乙肝五項標志物兩種方法檢測結果對比觀察

程曉彤

（遼寧省遼陽市傳染病醫院，遼寧 遼陽 111000）

乙肝五項標志物兩種方法檢測結果對比觀察

程曉彤

（遼寧省遼陽市傳染病醫院，遼寧 遼陽 111000）

目的 對比分析酶聯免疫法（Elisa）與化學發光微粒子免疫分析法（CMIA）對乙肝五項標志物檢測效果。方法隨機選取確診為HBV感染的患者200例和同期在本院進行體檢的正常健康人群30例。所有納入本次研究的研究對象均通過半自動高通量Elisa方法和CMIA法對其HBV血清標志物進行檢測，對比兩種檢測方法的CV值差異。結果CMIA檢測各項HBV血清標志物的CV值（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb以及HBcAb的CV值分別為3.62%、5.52%、3.61%、8.20%和18.12%）均顯著小于Elisa（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb以及HBcAb的CV值分別為7.11%、12.31%、7.98%、11.82%和22.23%）（P＜0.05），檢測符合率（96.64%）顯著大于Elisa法（87.52%）（P＜0.05）；CMIA與Elisa檢測HBsAg最低濃度均可達到0.10 IU/mL，兩組對比差異無統計學意義。結論相對于半自動高通量Elisa檢測HBV血清標志物，全自動高通量CMIA檢測質量更高、重復性更好、檢測準確度和精確度更優。

酶聯免疫法；化學發光微粒子免疫分析法；血清標志物；乙肝

目前，我國各種乙肝病患的人數已經超過一億，并且流行病學研究表明[1-2]，家族間的垂直傳播是造成乙肝傳染患病的主要因素之一，所謂的家族間垂直傳播也就是指母親或者父親將乙肝病毒傳染給下一代。雖然目前對還為研究乙肝徹底治療的方法，但是對乙肝的預防幾乎可以達到100%的成功的效果。所以，對于感染乙肝病毒的成人夫妻，只要其按照嚴格的計劃免疫預防程序進行乙肝病毒的預防接種，就可以保證新生兒完全不會受到乙肝病毒的感染。因此，對疑似乙肝患者進行乙肝血清檢測可以有效的防治乙肝的傳播與傳染。本文即對比目前乙肝五項檢測中最為常用的Elisa法和CMIA法對乙肝五項標志物檢測結果的差異，為選擇最好的乙肝五項檢測方法提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 本次研究所納入的血清均為本院2014年1月～2016年1月確診為HBV感染的患者200例和同期在本院進行體檢的正常健康人群。200例確診為HBV感染的患者中男126例和女74例，年齡26～62周歲，平均年齡（40.31+6.75）周歲。30例健康人群中男15例和女15例，年齡25～65周歲，平均年齡（40.05+6.81）周歲。所有納入本次研究的血清來源對象均由本次研究的研究人員向其詳細介紹本次研究目的、意義以及主要研究內容的前體下，自愿加入本次研究，簽訂知情確認書后方進行本次研究。

1.2 儀器與試劑 半自動高通量Elisa檢測儀器：型號，安圖斯PHOMO全自動酶標儀[安圖實驗儀器(鄭州)有限公司]。所有ELisa法檢測乙肝五項血清標志物的試劑和試劑盒均購買于英科新創(廈門)科技有限公司。

全自動板式發光免疫分析法檢測儀器：ADC CLIA 400全自動板式發光免疫分析儀（生產商：煙臺艾德康生物科技有限公司）。所有CMIA法檢測乙肝五項血清標志物的試劑和試劑盒均購買于鄭州安圖生物工程股份公司。

1.3 療效評價標準 Elisa法陽性判斷以所購買安圖實驗儀器有限公司，型號是phomo全自動酶標儀，以英科新創(廈門)科技有限公司的試劑所配備的陽性判斷說明書為準，即當S/CO＞1.0為陽性（其中S代表檢測病患血液樣本的OD值，CO為檢測臨界OD值）。而HBeAb與HBcAb則是以S/CO不超過1.0為陽性。

CMIA檢測法陽性的判定則是直接以測定乙肝血清標志物的濃度為準。

1.4 統計學方法 本次所有需要進行統計學分析的數據均選用統計學分析軟件SPAA19.0進行分析，計數資料以百分數和例數表示，組間的比較采用χ2檢驗；計量資料采用“x±s”表示，組間的比較采用t檢驗；以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩種檢測方法CV值對比分析 CMIA檢測各項HBV組血清標志物的CV值均顯著小于Elisa組（P＜0.05），檢測符合率為96.64%，顯著大于Elisa法的87.52%（P＜0.05）。見表1。

表1 兩種高通量Elisa檢測方法對HBV血清標志物檢測符合率和CV值對比分析（%）

2.2 兩種檢測方法檢測HBsAg最低濃度對比分析 CMIA與Elisa檢測HBsAg最低濃度均可達到0.10 IU/mL，兩組對比差異無統計學意義。見表2。

表2 兩種檢測方法檢測HBsAg最低濃度對比分析

3 討論

慢性乙型肝炎（簡稱乙肝）是指乙肝病毒檢測為陽性，病程超過半年或發病日期不明確而臨床有慢性肝炎表現者。臨床表現為乏力、畏食、惡心、腹脹、肝區疼痛等癥狀。肝大，質地為中等硬度，有輕壓痛。病情重者可伴有慢性肝病面容、蜘蛛痣、肝掌、脾大，肝功能可異常或持續異常。根據臨床表現分為輕度、中度和重度。而慢性乙肝攜帶是指乙肝病毒檢測為陽性，無慢性肝炎癥狀，1年內連續隨訪3次以上血清ALT和AST均無異常，且肝組織學檢查正常者[3]。

酶聯免疫吸附測定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體結合專一性進行免疫反應的定性和定量檢測方法。目前，酶聯免疫法是臨床上檢測乙肝五項最為普遍的方法之一，但是由于酶聯免疫法實驗步驟較多，存在多種影響實驗結果的因素，所以極易造成Elisa檢測結果誤差較大[4]。因此，對Elisa實驗的各個步驟進行標準化系統化的建立十分重要[5-6]。但是，目前我國各級醫院Elisa檢測實驗的自動化水平具有明顯的差異，這也造成目前我國醫院Elisa檢測各個步驟的標準化工作十分不完善[7]。

化學發光微粒子免疫分析法是在放射免疫分析法和Elisa檢測方法的基礎上進行有效的改進而新形成的一種檢測方法，這種新型的檢測方法不僅具備放射免疫分析法敏、特異、簡便易行、用樣量少等優點，而且兼具酶聯免疫分析法檢測快速、簡便、準確度高等優勢[8]。而本文所使用的ADC CLIA 400全自動板式發光免疫分析儀是采用微粒子化學發光的技術對人體內的微量成份以及藥物濃度進行定量測定，該系統具有高度的特異性、高度的敏感性、高度的穩定性等[9]。

本文對比目前最為常見的Elisa和CMIA法檢測方法對HBV血清標志物的進行檢測發現，CMIA檢測各項HBV血清標志物的CV值（BsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb以及HBcAb的CV值分別為3.62%、5.52%、3.61%、8.20%和18.12%）均顯著小于Elisa（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb以及HBcAb的CV值分別為7.11%、12.31%、7.98%、11.82%和22.23%）（P＜0.05），檢測符合率（96.64%）顯著大于Elisa法（87.52%）（P＜0.05）；CMIA與Elisa檢測HBsAg最低濃度均可達到0.10 IU/mL，兩組對比差異無統計學意義。造成Elisa法檢測CV值過高和檢測符合率較低主要原因可能是Elisa檢測方法靈敏度過高，且每兩個樣本之間檢測間隔過低導致容易出現樣本間的污染或者其他相互影響，進而導致較高的CV值以及顯著低于CMIA法的檢測符合率（P＜0.05）[10]。

綜上所述，相對于全自動高通量Elisa檢測HBV血清標志物，全自動MIA檢測質量更高、重復性更好、檢測準確度和精確度更優。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2017.07.031