仔豬關節炎病原的分離鑒定

郭世棟 穆娟 李樂

摘要：某一養豬場，60日齡的斷奶仔豬2000頭，其中，12多頭60日齡的斷奶仔豬，出現精神沉郁，食欲廢覺，發燒41～42℃，出現了嚴重的食欲廢覺，個別的60日齡的斷奶仔豬出現了典型的癥狀后肢關節對稱性腫脹，關節炎及腫大，個別的斷奶仔豬不表現任何的癥狀出現突然死亡。為了確定引起60日齡的斷奶仔豬關節炎及突然死亡的病原菌，對突然死亡及關節炎的60日齡的斷奶仔豬進行剖檢，無菌采集肝臟、關節滲出液等病料組織進行細菌的分離與鑒定，分離1株病原菌，對從死亡的仔豬體內分離的1株病原菌通過培養特性鑒定、形態學觀察、生化特性鑒定、致病性試驗等鑒定方法，分離到的1株病原菌被鑒定為致病性鏈球菌。因而，證實了引起60日齡的斷奶仔豬關節炎及突然死亡的病原菌為致病性鏈球菌，因此，對分離的仔豬致病性鏈球菌進行藥敏試驗。結果顯示，分離的仔豬致病性鏈球菌對頭孢曲松、氨芐西林、阿莫西林、頭孢拉啶、恩諾沙星、青霉素6種藥物高度敏感。

關鍵詞：仔豬；鏈球菌；分離鑒定；

隨著我國養豬業的發展，在我國的大部分地區豬的養殖已經形成集約化養殖及規模化養殖。豬的相關的傳染性疾病越來越多，越來越復雜。養殖戶對豬的相關的傳染性疾病也愈來愈重視。一般的豬的相關的傳染性疾病主要包括病毒性、細菌性疾病。其中，鏈球菌病是斷奶仔豬急性死亡和關節腫脹的主要病原菌，仔豬感染了鏈球菌后，死亡率均較高能達到70%以上，仔豬的鏈球菌病，嚴重危害著養豬業的發展。因此，斷奶仔豬的鏈球菌病成為臨床上常見的細菌性傳染性疾病之一，仔豬鏈球菌病是由鏈球菌引起不同階段豬的一種急性、熱性、敗血性傳染病，斷奶仔豬的鏈球菌可以感對不同階段的豬，斷奶仔豬的鏈球菌感染率和死亡率均較高。尤其對仔豬的致病性最強，危害最嚴重。斷奶仔豬的鏈球菌發病無明顯的季節性，常年均有引發仔豬發病，臨床上主要表現為急性敗血癥，關節腫脹等，表現神經癥狀，渾身抽搐，麻痹死亡。本文作者通過60日齡發病突然死亡和關節炎斷奶仔豬的臨床癥狀表現、病理剖檢變化、實驗室綜合診斷技術、致病性試驗，確定引起60日齡的斷奶仔豬關節炎及突然死亡的病原菌為鏈球菌，并對鏈球菌進行了藥敏試驗，分析其耐性。

（1）發病情況。某一養豬場，60日齡的斷奶仔豬2000頭，其中，12多頭60日齡的斷奶仔豬，出現精神沉郁，食欲廢覺，發燒41～42℃，出現了嚴重的食欲廢覺，個別的60日齡的斷奶仔豬出現了典型的癥狀后肢關節對稱性腫脹，個別的斷奶仔豬不表現任何的癥狀出現突然死亡。

（2）仔豬的臨床證狀。60日齡的斷奶仔豬2000頭，其中，12多頭60日齡的斷奶仔豬，出現精神沉郁，食欲廢覺，發燒41～42℃，出現了嚴重的食欲廢覺，個別的60日齡的斷奶仔豬出現了典型的癥狀后肢關節對稱性腫脹，關節腫大，個別的斷奶仔豬不表現任何的癥狀出現突然死亡

（3）病理剖檢變化。剖檢變化可見，仔豬的肝臟腫大、出血，形成出血斑，呈藍紫色；關節炎腫脹，切開后，有炎性滲出物滲出，關節面腫脹。全身的頜下淋巴結、腹股溝管淋巴結、腸系膜淋巴結出血與腫大；病死豬的腹腔內有大量的淡黃色滲出液，氣管、喉頭剖檢可見有不同程度的腫脹、出血；胃底部區及腸道有出血點，腸壁變薄，腸黏膜脫落；

（4）細菌分離培養與形態學觀察。無菌采集60日齡斷奶死亡的仔豬的肝臟、關節滲出液等病料組織接種于7%綿羊脫纖血液營養培養基上，置 37℃培養箱中培養12-16h后，在7%綿羊脫纖血液營養培養基生長出淡灰色、大小一致透明、圓形小菌落，菌落呈現典型的β溶血現象，呈現典型的β溶血現象的菌落進行革蘭氏染色觀察，顯微鏡下可見分離菌株呈單個的或者雙排列的陽性球菌。

（5）分離菌株的生化鑒定。挑取7%綿羊脫纖血液營養培養基上單個菌落接種于含5% 血清的TSB 培養基里， 37℃震蕩培養12-16h后，調整菌液的濃度為2個麥氏濁度，按照要求加入生化鑒定的試紙條中，置 37℃培養箱中培養24后，根據生化試紙條的變化進行判定細菌的種類。結果顯示，分離菌株被鑒定為鏈球菌。

（6）細菌的的致病性試驗。將純化培養的分離的鏈球菌的， 置37℃震蕩培養12-16h后，調整菌液濃度（108cfu /mL），將20只小白鼠分為2組，每組10只，第一組每只小白鼠肌肉注射劑量為0.5 mL（108cfu /mL），第2組，肌肉注射等量的生理鹽水，攻毒12h后開始觀察7天，并記錄每組小鼠的死亡數和發病情況，結果顯示，在攻毒后的48～72h后，第1組小鼠出現死亡，死亡率為90%，至到7d，死亡率100%，第2組小鼠健康的存活，因而，從斷奶死亡的仔豬體內分離鏈球菌對具有很強的致病性。

（7）分離菌株的藥敏試驗。將純化培養的分離的鏈球菌無菌涂布在7%綿羊脫纖血液營養培養基上，貼上藥敏紙片，置 37℃培養箱中培養12-16h后測量抑菌直徑，藥敏試驗結果顯示，分離的仔豬鏈球菌菌株對頭孢曲松、氨芐西林、阿莫西林、頭孢拉啶、恩諾沙星、青霉素6種藥物高度敏感。

總之，引起仔豬關節炎和突然死亡的病原菌為致病性鏈球菌，藥敏試驗結果顯示，致病性鏈球菌對分離的仔豬鏈球菌菌株對頭孢曲松、氨芐西林、阿莫西林、頭孢拉啶、恩諾沙星、青霉素6種藥物高度敏感。

參考文獻：

[1]邵靚，陳斌，周莉媛，陳弟詩，湯芳，陸承平. 四川地區一株豬鏈球菌16型菌株的分離與鑒定[J]. 畜牧與獸醫，2017，49（05）：109-111.

[2]惠艷華，丁寧，沈莉萍，等.一例豬鏈球菌2型感染的病原分離鑒定及藥敏試驗[J].中國動物檢疫，2017，34（08）：97-99.