2013～2015年我院臨床常見病原菌耐藥性分析

區林華+崔慶林+陳蘭

[摘要]目的 了解我院臨床常見病原菌的分布及耐藥情況，為臨床合理使用抗菌藥物提供依據。方法 收集2013年1月～2015年12月我院臨床送檢標本的細菌培養和藥敏試驗資料，對臨床常見病原菌的分布及耐藥性進行回顧性分析。結果 我院臨床革蘭陰性菌檢出率依次為66.7%、73.9%、77.7%，主要為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌；革蘭陽性菌檢出率依次為33.3%、26.1%、22.3%，主要為溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、糞腸球菌。大腸埃希菌對頭孢菌素類、氟喹諾酮類和氨曲南耐藥嚴重；鮑曼不動桿菌對亞胺培南、美羅培南的耐藥率分別為44.2% 和44.0%以上；克林霉素和紅霉素對主要革蘭陽性菌高水平耐藥；青霉素類對糞腸球菌較敏感；2013年和2015年檢測出數株萬古霉素耐藥的葡萄球菌和糞腸球菌。結論 我院臨床常見病原菌以革蘭陰性菌為主，耐藥情況較為嚴重，應加強細菌耐藥性監測，合理使用抗生藥物，加強醫院感染防控，減緩細菌耐藥的產生和發展。

[關鍵詞]病原菌；耐藥性；抗菌藥物；分析

[中圖分類號] R446.5 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2017）05（c）-0082-05

[Abstract]Objective To investigate the distribution and drug resistance of common pathogenic bacteria in our hospital so as to provide reference for clinical rational use of antibiotics and drug resistance.Methods The data of pathogen culture and drug sensitive test in our hospital from January 2013 to December 2015 were collected，and classification statistic was did.The distribution and drug resistance of common pathogenic bacteria was analyzed.Results Among isolated strains，there were Gram-negative bacteria with acorresponding separate rate of 66.7%，73.9%，77.7% in turn from 2013 to 2015.The most commonly encountered Gram-negative bacteria were Escherichia coli，Klebsiella pneumoniae，Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumannii.Gram-positive bacteria had acorresponding separate rate of 33.3%，26.1%，22.3% in turn in the three years.The common Gram-positive bacteria were Staphylococcus haemolyticus，S.epidermidis，Saureus and Enterococcus faecalis.The drug resistance of Escherichia coli to cephalosporins，fluroquinolones and aztreonam was severe.44.2% and more than 44.0% of A. baumannii strains were resistant toimipenem and meropenem， respectively. Clindamycin and erythromycin had higher resistance to the main gram-positive cocci.Penicillins werevery sensitive to Enterococcus faecalis.Several strains of vancomycin resistant Staphylococcus and Enterococcus faecalis were found in 2013 and 2015.Conclusion The clinical common pathogens are Gram negative bacteria in our hospital.The drug resistance is serious， which need to strengthen the monitoring of bacterial resistance and the management of hospital infection， promote the rational use of antibiotics so as to slow down the development of bacterial resistance.

[Key words]Pathogenic bacteria；Drug resistance；Antibiotics；Analysis

細菌耐藥性問題，是當前世界醫療衛生界共同面對和高度關注的問題之一[1]。細菌通過各種復雜的耐藥機制對抗菌藥物產生耐藥，耐藥情況日趨嚴重，臨床上可出現多重耐藥菌、廣泛耐藥菌，醫務人員面臨選藥困難甚至無藥可用的威脅和挑戰。面對嚴峻的細菌耐藥形勢，臨床應重視病原菌的耐藥性監測，在治療過程中合理使用抗菌藥物[2]，防控細菌耐藥的產生和蔓延。本文對我院臨床常見病原菌分布及耐藥情況進行回顧性分析，為促進本院抗菌藥物合理應用，提高治療效果，延緩細菌耐藥提供依據。

1資料與方法

1.1資料來源

收集2013年1月～2015年12月我院檢驗科微生物實驗室臨床各類送檢標本細菌培養、鑒定和藥敏試驗等資料，進行分類統計，對臨床常見病原菌分布及耐藥性進行回顧性分析。

1.2細菌鑒定及藥敏試驗方法

細菌培養分離按《全國臨床檢驗操作規程》[3]進行；2013～2014年采用美國德靈公司MicroScan微生物鑒定/藥敏測定儀及配套的細菌鑒定+藥敏復合板，2015年采用法國生物梅里埃公司VITEK-2 Compact全自動微生物鑒定/藥敏分析系統及配套的細菌鑒定卡和藥敏卡，進行細菌鑒定及藥敏試驗。

1.3質控菌株

金黃色葡萄球菌ATCC29213、糞腸球菌ATCC2 9212、銅綠假單胞菌ATCC27853及大腸埃希菌ATC C25922。

2結果

2.1臨床病原菌分布及其構成比

2013～2015年我院臨床革蘭陰性菌檢出率依次為66.7%、73.9%和77.7%，主要為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌等；革蘭陽性菌檢出率依次為33.3%、26.1%和22.3%，主要為溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、糞腸球菌等。2013～2015年臨床病原菌分布及構成比情況見表1。

2.2主要革蘭陽性菌的耐藥率

紅霉素、克林霉素對臨床主要革蘭陽性菌高度耐藥，耐藥率基本40%以上，與我院近年的使用頻度較高可能相關。青霉素、氨芐西林對葡萄球菌屬高水平耐藥，但對糞腸球菌呈較高敏感性，一般情況下可作首選用藥。2013～2015年臨床主要革蘭陽性菌對常用抗菌藥物的耐藥率見表2。

2.3主要革蘭陰性菌的耐藥率

大腸埃希菌對氟喹諾酮類、氨曲南和頭孢菌素類三、四代的耐藥率大多50%以上，耐藥嚴重。鮑曼不動桿菌對各類抗菌藥物高水平耐藥，對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為44.2% 和44.0%以上。2013～2015年臨床主要革蘭陰性菌對常用抗菌藥物的耐藥率見表3。

2.4特殊耐藥菌的檢出率

2013～2015年我院特殊耐藥菌如產ESBLs大腸埃希菌三年的檢出率依次為51.3%（198/386）、45.3%（183/404）、53.6%（254/474）；產ESBLs肺炎克雷伯菌三年的檢出率依次為26.4%（43/163）、22.1%（45/204）、32.0%（86/269）。2015年耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）的檢出率為37.8%（28/74），耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）的檢出率為75.7%（174/230）。

3討論

2013～2015年我院臨床檢出的病原菌總株數分別為1432株、1506株、1640株，數量穩步緩慢增長。革蘭陰性菌檢出株數逐年增加，革蘭陰性菌檢出率由66.7%、73.9%上升到77.7%；革蘭陽性菌檢出株數逐年減少，革蘭陽性菌檢出率由33.3%、26.1%下降到22.3%，但金黃色葡萄球菌檢出株數2015年逆勢有所增加。總體上，我院臨床檢出的病原菌以革蘭陰性菌為主，占比七成左右，革蘭陽性菌占比三成左右，與胡付品等[4-5]報告的CHINET耐藥監測數據基本相似。

三年間大腸埃希菌每年檢出株數均穩居首位，且每年檢出株數遠超居第二位的肺炎克雷伯菌，為肺炎克雷伯菌檢出株數的兩倍左右。三年間大腸埃希菌檢出株數占年度檢出細菌總株數的比例依次分別為27.0%、26.8%和28.9%，在我院臨床檢出的病原菌結構中占最大比例，是患者感染最多的病原菌種類。

大腸埃希菌對頭孢菌素類（頭孢唑啉、頭孢呋辛、頭孢噻肟、頭孢曲松、頭孢他啶、頭孢吡肟）、氨曲南和氟喹諾酮類（左氧氟沙星、環丙沙星）的耐藥率大多50%以上，耐藥嚴重；對氨芐西林、哌拉西林的耐藥率甚至70%以上。肺炎克雷伯菌除對氨芐西林、哌拉西林的耐藥率超75%外，對頭孢菌素類、氨曲南和氟喹諾酮類的耐藥情況，相比大腸埃希菌輕，相應耐藥率均有一定幅度下降。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌屬腸桿菌科細菌，最重要的耐藥機制是產超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）。ESBLs是由質粒介導的能水解青霉素類、氧亞氨基頭孢菌素（包括第三、四代頭孢菌素）及單環酰胺類氨曲南，且能被β-內酰胺酶抑制劑所抑制的一類β-內酰胺酶[6]。其對碳青霉烯類和頭霉素類水解能力弱[7]。三年間，我院產ESBLs大腸埃希菌的檢出率為45.3%～53.6%，產ESBLs肺炎克雷伯菌的檢出率為22.1%～32.0%。因此，我院大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐藥性，包含有產ESBLs腸桿菌科細菌的特點因素，即對青霉素類、頭孢菌素類、氨曲南高度耐藥；同時對β-內酰胺酶抑制劑復合制劑、碳青霉烯類（亞胺培南、美羅培南）、頭霉素類（頭孢替坦、頭孢西丁）比較敏感，耐藥率基本20%以下，只有氨芐西林/舒巴坦除外。肺炎克雷伯菌對氨曲南、頭孢菌素類等的耐藥率普遍比大腸埃希菌的低，與其產ESBLs率比大腸埃希菌的低可能相關。

大腸埃希菌對氟喹諾酮類高水平耐藥，與氟喹諾酮類在我院多年來一直使用量較大可能相關，藥物選擇壓力導致大腸埃希菌耐藥。其耐藥機制主要有[8]：編碼DNA解旋酶和拓撲異構酶Ⅳ靶酶的基因發生突變，降低與氟喹諾酮類的親和力；通過外排泵使抗菌藥物外排增加，降低藥物在菌體蓄積；細胞膜通透性改變，降低水溶性抗菌藥透過等。肺炎克雷伯菌對氟喹諾酮類耐藥情況則相對較好，耐藥率基本在30%以下。

非發酵革蘭陰性菌銅綠假單胞菌在我院三年的耐藥率監測中，除對氨芐西林、氨芐西林/舒巴坦、呋喃妥因、復方新諾明和部分頭孢菌素類不敏感外，其他可選擇的藥物較多，包括抗銅綠假單胞菌青霉素類、抗銅綠假單胞菌頭孢菌素類、氨曲南、氟喹諾酮類、氨基苷類和碳青霉烯類等，而且它們的耐藥率基本在22%以下，情況相對樂觀。但是，銅綠假單胞菌的檢出率高，耐藥性強，耐藥機制復雜，即使是初次分離敏感的菌株在使用各種抗菌藥物治療的3～4 d后均可能發生耐藥[9]。因此，對銅綠假單胞菌仍然要加強耐藥監測，指導臨床參照最新的藥敏試驗結果選用并及時調整抗菌藥物。

非發酵革蘭陰性菌鮑曼不動桿菌的耐藥情況則不容樂觀，各類抗菌藥物包括碳青霉烯類對鮑曼不動桿菌的耐藥率大多40%以上，鮑曼不動桿菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為44.2%和44.0%以上，多重耐藥現象較嚴重，藥敏試驗中最敏感的哌拉西林/他唑巴坦耐藥率也達31.2%。針對鮑曼不動桿菌的嚴重耐藥情況，臨床應參照藥敏試驗合理應用抗菌藥物。對于多重耐藥菌株，可根據藥敏結果給予含舒巴坦的復合制劑，或碳青霉烯類治療；對于廣泛耐藥、全耐藥菌株，多采用聯合用藥，如頭孢哌酮/舒巴坦聯合米諾環素、多黏菌素聯合頭孢哌酮/舒巴坦、替加環素聯合頭孢哌酮/舒巴坦等，必要時甚至可三聯用藥[10]。

溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌屬凝固酶陰性葡萄球菌，是條件致病菌，它們寄居在人體皮膚和黏膜，一般很少引起感染，只有在人體免疫功能下降或進入非正常部位時成為致病菌。但近年來，凝固酶陰性葡萄球菌如表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌被認為是新的重要的醫院內感染病原體[11]，不僅導致侵襲性感染，而且已經成為耐苯唑西林和多重耐藥的病原體。由表3可見，我院三年的細菌耐藥監測中，溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌對各種常用抗菌藥物的耐藥率大體呈現三個層次的情況，即溶血葡萄球菌對各種常用抗菌藥物的耐藥率普遍比表皮葡萄球的高，而表皮葡萄球菌對各種常用抗菌藥物的耐藥率又普遍比金黃色葡萄球菌的高，只有少數抗菌藥物例外。2015年我院耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）檢出率為37.8%，甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）檢出率為75.7%。MRSA與MRCNS的顯著特征之一就是高耐藥性和多藥耐藥性[12]。我院檢出的金黃色葡萄球菌對各種常用抗菌藥物的耐藥率普遍比溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌的耐藥率低，與金黃色葡萄球菌中MRSA的比率遠低于凝固酶陰性葡萄球菌中MRCNS的比率可能相關。

紅霉素、克林霉素對主要革蘭陽性菌高水平耐藥，耐藥率基本在40%以上，與我院近年使用頻度較高可能相關。青霉素、氨芐西林對葡萄球菌屬高水平耐藥，但對糞腸球菌較敏感，耐藥率不超過20%，可作一般情況下糞腸球菌治療的首選用藥。對葡萄球菌屬較敏感的藥物有復方新諾明、利福平、左氧氟沙星和萬古霉素等。萬古霉素通常被視為防治革蘭陽性菌的最后一道防線，三年間萬古霉素對主要革蘭陽性菌高度敏感，耐藥率在0%～3.6%。監測顯示，2013、2015這兩年我院出現了數株萬古霉素耐藥葡萄球菌（VRS）和萬古霉素耐藥腸球菌（VRE），應引起警惕和高度重視。一旦出現萬古霉素耐藥的金黃色葡萄球菌或腸球菌等廣泛傳播，其導致的感染將非常棘手，甚至可能無法治療[13]。

遏制細菌耐藥性不斷增長的趨勢，已成為一個現實的課題。相關研究表明，細菌耐藥率高低與抗菌藥物的用量有密切關系，抗菌藥物用量越多、時間越長、或多種藥物不合理聯合，均會導致細菌耐藥率的增加[14]?？咕幬锊缓侠響谩⒛退幘暝诓煌貐^間播散及有效醫院感染控制措施缺乏，均易導致耐藥菌株的播散[15]。

因此，面對嚴竣的細菌耐藥形勢，醫療機構應加強抗菌藥物管理，加強抗菌藥物臨床應用和細菌耐藥監測，建立完善抗菌藥物應用和細菌耐藥預警機制，指導臨床合理應用抗菌藥物；同時，加強醫院感染管理，嚴格無菌技術規范和消毒隔離措施，防范院內交叉感染，防控多重耐藥菌株傳播。醫務人員應及時掌握本單位、本區域病原菌分布及其耐藥性動態變遷，嚴格抗菌藥使用指征，用藥前將臨床標本送病原學培養和藥敏試驗，依據藥敏結果科學合理應用抗菌藥物，提高抗感染治療效果，減緩細菌耐藥的產生和發展。

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（收稿日期：2017-04-05 本文編輯：崔建中）