǎn)業(yè)化、集約化方向發(fā)展，但同時也加大了豬病的傳染性和危害性，而利用現(xiàn)代生物技術(shù)可以有效解決這一問題，對此，本文對現(xiàn)代生物技術(shù)在豬病診斷和防治中的應(yīng)用進(jìn)行了分析。

關(guān)鍵詞：生物技術(shù)；豬病診斷技術(shù)；防治技術(shù)

中圖分類號：S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B 文章編號：2096-3637（2017）07-0015-02

1現(xiàn)代生物技術(shù)在豬病診斷中的應(yīng)用

1.1蛋白表達(dá)純化技術(shù)

在生物技術(shù)的發(fā)展，我國已經(jīng)實現(xiàn)了蛋白表達(dá)純化技術(shù)，可以有效解決豬病診斷方面的難題，及時掌握豬的發(fā)病類型、發(fā)病原因，并制定正確的治療計劃，有利于降低養(yǎng)豬業(yè)的損失程度。另外，傳統(tǒng)的診斷方法不僅成本高，而且診斷效率差，不利于養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。例如，在進(jìn)行診斷時，需要對豬體內(nèi)的病毒進(jìn)行培養(yǎng)，了解病毒結(jié)構(gòu)，并根據(jù)其特點制定抗原，診斷需要一系列的過程，比較浪費時間，還會加重豬的病情。而使用蛋白表達(dá)純化技術(shù)，具有較強的優(yōu)勢，可利用一些免疫抗原基因，當(dāng)豬在感染一些特殊的病原體時會發(fā)生一些劇烈的免疫反應(yīng)，從而判斷所感染的病菌類型，有利于制定正確的治療計劃，同時，可根據(jù)實際診斷需要，發(fā)展生物基因工程技術(shù)，加大對免疫抗原基因的開發(fā)力度，使其可以應(yīng)用臨床診斷上，大大提高了診斷質(zhì)量和效率，降低養(yǎng)殖戶的損失程度。

1.2血清診斷技術(shù)

1.2.1沉淀診斷法

豬類常見疾病比較多，單一的診斷方法很難確保其實效性，因此，還需要沉淀診斷法來提供幫助，例如，部分細(xì)菌或毒素具有可溶性，能與血清、組織、抗原等相融合，對此，可在豬體上選取一部分組織或血液，使其與抗原融合，利用一些電解質(zhì)，經(jīng)過一段時間的變化，會形成一些白色的沉淀物，并對其進(jìn)行分析，可以有效診斷豬的病因。其主要適用范圍為：診斷鏈球菌感染、傳染性水皰、豬胸膜炎以及肺炎等方面，具有較好的效果。

1.2.2凝聚診斷法

這種診斷方法是與沉淀診斷法相對應(yīng)而存在的，通過將病毒或細(xì)菌吸附在細(xì)胞表面，使其與抗體進(jìn)行結(jié)合，并加入一些電解質(zhì)，在經(jīng)過一定的反應(yīng)時間后，會將各種病毒、細(xì)菌凝聚在一起，形成一個團塊，對團塊內(nèi)的物質(zhì)進(jìn)行檢測，其吸附介質(zhì)不同，所診斷的項目內(nèi)容也就不同（如表1）。

1.2.3免疫標(biāo)記診斷法

所謂的免疫標(biāo)記技術(shù)，就是利用酶、熒光素等物質(zhì)進(jìn)行抗體或抗原標(biāo)記，通過觀察其反應(yīng)，來獲得診斷結(jié)果（如表2）。

1.3免疫膠體金試紙條

免疫膠體金試紙條診斷法是一種以免疫滲透技術(shù)為基礎(chǔ)的免疫診斷法。具有較強的吸附性等特點，能將毒素、病菌、抗生素、免疫球蛋白等進(jìn)行結(jié)合，有利于提高技術(shù)人員的診斷質(zhì)量和效率，是我國目前主要的診斷方法之一，有其獨特的優(yōu)勢。一是，在診斷工作時，所需要使用的樣本數(shù)量和比較少，只需要100μl的樣本量即可滿足實驗需求，可以有效減少對豬的傷害；二是，診斷方法更具備現(xiàn)場性，傳統(tǒng)的診斷方法往往需要大量的儀器設(shè)備進(jìn)行化驗、檢測，不僅診斷周期長，成本也比較高，而利用免疫膠體試紙條，可直接在現(xiàn)場進(jìn)行檢測，極大程度降低了診斷成本，有利于降低養(yǎng)殖戶的損失程度；三是，這種試紙條具備更高的安全性，既不會對環(huán)境造成影響，也不會對豬產(chǎn)生影響；四是，其檢測結(jié)果可以保留很長時間，可為技術(shù)人員的科研工作提供保障，促使我國生物診斷技術(shù)的快速提高，對此，本文以PRRS（豬繁殖與呼吸綜合征）為例進(jìn)行研究。

1.3.1疫苗質(zhì)量檢測

我國的養(yǎng)殖戶為了避免豬患上疾病，需要在防疫站或獸醫(yī)站購買PRRS疫苗，其質(zhì)量對豬的病患幾率有嚴(yán)重的影響，為了確保疫苗的質(zhì)量，本文需要采取實驗的方法來進(jìn)行檢測。

為了保證實驗的科學(xué)性，要保證所購買的疫苗屬于同一批次、統(tǒng)一型號，并根據(jù)不同日齡的種豬、小豬、乳豬進(jìn)行PRRS疫苗接種，其接種數(shù)量為每種日齡豬各150頭，并在15d后進(jìn)行采血，并利用免疫膠體金試紙條進(jìn)行檢測，觀察每個試紙條的檢測結(jié)果（如表3）。

當(dāng)結(jié)果顯示為具備免疫病菌的功能時，則說明本批次的疫苗質(zhì)量較好，當(dāng)檢測解耦過不具備免疫功能時，還需要進(jìn)行2方面的監(jiān)測，一是，確定接種疫苗的豬是否本身存在疾病情況，因為，部分病菌會干擾檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性；二是，判斷疫苗本身是否存在問題，如果是疫苗質(zhì)量的問題，則需要養(yǎng)殖戶更換PRRS疫苗廠家，并在購買前進(jìn)行質(zhì)量檢測，避免增加損失程度。

1.3.2抗體質(zhì)量檢測

第一，當(dāng)養(yǎng)殖場的母豬在分娩時，需要對母豬的抗體質(zhì)量進(jìn)行檢測，當(dāng)免疫膠體金試紙條只顯示一條控帶時，說明母豬的抗體水平比較高，容易感染病毒，在這種情況下，需要養(yǎng)殖戶為母豬接種疫苗，來提高其抗體水平，避免出現(xiàn)豬病等情況。而當(dāng)檢測結(jié)果現(xiàn)實兩條控帶時，則表明母豬的抗體質(zhì)量比較高，抵抗力也比較強，可以避免PRRS病毒的入侵，不需要接種疫苗。

第二，部分養(yǎng)殖戶為了發(fā)展需要，要從外部購進(jìn)一些豬，豬的抗體質(zhì)量很難把握，還會存在病豬的可能，如果不進(jìn)行檢測，會給養(yǎng)殖戶帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟損失，對此，要求對外購豬進(jìn)行抗體水平檢測。為了保證檢測的效率和質(zhì)量，可采用采樣調(diào)查的方式，根據(jù)日齡進(jìn)行分類，選出具有代表性的一部分豬進(jìn)行檢測，可通過采血檢驗的方法，根據(jù)免疫膠體金試紙條的結(jié)果判斷外購豬群的整體抗體水平，從而確定是否進(jìn)行疫苗接種，可以有效防止PRRS的發(fā)病幾率，保證養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟效益。

第三，在進(jìn)行日常養(yǎng)殖管理時，當(dāng)發(fā)現(xiàn)個別豬有PRRS發(fā)病現(xiàn)象時，可及時進(jìn)行診斷，通過采集主體身上的血液樣本，利用免疫膠體金試紙條進(jìn)行檢測，根據(jù)診斷結(jié)果進(jìn)行防治處理，當(dāng)發(fā)現(xiàn)豬只存在PRSS病毒時，要及時進(jìn)行隔離，避免傳染給豬群，降低損失程度，并進(jìn)一步制定醫(yī)治措施。

2 現(xiàn)代生物技術(shù)在豬病防治工作中的應(yīng)用

2.1活載體疫苗

2.1.1非復(fù)制性活載體

這種載體疫苗具有較強的免疫能力，豬在接種后，受到強度攻擊時，會對保護(hù)免疫系統(tǒng)進(jìn)行刺激，從而起到防護(hù)作用，具有較好的免疫效果。在進(jìn)行活載體疫苗研發(fā)時，要具備區(qū)分禽畜疫苗和人用疫苗的關(guān)系，禽畜疫苗的研發(fā)要在保證安全性的情況下降低生產(chǎn)成本，從而提高經(jīng)濟效益，而人用疫苗的主要問題就是安全性。另外，活載體疫苗的質(zhì)量受載體的影響較大，一般情況，病毒基因組越長越適合用作載體，主要是因為基因組長，能容納外源基因片段，使其刺激細(xì)胞的免疫能力，從而獲得免疫效果，因此，非復(fù)制性活載體疫苗還具備很多的優(yōu)點。一是，在活載體疫苗的作用下，可刺激豬體內(nèi)機能的細(xì)胞免疫系統(tǒng)和體液免疫系統(tǒng)，全方面防止病毒入侵，可以有效降低豬病的發(fā)生幾率；二是，這種疫苗只需要很少的用量即可滿足豬免疫保護(hù)的需要，同時，疫苗的藥效長，效果好，可以有效降低接種疫苗的成本。但同時，非復(fù)制性活載體還有一定的缺點，豬PRV基因缺失會與其他病毒進(jìn)行重組，會加劇病毒的毒害性，人在使用這種肉產(chǎn)品會造成嚴(yán)重的安全隱患。相關(guān)學(xué)者以40例豬為例，展開了對比試驗研究，隨機分組，分成2組，各20例，其中對照組給予常規(guī)治療，研究組給予非復(fù)制性活載體疫苗，其結(jié)果顯示，研究組的防治效果為100%，明顯高于對照組，差異顯著。

2.1.2復(fù)制性活載體

這種疫苗主要是利用生物基因工程技術(shù)，對一種病毒或細(xì)菌的相關(guān)基因進(jìn)行免疫，病將其整合到另一種活載體的病毒或細(xì)菌中，對其進(jìn)行重組，并通過接種疫苗的方式來刺激豬體內(nèi)的免疫機能，從而達(dá)到增強免疫能力的效果。

2.2亞單位疫苗

所謂的亞單位疫苗主要指的是利用微生物的表面抗原成分，使其形成一種不具有核酸，但能激發(fā)豬體內(nèi)機能免疫力的疫苗，將這一類的疫苗統(tǒng)稱為他單位疫苗，這種疫苗具有較高的實效性，能有效控制豬的病情，并在豬圓環(huán)病毒等方面能起到很好的防治作用。

2.3加強豬群管理

在豬的常見疾病中，豬偽狂犬病是比較難治愈的病種，但發(fā)病后造成較高的發(fā)病率，對養(yǎng)殖戶造成了嚴(yán)重的損失，對此，養(yǎng)殖戶要不斷對豬群的健康情況進(jìn)行檢測，可利用采血檢測法進(jìn)行診斷，當(dāng)檢測結(jié)果為陽性時，要對相關(guān)的豬進(jìn)行淘汰，每隔1個月進(jìn)行檢測1次，一直到連續(xù)2次檢測結(jié)果全為陰性為止，可以有效保證豬群的健康水平，避免出現(xiàn)發(fā)病情況。

2.4制備豬用干擾素

有關(guān)干擾素制備的研究，在世界范圍內(nèi)最早開始于上世紀(jì)五十年代末期的英國當(dāng)中。通過制備豬用干擾素可以針對個別疑難雜癥類型的豬病病癥，提升對其進(jìn)行提前抵御和防備的工作診療能力。在通常情況下，豬用干擾素的研發(fā)和應(yīng)用，可以根據(jù)其針對診療病癥的各不相同，進(jìn)一步劃分為不同類型的組織存在模式。一型干擾素和二型干擾素等，是目前國內(nèi)用于診治豬病病毒比較具有代表性的干擾素存在形態(tài)。相比一型干擾素的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)，二型干擾素的抗病毒能力更加突出。

結(jié)束語

隨著市場經(jīng)濟的發(fā)展，我國的養(yǎng)豬業(yè)得到了快速發(fā)展，開始向規(guī)模化、產(chǎn)業(yè)化方向發(fā)展，促使我國國民經(jīng)濟快速發(fā)展，但同時，加大了病毒的破壞性與傳染性，會給養(yǎng)豬業(yè)帶來非常嚴(yán)重的影響，對此，需要養(yǎng)殖戶提高防范意識，做好管理工作，防止出現(xiàn)病豬等情況，同時，要使用先進(jìn)的診斷技術(shù)，保證診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性，并制定相應(yīng)的醫(yī)治措施，從而促使我國養(yǎng)豬業(yè)快速發(fā)展。