高效液相色譜-蒸發光散射檢測器法測定琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素含量的方法

王書學

高效液相色譜-蒸發光散射檢測器法測定琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素含量的方法

王書學

目的探究高效液相色譜-蒸發光散射檢測器法測定琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素含量的應用效果。方法采用高效液相色譜-蒸發光散射檢測器法對琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素含量進行測量, 對該種方法的應用效果進行分析。結果在所設定的色譜條件下進行檢測, 記錄下峰面積。結果發現琥乙紅霉素的面積的相對標準偏差為0.93%(n=6), 表明試驗中設備儀器的精密度較好。精確獲取適量的供試品溶液, 在室溫下放置。按照設定的色譜條件在24 h內不同時間點測定, 對峰面積進行記錄。結果發現琥乙紅霉素的面積的相對標準偏差1.07%(n=6), 表明試品溶液穩定性較好。準確稱取供試品溶液多份, 在設定的色譜條件下測定, 對峰面積進行記錄。結果發現琥乙紅霉素的面積的相對標準偏差0.88%(n=6), 平均含量為98.65%。表明重復性較好。結論采用高效液相色譜-蒸發光散射檢測器法對琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素含量進行測定其精確度、穩定性以及靈敏度均較好。

高效液相色譜法；蒸發光散射檢測器法；琥乙紅霉素

琥乙紅霉素是一種抗菌效果較好的大環內脂類藥物, 該藥物被普遍的應用于臨床抗菌治療中。琥乙紅霉素片的藥效在很大的程度上取決于琥乙紅霉素的含量, 因此準確的測量其含量能夠對該藥物的臨床應用效果進行評定。過去在對琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素的含量進行測定方時通常采用微生物檢定法, 該種方法不僅操作較為復雜, 而且容易受到各種因素的影響而導致測量結果精確度較小。在對琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素含量進行測定時需要選用較為高效且精準度較高的檢測方法, 以便獲得更為準確的檢測數據。也有報道中指出選用高效液相色譜法對其含量進行測定, 但是在檢測時往往均是采用紫外檢測器［1］。由于紫外檢測器在進行測量時僅僅是在紫外末端才能夠吸收琥乙紅霉素, 因此造成檢測結果難以提高。在本文的研究中就在蒸發光散射檢測器下采用高效液相色譜法對其含量進行檢測, 取得了較好的效果。現報告如下。

1 儀器與藥品

研究中所選用的儀器為HPLC儀由e2695泵、蒸發光散射檢測器以及色譜工作站組成；GHB-4000型數控超聲波清洗器(上海工洲閥門有限公司, 功率300 W, 頻率：25 kW)；超精準電子天平［捷久計量衡器(上海)有限公司］。所使用的藥品為琥乙紅霉素片(西安利君制藥股份有限公司, 國藥準字H61022359, 規格：0.125 g×24片)。除乙腈為色譜純外,其他均為分析純。而在研究中所使用的水為超純水。

2 方法與結果

2. 1 在本次研究中所選用的色譜條件具體見表1。

表1 色譜條件

2. 2 溶液的制備

2. 2. 1 對照品溶液 將精準測量的琥乙紅霉素對照品放入到量瓶中, 向量瓶中加入適量的乙腈進行定容。最終所獲取的溶液要保證每ml溶液中含有1.216 mg的琥乙紅霉素, 將該溶液靜置以備使用。將上述所獲取的溶液精確量取4 ml,將其置入到10 ml的量瓶中［2］。再次加入乙腈進行定容處理,最終所獲取的溶液要保證每1毫升溶液中含有0.486 mg的琥乙紅霉素, 該溶液作為對照品溶液。

2. 2. 2 供試品溶液 將琥乙紅霉素片精確稱取, 將其研磨均勻后放入到100 ml量瓶中。在量瓶中加入乙腈溶液進行使其充分溶解, 對其進行超聲溶解。靜置冷卻后再次加入乙腈進行定容, 將其搖勻濾過后取其濾液［3］。

2. 2. 3 陰性對照溶液 按照供試品的配置方法選用不含琥乙紅霉素的輔料制備陰性對照溶液［4］。

在上述色譜條件下對對照品溶液、供試品溶液以及陰性對照溶液進行檢測, 檢測結果見圖1。

圖1 檢測結果

2. 3 精密度試驗在所設定的色譜條件下進行檢測, 記錄下峰面積。結果發現琥乙紅霉素的面積的相對標準偏差為0.93%(n=6), 表明試驗中設備儀器的精密度較好。

2. 4 穩定性試驗精確獲取適量的供試品溶液, 在室溫下放置。按照設定的色譜條件在24 h內不同時間點測定, 對峰面積進行記錄。結果發現琥乙紅霉素的面積的相對標準偏差1.07%(n=6), 表明試品溶液穩定性較好。

2. 5 重復性試驗準確稱取供試品溶液多份, 在設定的色譜條件下測定, 對峰面積進行記錄。結果發現琥乙紅霉素的面積的相對標準偏差0.88%(n=6), 平均含量為98.65%。表明重復性較好。

3 討論

目前對琥乙紅霉素含量的測定有多種方法, 比如紫外分光光度法、微生物檢測法、電化學法等。以上檢測方法雖然在實際檢測中應用較為廣泛, 但是檢測的靈敏度較低且操作較為復雜［5］。及時探究出高效、簡單、精確度更高的檢測方法至關重要, 有報道曾指出高效液相色譜-蒸發光散射檢測器法測定琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素含量［6］。在進行試驗的過程中開始先使用流動相對對照組好樣品進行溶解, 但是試驗發現采用該種方法穩定性不理想［7］。通過對相關文獻資料的研究和以往經驗發現在進行溶解時選用乙腈作為溶解劑,其穩定性相對較好［8］。在本文的研究中就采用高效液相色譜-蒸發光散射檢測器法測定琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素含量,研究發現采用該種方法精密度、穩定性以及重復試驗的相對標準偏差均＜2.0%。

綜上所述, 采用高效液相色譜-蒸發光散射檢測器法對琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素含量進行測定方法簡單, 精確度、穩定性、以及靈敏度均較好, 值得推廣使用。

［1］ 李志得, 張彩云, 汪霞. HPLC-ELSD法測定琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素的含量. 中國藥房, 2016, 27(33):4744-4746.

［2］ 肖瑩, 彭鳳, 楊洪芹, 等. 近紅外光譜法在琥乙紅霉素片定量分析中的應用. 化學研究與應用, 2016, 28(7):954-959.

［3］ 王曉玲, 張萍, 王歡. 琥乙紅霉素與二甲酚橙荷移反應及其測定. 廣州化工, 2016, 44(7):125-127, 133.

［4］ 陳曦, 劉艷杰. 琥乙紅霉素片含量的微生物檢定與HPLC法分析比較. 北方藥學, 2016, 13(3):14-15.

［5］ 劉雅琴, 趙曉頔, 王偉娜, 等. 琥乙紅霉素片含量測定方法的改進. 中國藥師, 2012, 15(4):510-511.

［6］ 陳燕, 劉虹, 趙海鵬. 高效液相色譜法測定琥乙紅霉素片的含量. 中國藥品標準, 2015, 16(2):130-132.

［7］ 羅慧萍, 易秋艷, 王燦, 等. HPLC法測定琥乙紅霉素中游離紅霉素的含量. 藥物分析雜志, 2014, 34(12):2264-2268.

［8］ 王曉玲, 張萍, 陳燕. 甲基紅褪色光度法測定琥乙紅霉素. 應用化工, 2014, 43(9):1712-1714.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.08.100

2017-03-14］

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