李 麗,黎 睿,謝 剛,葉 金,王松雪
(國家糧食局科學研究院,北京 100037)
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全自動免疫親和在線凈化/高效液相色譜法快速高通量測定飼料中黃曲霉毒素
李 麗,黎 睿,謝 剛*,葉 金,王松雪
(國家糧食局科學研究院,北京 100037)
建立了全自動免疫親和在線凈化/高效液相色譜快速高通量測定飼料中黃曲霉毒素(Aflatoxins,AFT)的分析方法。飼料樣品經乙腈-水(80∶20,體積比)提取,3 g/L Triton X-100水溶液10倍稀釋后,用自動進樣器注入RIDA?CREST在線固相萃取系統并流經黃曲霉毒素免疫親和小柱,以甲醇-水(45∶55,體積比)為流動相,流速為1.0 mL/min,C18色譜柱(150 mm×3.5 mm,5 μm)分離,光化學衍生,熒光檢測器測定。根據3倍信噪比的峰響應值,確定黃曲霉毒素B1,B2,G1,G2的檢出限分別為0.08,0.05,0.18,0.08 μg/kg,分別在1~100,0.24~24,0.56~56,0.24~24 μg/kg 范圍內呈線性相關,相關系數(r2)分別為0.999 4,0.999 7,0.999 8 和0.999 8;AFT在豬飼料、雞飼料、寵物飼料和飼料原料4類樣品中的加標回收率為72.6%~103%,相對標準偏差為2.5%~4.9%。該方法一次裝柱可檢測60個樣品,液相色譜分析一個樣品總的運行時間為15 min,所以1 d可檢測70~80個樣品,滿足飼料中黃曲霉毒素快速高通量準確定量檢測的需要。
飼料;黃曲霉毒素;在線免疫親和柱凈化;高效液相色譜
黃曲霉毒素(Aflatoxins,AFT)是黃曲霉(Aspergillus flavus)、寄生曲霉(A.parasiticus)和模式曲霉(A.nomius)等在合適的溫度和濕度條件下產生的真菌毒素,對人畜有強烈的致病性、致癌性,是危害最嚴重的真菌毒素之一,在自然界中廣泛存在[1-3]。污染飼料的黃曲霉毒素主要有B1,B2,G1和G2。國內外非常重視黃曲霉毒素的防控,為減少黃曲霉毒素的危害,我國在2001年頒布了《飼料衛生標準》,規定了各類飼料中黃曲霉毒素B1的限量值[4]。……