骨橋蛋白表達與食管鱗狀細胞癌及其臨床病理特征關系的Meta分析

代玉娟張恩環陳大朝*

骨橋蛋白表達與食管鱗狀細胞癌及其臨床病理特征關系的Meta分析

代玉娟①張恩環①陳大朝①*

目的：系統評價骨橋蛋白(OPN)表達與食管鱗狀細胞癌及其臨床病理特征的關系。方法：計算機檢索PubMed、The Cochrane Library、EMbase、CBM、CNKI、VIP和WanFang Data數據庫，并輔以文獻追溯的方法，收集有關于OPN表達與食管鱗狀細胞癌及其與臨床病理特征關系的研究。檢索年時限截至2017年1月。由2位研究者按照納入與排除標準篩選文獻、提取資料并評價納入研究的方法學質量后，應用RevMan 5.2軟件進行Meta分析。結果：共納入12個病例-對照研究，其中食管鱗狀細胞癌782例，對照組700例。Meta分析結果：OPN在食管鱗狀細胞癌組與對照組表達OR=52.71，95%置信區間(CI)為17.95，154.79；OPN在臨床Ⅰ～Ⅱ期組與臨床Ⅲ～Ⅳ期組表達OR=0.20，95%CI為0.07，0.60；OPN在有淋巴結轉移組與無淋巴結轉移組表達OR=6.37，95%CI為3.64，11.15；OPN在T1＋T2組與T3＋T4組表達OR=0.31，95%CI為0.15，0.64；OPN在各組表達差異均有統計學意義。結論：OPN表達與食管鱗狀細胞癌及其臨床病理特征有顯著相關性。受納入研究樣本量和質量限制，上述結論需進一步開展高質量研究加以驗證。

骨橋蛋白；表達；食管鱗狀細胞癌；系統評價；Meta分析；病例-對照研究

食管癌是常見的消化道惡性腫瘤之一，其全球的發病率及病死率分別位于第9位及第6位，食管癌也是我國最常見的惡性腫瘤之一，在我國其發病率位于第3位[1-3]。因此，更深入了解食管鱗狀細胞癌發生的分子生物學機制，尋找抗癌藥物新的作用靶點具有重要意義。近年來的研究顯示，骨橋蛋白(osteopontin，OPN)在人類多種腫瘤的發生發展過程中起重要作用，其過度表達與食管鱗狀細胞癌也有密切聯系[4-16]。但其在食管鱗狀細胞癌的表達及作用的研究結果不盡相同。因此，本研究在盡可能全面收集國內發表的相關文獻基礎上，采用Meta分析的方法對收集的證據進行全面分析，為明確OPN與食管鱗狀細胞癌的臨床病理因素的關系提供更精確的循證醫學證據。

1 資料與方法

1.1 研究類型

病例-對照研究，納入12個病例，對食管鱗狀細胞癌組(782例)與對照組(700例)進行對照研究。文種限中文、英文。

1.2 納入與排除標準

(1)納入標準：①所有食管鱗狀細胞癌病例均有完整臨床病理資料；②取材前均未經放療或化療；③此病例無年齡限制。

(2)排除標準：①OPN檢測方法為非免疫組織化學方法；②重復報告或資料雷同、質量較差等無法利用的文獻；③非食管鱗狀細胞癌的文獻；④無對照組的文獻；⑤綜述、細胞或動物試驗文獻等。

1.3 研究方法

(1)資料采集。在收集國內發表的相關文獻基礎上，采用Meta分析的方法對收集的資料進行全面分析。

(2)OPN檢測方法。OPN檢測方法為免疫組織化學方法，評定標準采用半定量記分法。

1.4 資料檢索

計算機檢索PubMed、The Cochrane Library、EMbase、CBM、CNKI、VIP和WanFang Data數據庫，并輔以文獻追溯的方法，收集關于OPN表達與食管鱗狀細胞癌及其臨床病理特征關系的病例對照研究。檢索時限截至2017年1月。檢索詞包括OPN、osteopontin、骨橋蛋白、食管癌、食管腫瘤和食管惡性腫瘤等。以CMB為例，其具體檢索策略如圖1所示。

圖1 CBM檢索策略框圖

1.5 文獻篩選及質量評價標準

(1)對文獻的篩選，由2位評價員閱讀文題和摘要并進行初篩，從排除文獻中隨機抽取10%進行全文閱讀，檢查一致率，結果為100%。閱讀全文進行二次篩選，最終根據納入與排除標準決定文獻是否被納入。從納入文獻中提取信息包括編號、文題、作者、發表年限、原始文獻出處、樣本大小、食管鱗狀細胞癌患者性別、年齡、腫瘤深度、臨床分期、腫瘤大小、組織學分級以及有無淋巴結轉移等。

(2)采用觀察性研究偏倚風險的評估工具NOS量表對納入研究的方法學質量進行評價[4，17]。

1.6 統計學方法

分析采用Cochrane協作網提供的RevMan5.2軟件，計算優勢比(OR)及其95%置信區間(confidence interval，CI)作為效應量表示結果。采用x2檢驗分析各研究結果間的異質性，檢驗水準設為α=0.1。如果P＞0.1，提示各研究結果間具有同質性，則選擇固定效應模型分析。如果P＜0.1，提示各研究結果間存在統計學異質性，則選擇隨機效應模型進行Meta分析。通過漏斗圖了解文章潛在的發表偏倚，異質性來源采用敏感性分析進行處理，或僅行描述性分析。

2 結果

2.1 檢索結果

初檢出文獻126篇，經過逐層篩選最終納入12個病例進行對照研究[5-16]。文獻篩選流程及結果如圖2所示。

圖2 文獻篩選流程及結果框圖

2.2 基本特征和質量評價

在12個研究[5-16]完整報告中，納入研究的對照來源、食管鱗癌組例數及對照組例數、每個研究的質量評價總分等基本特征(見表1)。

表1 納入分析研究的基本特征

表1顯示，12個研究[5-16]完整報告了OPN在食管鱗狀細胞癌組織及對照組中的表達情況，7個研究[5，7，9，11，13，15，16]報告了OPN在食管鱗狀細胞癌不同性別中的表達情況，4個研究[5，7，9，15]報告了食管鱗狀細胞癌不同年齡段中的OPN表達情況，6個研究[5，7，9，12-13，15]報告了食管鱗狀細胞癌不同組織學分級中OPN表達情況，8個研究[8-12，14-16]完整報告了食管鱗狀細胞癌不同臨床分期中OPN表達情況，11個研究[5，7-16]報告了食管鱗狀細胞癌有無淋巴結轉移中OPN表達情況，3個研究[5，9，15]報道了食管鱗狀細胞癌不同腫瘤大小中OPN表達情況，8個研究[8-13，15，16]報告了食管鱗狀細胞癌不同浸潤深度中OPN表達情況。

2.3 OPN表達分析結果

2.3.1 食管鱗狀細胞癌組與對照組的OPN表達

納入的12篇文獻[5-16]均報告了食管鱗狀細胞癌組與對照組的OPN表達情況，其中食管鱗狀細胞癌組782例，對照組700例。各研究間有統計學異質性(P＜0.00001，I2=83%)，故采用隨機效應模型進行Meta分析。結果顯示，食管鱗狀細胞癌組OPN表達更高，兩組OPN表達比較差異有統計學意義(OR=52.71，95%CI為17.95，154.79；P＜0.00001)，如圖3所示。

2.3.2 OPN在食管鱗狀細胞癌患者不同性別中的表達

共納入7篇文獻[5，7，9，11，13，15，16]，食管鱗狀細胞癌患者中男性320例，女性183例。各研究間無統計學異質性(P=0.83，I2=0%)，故采用固定效應模型進行Meta分析。結果顯示，兩種性別OPN表達比較差異無統計學意義(OR=1.33，95%CI為0.87，2.03；P=0.19)，如圖4所示。

圖3 OPN表達與食管鱗狀細胞癌關系的Meta分析

圖4 OPN表達與食管鱗狀細胞癌患者性別關系的Meta分析

2.3.3 OPN在食管鱗狀細胞癌患者不同年齡段中的表達

共納入4篇文獻[5，7，9，15]，食管鱗狀細胞癌的患者中≥60歲196例，＜60歲139例。各年齡段間研究差異無統計學異質性(P=0.97，I2=0%)，故采用固定效應模型進行Meta分析。結果顯示，兩年齡段間OPN表達比較差異無統計學意義(OR=1.16，95%CI為0.72，1.87；P＞0.05)，如圖5所示。

圖5 OPN表達與食管鱗狀細胞癌患者年齡段關系的Meta分析

2.3.4 OPN在食管鱗狀細胞癌不同組織學分級中的表達

共納入6篇文獻[5，7，9，12-13，15]，其中食管鱗狀細胞癌高中分化患者319例，低未分化患者140例。各研究兩者間有統計學異質性(P=0.05，I2=54%)，故采用隨機效應模型進行Meta分析。結果顯示，兩者間OPN表達比較差異無統計學意義(OR=1.29，95%CI為0.63，2.67；P＞0.05)，如圖6所示。

2.3.5 OPN在食管鱗狀細胞癌不同臨床分期中的表達

圖6 OPN表達與食管鱗狀細胞癌不同組織學分級關系的Meta分析

共納入8篇文獻[8-12，14-16]，其中食管鱗狀細胞癌臨床分期為Ⅰ～Ⅱ期患者271例，臨床Ⅲ～Ⅳ期患者267例。各研究間有統計學異質性(P=0.0008，I2=72%)，故采用隨機效應模型進行Meta分析。結果顯示，臨床Ⅲ～Ⅳ期組表達更高，兩種臨床分期間OPN表達比較差異有統計學意義(OR=0.20，95%CI為0.07，0.60；P＜0.05)，如圖7所示。

圖7 OPN表達與食管鱗狀細胞癌不同臨床分期關系的Meta分析

2.3.6 OPN在食管鱗狀細胞癌有無淋巴結轉移中的表達

共納入11篇文獻[5，7-16]，其中有淋巴結轉移的患者386例，無淋巴結轉移的患者351例。各研究間有統計學異質性(P=0.08，I2=40%)，故采用隨機效應模型進行Meta分析。結果顯示，有淋巴結轉移患者OPN表達更高，與無淋巴結轉移患者間表達比較，差異有統計學意義(OR=6.37，95%CI為3.64，11.15；P＜0.05)，如圖8所示。

圖8 OPN表達與食管鱗狀細胞癌有無淋巴結轉移關系的Meta分析

2.3.7 OPN在食管鱗狀細胞癌不同腫瘤大小中的表達

共納入3篇文獻[5，9，15]，其中腫瘤≥5 cm的食管鱗狀細胞癌患者88例，腫瘤＜5 cm的食管鱗狀細胞癌患者185例。各研究間有統計學異質性(P=0.07，I2=62%)，故采用隨機效應模型進行Meta分析。結果顯示，兩種不同腫瘤大小患者間OPN表達比較差異無統計學意義(OR=2.51，95%CI為0.80，7.85；P＞0.05)，如圖9所示。

圖9 OPN表達與食管鱗狀細胞癌不同腫瘤大小關系的Meta分析

2.3.8 OPN在食管鱗狀細胞癌不同浸潤深度中的表達

共納入8篇文獻[8-13，15，16]，其中食管鱗狀細胞癌浸潤深度為T1＋T2的患者239例，T3＋T4的患者299例。各研究間有統計學異質性(P=0.01，I2=61%)，故采用隨機效應模型進行Meta分析。結果顯示，浸潤深度為T3＋T4的患者表達更高，不同浸潤深度兩者間OPN表達比較差異有統計學意義(OR=0.31，95%CI為0.15，0.64；P＜0.05)，如圖10所示。

圖10 OPN表達與食管鱗狀細胞癌不同浸潤深度關系的Meta分析

2.3.9 發表偏倚

對納入的12個報告OPN在食管鱗狀細胞癌組與對照組中表達情況的研究進行了漏斗圖分析，結果顯示，納入的研究不均勻地分布在綜合效應兩側，表明存在較明顯的發表偏倚(如圖11所示)。

圖11 12篇文獻的漏斗圖分析

3 討論

OPN是細胞外基質中重要的功能性蛋白，內含一個精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp)RGD氨基酸序列，與相應配體結合后激活細胞內相應的信號通路，能促進細胞的趨化、黏附和遷移[4，18]。已有研究證實，OPN在乳腺癌、肺癌、前列腺癌、大腸癌的發生、浸潤及轉移中發揮重要作用[19]。腫瘤組織中OPN的表達水平與腫瘤的發展、預后密切相關，OPN被多位專家學者譽為臨床應用上的“領頭羊”[20-21]。

本研究Meta分析提示，食管鱗狀細胞癌組OPN表達是對照組的52.71倍(95%CI為17.95，154.79)，OPN的高表達可能與食管鱗狀細胞癌相關。此外，許多研究涉及OPN表達與一些預后因子如不同性別、不同年齡段、組織病理學分級、臨床分期、有無淋巴結轉移、浸潤深度以及腫瘤大小等的關系，希望通過這些研究探索OPN能否成為有意義的預后因子。本研究發現，OPN在食管鱗狀細胞癌中的表達與患者的性別、不同年齡段、腫瘤的分化程度及腫瘤大小無顯著關聯。在不同臨床分期中，本研究Meta分析結果顯示，OPN表達在不同臨床分期中有明顯差別(OR=0.20，95%CI為0.07，0.60)，表示OPN表達與臨床分期密切相關，Ⅲ～Ⅳ期組陽性率明顯高于Ⅰ～Ⅱ期組，提示OPN表達增加體現于食管鱗狀細胞癌病變全過程，可能在食管鱗狀細胞癌的發生、發展全程中均發揮作用，并對食管鱗狀細胞癌的臨床分期有參考意義。納入的11篇文獻[5，7-16]中Wu等[16]報道，OPN表達情況與食管鱗狀細胞癌有、無淋巴結轉移無相關性，本研究對這11個研究進行Meta分析結果顯示，OPN表達在有、無淋巴結轉移中有明顯差別(OR=6.37，95%CI為3.64，11.15)，即有淋巴結轉移組OPN表達明顯高于無淋巴結轉移組，提示OPN蛋白在食管鱗狀細胞癌淋巴結轉移中具有重要作用。楊德生[10]、徐磊[11]、孫珠蕾[12]和Wu等[16]的研究提示，OPN表達情況與食管鱗狀細胞癌的浸潤深度無明顯相關性，本研究對納入的8篇有關食管癌浸潤深度的文獻[8-13，15-16]進行Meta分析，結果顯示，OPN表達在不同浸潤深度有明顯差別(OR=0.31，95%CI為0.15，0.64)，即T3+T4組OPN表達明顯高于T1+T2組，提示OPN蛋白在食管鱗狀細胞癌浸潤中具有重要作用。

食管鱗狀細胞癌組與對照組中OPN表達存在明顯差異，其表達與性別、年齡段、分化程度及腫瘤大小無明顯關聯，而與不同臨床分期、有無淋巴結轉移及浸潤深度有一定的相關性，表明OPN在食管鱗狀細胞癌的發生、淋巴結轉移和浸潤過程中起重要作用，檢測OPN的表達情況有助于判斷食管鱗狀細胞癌患者的預后。然而本研究尚存在一定的局限性，納入的研究大部分為中文文獻且數量偏少，未進行“灰色”文獻檢索，可能會漏掉陰性結果的研究而產生發表偏倚。因此，需要開展多中心大樣本同質性的隨機對照研究，來進一步證實OPN的表達與食管鱗狀細胞癌臨床病理特征之間的關聯，以為食管鱗狀細胞癌的治療和預后干預提供更強的循證醫學證據。

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The relationships between the expression of osteopontin and esophageal squamous cell carcinoma and its clinicopathologic feature: A Meta-analysis/

DAI Yu-juan, ZHANG Enhuan, CHEN Da-chao//China Medical Equipment,2017,14(6):92-97.

Objective: To systematic review the relationships between the expression of osteopontin (OPN) and esophageal squamous cell carcinoma and its clinicopathologic feature with metaanalyses. Methods: The published studies in the PubMed, the Cochrane Library, EMbase, CBM, CNKI, VIP and WanFang databases were searched, at the time, the documents retrospective method was adopted, and then a series researches about the relationships between the expression of OPN and esophageal squamous cell carcinoma and its clinicopathologic feature were collected. The Jan., 2017 was the deadline of search. The study arranged two researcher to screen documents as the standards of inclusion and exclusion, and extract data and evaluate the quality of methodology for these included documents. The RevMan 5.2 was applied to analyze these data in this Meta analysis. Results: A total of 12 case control studies were included, which included 782 cases of esophageal squamous cell carcinoma in case group and 700 persons in control group. The results of Meta analysis showed the OR of the expression of OPN between cases group and control group was 52.71, and its 95% confidence interval (CI) was 17.95-154.79. Besides, the OR of the expression of OPN between clinical I-II stage group and clinical IIIIV stage group was 0.20, and its 95% (CI) was 0.07-0.60. The OR of the expression of OPN between group with lymph node metastasis and group without lymph node metastasis was 6.37, and its CI was 3.64-11.15. The OR of the expression of OPN between T1+T2 group and T3+T4 group was 0.31, and its 95% (CI) was 0.15-0.64. The differences of the expression of OPN among various group had statistically significant. Conclusion: Current evidence indicates that the expression level of OPN is significantly correlated with esophageal squamous cell carcinoma and its clinicopathologic features. Due to the limited quantity of documents and quality of included studies, above conclusions need to be verified by conducting more high quality studies.

Osteopontin(OPN); Expression; Esophageal squamous cell carcinoma; Systematic review; Metaanalysis; Case-control study

Department of Radiotherapy, The Affiliated Dongnan Hospital of Xiamen University, The 175th Hospital of People's Liberation Army, Zhangzhou 363000, China.

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2017.06.026

1672-8270(2017)06-0092-06

R735.1

A

代玉娟,女,(1985- ),碩士，醫師。廈門大學附屬東南醫院 解放軍第175醫院放療科，研究方向：消化道腫瘤。

2017-01-03

①廈門大學附屬東南醫院 解放軍第175醫院放療科 福建 漳州 363000

*通訊作者：2048128199@qq.com