正常和子癇前期孕婦氧化應激指標上限值的臨床研究

王 娟，李引弟，李 華，黃娟娟，張利平

(延安大學附屬醫院產科，陜西 延安 716000)

正常和子癇前期孕婦氧化應激指標上限值的臨床研究

王 娟，李引弟，李 華，黃娟娟，張利平

(延安大學附屬醫院產科，陜西 延安 716000)

目的 評估正常妊娠和妊娠期高血壓疾病(子癇前期)初產婦妊娠期間的氧化應激。方法 選擇2012年3月至2013年7月在延安大學附屬醫院孕期檢查的105例患者分為三組，其中A組為非妊娠女性(n=35)，B組為正常血壓的初產婦(n=35)，C組為子癇前期初產婦(n=35)；對采取的血標本分別測定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、總抗氧化能力(TAC)和尿酸(UA)水平。結果 正常妊娠孕婦MDA、SOD和UA水平與非妊娠女性相比顯著增加(P<0.05)；子癇前期孕婦MDA(q=15.691，P<0.001)、SOD(q=4.060，P=0.033)和UA(q=12.095，P=0.001)水平與正常妊娠孕婦相比很大程度增加；正常妊娠孕婦在TAC水平與非妊娠女性相比顯著降低(q=3.310，P=0.031)，子癇前期孕婦較正常妊娠孕婦有更低的TAC水平(q=6.983，P=0.010)；多因素分析顯示MDA、SOD、TAC和UA水平是影響子癇前期發生風險的顯著性因素(P<0.05)；MDA值為7.89μmol/L可以作為預測子癇前期癥狀發生的臨界值，其敏感性為76.74%，特異度為74.82%。結論 氧化應激是子癇前期發病的高風險因素，應盡可能的避免可導致氧化應激增強的危險因素。

氧化應激，妊娠，初產婦，高血壓，子癇前期

子癇前期是指孕前血壓正常的孕婦在懷孕20周后出現高血壓和蛋白尿等癥狀[1]，也是導致產婦、新生兒和胎兒的高死亡率和高發病率的重要因素[2-3]。孕婦在妊娠期間隨著對氧需求量的增加，生成活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)產物量也隨之增加，即使正常妊娠的孕婦與非妊娠女性相比也具有較高水平的氧化應激和脂質過氧化反應水平[4]。子癇前期孕婦其因氧化應激增加導致脂質過氧化、ROS和超氧陰離子自由基產物的增加，進而引發內皮細胞受損和功能紊亂(如血小板和中性粒細胞的激活)[5-6]。本研究通過測定正常妊娠孕婦和子癇前期孕婦的丙二醛(malondialdehyde，MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、總抗氧化能力(total anti-oxidant capacity，TAC)和尿酸(uric acid，UA)水平,以評估上述指標對子癇前期影響，現將結果報告如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選擇2012年3月至2013年7月在延安大學附屬醫院進行體檢和妊娠期檢查的女性，納入標準：①單胎初產妊娠；②孕前BMI≤24kg/m2；③孕周的計算結合末次月經時間、早孕反應時間和胎動出現時間及超聲診斷等方式確診；④無畸形胎兒；⑤孕婦無慢性高血壓貧血及其他心血管疾病史，孕期產前檢查肝腎功能均正常；⑥子癇前期確診前均無服用高血壓藥及心血管藥物史；⑦臨床資料完整。排除多胎妊娠，近期有急性感染及合并妊娠合并腎臟疾病，妊娠糖尿病，胎兒畸形者。子癇前期的診斷標準參照全國統編教材《婦產科學》[7]，結合上述納入和排除標準納入正常血壓的初產婦35例(B組)和子癇前期的初產婦35例(C組)，同時納入35例體檢健康的非妊娠期女性最為對照組(A組)。所有研究對象均簽署知情同意書，本研究經過醫院倫理道德委員會審核通過。

1.2氧化應激檢測

肘前靜脈采血6mL，將血標本收集在肝素化抗凝管中；血樣置于離心機中，3 000rpm離心10min，收集血清進行下一步的生化分析。

血清中MDA (南京建成生物工程研究所)的測定采用硫代巴比妥酸反應物(thiobarbituric acid-reactive substances，TBARS)的方法；SOD(南京建成生物工程研究)的測定按照試劑盒說明書采用黃嘌呤氧化酶法。TAC(碧云天生物技術研究所)的測定按照試劑盒說明書采用亞鐵還原能力(fluoride-resistant acid phosphatase，FRAP)法進行測定，UA(寧波亞太生物技術有限責任公司)的測定按照試劑盒說明書采用Uricase-PAP法。通過 INFINITE M 200 酶標儀檢測。每份血清標本均檢測3次，取平均值。

1.3統計學方法

2結果

2.1三組初產婦的基本信息比較

三組初產婦基本信息比較無顯著性差異(均P>0.05)，見表1。

2.2 三組初產婦MDA、SOD、TAC和UA水平比較

正常血壓初產婦的MDA(q=5.773，P=0.013)、SOD(q=8.982，P=0.009)和UA(q=3.845，P=0.024)水平顯著性高于非妊娠女性，而TAC水平顯著低于非妊娠女性(q=3.310，P=0.031)；子癇前期初產婦的MDA(q=15.691，P<0.001)、SOD (q=4.060，P=0.033)和UA(q=12.095，P=0.001)水平顯著性高于正常血壓初產婦(P<0.010)，而TAC水平顯著低于正常血壓初產婦(q=6.983，P=0.010)，見表2。

組別A組(n=35)B組(n=35)C組(n=35)F/χ2/tP年齡(歲)24．53±1．2424．31±1．6526．44±2．131．5870．768BMI(kg/m2)23．43±0．7225．41±0．6226．15±0．942．3340．404吸煙2(5．71)3(8．57)2(5．71)1．1450．901本科及以上29(82．86)30(85．71)30(85．71)1．0340．913流產次數0．50±0．400．50±0．500．60±0．401．3160．864懷孕時間-20．43±3．4521．12±2．841．8540．582

2.3子癇前期發生風險的多因素分析

多因素回歸分析顯示，MDA、SOD、TAC和UA是影響子癇前期發生風險顯著性因素(P<0.05)；而BMI、懷孕時間、吸煙史和流產次數并不是子癇前期的發生風險的顯著性影響因素(P>0.05)，詳見表3。

項目A組(n=35)B組(n=35)C組(n=35)MDAnmol/mL4．13±0．515．32±0．53?7．98±0．66△□SODIU/L312．7±78．6714．6±131．2?918．7±149．8△□TACIU/mL16．74±2．1210．55±3．03?5．02±0．97△□UAmg/dL3．32±0．475．64±0．72?8．33±1．12△□

注：*A組vs B組P<0.05；△A組vs C組P<0.05；□B組vs C組P<0.05。

表3 多因素分析子癇前期風險的影響變量

2.4 MDA預測子癇前期的臨界值

采用ROC曲線分析MDA在預測子癇前期發生風險的臨界值，其ROC曲線下面積為0.764(95%CI：0.504～0.923)，MDA值為7.89 μmol/L可以作為預測子癇前期發生風險的臨界值，其敏感性為76.74%，特異度為74.82%，見圖1。

圖1 MDA對子癇前期預測的ROC曲線分析

Fig.1 ROC curve analysis of MDA for prediction of preeclampsia

3 討論

3.1 氧化應激指標MDA水平對子癇前期的預測作用

MDA是脂質過氧化反應的產物，氧化劑通過破壞多不飽和脂肪酸的雙鍵而形成過氧化反應產物MDA，因此MDA水平可以作為氧化應激的間接指標[8-9]。先前的研究表明妊娠女性與非妊娠女性相比其MDA水平顯著性增加[10]，子癇前期孕婦血清中MDA的濃度也顯著性的高于非妊娠女性[11]，上述的研究結果也與我們的研究結果相一致；子癇前期孕婦與正常孕婦相比其血漿和胎盤中有更高的MDA水平，MDA水平也隨著子癇前期的嚴重程度增加而增加[8]。因此，MDA可以作為一個重要的氧化應激指標以預測子癇前期發生風險，本研究結果表明MDA值為7.89 μmol/L可以作為預測子癇前期癥狀發生風險的臨界值，其敏感性為76.74%，特異度為74.82%。

3.2其它指標(SOD、TAC和UA)對子癇前期的影響

本研究還發現妊娠期間SOD的活性顯著性增加，早期的研究發現妊娠晚期SOD水平明顯高于非妊娠女性[9]，SOD活性水平也與子癇前期癥狀的程度有關[12]。這也與本研究結果相類似。本研究同時并未對不同妊娠時期和不同子癇前期程度的初產婦的氧化應激進行分層分析，但是根據之前的研究結果提示隨著妊娠期時間的變化和子癇前期程度的增加MDA水平和SOD水平顯著性增加的[10-11]。

妊娠期間TAC的減少可以作為增加氧化劑的消耗或者降低氧化劑的生成重要指標。正常妊娠期孕婦與子癇前期孕婦相比TAC水平呈現急劇性的下降。相關的研究也顯示懷孕30周的孕婦TAC水平明顯的低于非妊娠女性[10]，TAC水平的顯著性降低可以作為非酶類抗氧化劑(維生素E、A和C)水平降低的指標。本研究結果也顯示，子癇前期孕婦的TAC水平明顯的低于正常妊娠女性和非妊娠女性，同時TAC水平降低會增加孕婦子癇前期的發生風險。子癇前期孕婦和正常血壓孕婦相比，其血清中總的抗氧化活性和谷胱甘肽水平的均降低，這也與本研究中TAC水平的變化相類似。本研究雖未對子癇前期患者后期的妊娠結局和新生兒的結局進行分析，但根據Namdev等[8]研究結果表明氧化應激和總抗氧化能力可以作為預測子癇前期孕婦新生兒臨床結局的重要預測因素。

根據血漿中UA水平評估的結果顯示妊娠期間UA水平呈現增加的趨勢，并且尤其在子癇前期的妊娠期女性增加的更為明顯。子癇前期UA的增加可引起胎盤的局部缺血或者損傷，隨之增加ROS產物進而導致過度的核苷酸代謝，進而影響妊娠結局和圍產兒預后[13-14]。

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[專業責任編輯：于學文]

Clinical study on levels of upper limit of oxidative stress markers between preeclampsia and normal pregnant women

WANG Juan, LI Yin-di, LI Hua, HUANG Juan-juan, ZHANG Li-ping

(DepartmentofObstetrics,HospitalofYan’anUniversity,ShaanxiYan’an716000,China)

Objective To assess the oxidative stress during uncomplicated pregnancy and pregnancy associated with hypertension in primipara. Methods A total of 105 women were enrolled and divided into 3 groups, group A of healthy non-pregnant women (n=35), group B of primipara with normal blood pressure (n=35) and group C of preeclamptic primipara (n=35). Blood samples were analyzed for levels of malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase (SOD), total anti-oxidant capacity (TAC) and uric acid (UA) using appropriate biochemical methods. Results The levels of MDA, SOD and UA increased significantly in pregnant women compared to non-pregnant women (P<0.05) and to a greater extent in preeclampsia women compared to normal pregnant women(qMDA=15.691,P<0.001), (qSOD=4.060,P=0.033) and(qUA=12.095,P=0.001). TAC levels were significantly decreased in pregnant women when compared to non-pregnant women (q=3.310,P=0.031), and it was lower in preeclampsia women than in normal pregnant women (q=6.983,P=0.010). Multiple-factors analysis showed that MDA, SOD, TAC and UA were the significant risk factors of preeclampsia (P<0.05). An MDA value of 7.89μmol/L could be used as a cut-off value to predict preeclampsia symptoms, and the sensitivity was 76.74% and specificity was 74.82%. Conclusion Oxidative stress is the high-risk factor of pathogenesis of preeclampsia. Risk factors which may cause oxidative stress should be avoided.

oxidative stress; pregnancy; primipara; hypertension; preeclampsia

2016-11-04

王 娟(1983-),女，主治醫師，主要從事婦產科疑難病癥診斷和治療工作。

張利平，副主任醫師

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.04.016

R714.24

A

1673-5293(2017)04-0411-03