廣州地區下呼吸道感染老年患者非典型病原體與病毒檢測及臨床特征分析

秦笙++練立婷++王維亮++陳富+李際強++吳澤+陳茶

[摘要] 目的 探討廣州地區下呼吸道感染老年患者的非典型病原體與病毒分布及臨床特征。 方法 收集2014年9月～2015年7月廣東省中醫院住院患者290份60歲以上診斷為下呼吸道感染的老年患者血清標本，進行九項病原體IgM抗體檢測，并對患者臨床特征進行分析。 結果 病原學分布：290例患者中共檢測病原體陽性71份，總陽性率為24.5%。檢出以肺炎支原體為主，共34例（11.7%），其余分別為嗜肺軍團菌血清1型10例（3.4%）；乙型流感病毒8例（2.7%）；Q熱立克次體、呼吸道合胞病毒各6例（2.0%）；肺炎衣原體3例（1.0%）；未發現腺病毒和副流感病毒1～3型病毒感染。混合感染17例（5.8%），其中雙重感染13例，以肺炎支原體合并甲型流感病毒為多見；三重感染4例。臨床特征：廣州地區老年人下呼吸道感染患者男女比例1.45∶1，平均年齡為（77.0±6.8）歲，以發熱、咳嗽、咳痰、氣促為主要臨床癥狀，肺部實變體征的比例為75.8%（220/290）。 結論 引起廣州地區老年人下呼吸道感染的非典型病原體以肺炎支原體為主，其他病原體散發。不同非典型病原體和病毒感染的老年患者多見發熱，伴有明顯的全身和呼吸道癥狀，肺部感染多見。

[關鍵詞] 老年人；下呼吸道感染；非典型病原體與病毒；臨床特征

[中圖分類號] R563.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2017）05（a）-0120-04

Detection and clinical features analysis of atypical pathogens， respiratory virus in elderly patients with lower respiratory tract infection in Guangzhou

QIN Sheng1 LIAN Liting2 WANG Weiliang3 CHEN Fu1 LI Jiqiang4 WU Ze2 CHEN Cha1

1.Department of Laboratory Medicine， Guangdong Province Traditional Chinese Medical Hospital， Guangdong Province， Guangzhou 510006， China； 2.Guangzhou Jiayuan Medical Reagents Co.，Ltd， Guangdong Province， Guangzhou 510515， China； 3.Department of Respiration， Guangdong Province Traditional Chinese Medical Hospital， Guangdong Province， Guangzhou 510006， China； 4.Third Department of Integrative， Guangdong Province Traditional Chinese Medical Hospital， Guangdong Province， Guangzhou 510006， China

[Abstract] Objective To discuss distribution of atypical pathogens， respiratory virus and in clinical features of elderly patients with lower respiratory tract infection in Guangzhou. Methods 290 lower respiratory infection of elderly patients over 60 years old with serum were collected from September 2014 to July 2015. The Pneumoslide IgM test was used to detected the atypical pathogens and respiratory virus and the clinical features were analyzed. Results Detection of pathogens： the total positive rate was 24.5%. Among the examined pathogens， MP was the highest， 34 cases （11.7%）， next was LP1 （3.4%） and others were INFB （2.7%）， COX （2.0%）， RSV （2.0%）， CP （1.0%）， no ADV and parainfluenza type 1-3 virus infection were found. The results showed 17 cases （5.8%） were multiple infection， including 13 cases were double infection and 4 cases were triple infection. Clinical features： male vs femaile of the elderly patients with lower respiratory tract in Guangzhou was 1.45∶1， the average age was （77.0±6.8） years. The fever， cough， expectoration， anhelation were as the main clinical symptoms， the rate of signs of consolidation of the lung was 75.8% （220/290）. Conclusion For elderly people in Guangzhou， atypical pathogens of lower respiratory infection are mycoplasma pneumoniae and other pathogens. The symptoms of different atypical pathogens and virus infection of elderly patients are mainly fever accompanied with obvious systemic and respiratory symptoms， lung infection.

[Key words] Elderly people； Lower respiratory infection； Atypical pathogens and virus； Clinical features

呼吸系統疾病是我國城市及農村居民第4位致死病因，其中下呼吸道感染更是80歲以上高齡老人的首位死因[1]。目前我國關于下呼吸道感染病原學的研究多針對細菌學[2-3]，這是不夠全面的，隨著對非典型病原體和病毒認識的深入[4-5]，它們在下呼吸道感染中的作用逐漸被學界所重視，并由此修訂了成人下呼吸道感染診治指南[6]。本文應用呼吸道病原體九聯檢試劑，探討廣州地區60歲以上下呼吸道感染的老年患者非典型病原體與病毒分布情況及分析相關臨床特征。

1 材料與方法

1.1 標本

收集2014年9月～2015年7月廣東省中醫院住院患者290份符合下呼吸道感染診斷[4]的60歲以上老年人患者血清標本送檢，同時記錄患者一般信息及臨床癥狀。

1.2 試劑

呼吸道病原體九聯檢試劑盒（PNEUMOSLIDE IgM）購自西班牙VIRCELL公司。試劑盒包括4種非典型病原體：嗜肺軍團菌血清1型（LP1）、Q熱立克次體（COX）、肺炎支原體（MP）、肺炎衣原體（CP）；5種常見呼吸道感染病毒：甲型流感病毒（INFA）、乙型流感病毒（INFB）、腺病毒（ADV）、副流感病毒（PIVs）和呼吸道合胞病毒（RSV）。

1.3 檢測方法

25 μL血清加入25 μL PBS。取30 μL稀釋后的血清加入150 μL吸附劑中混勻，離心13 000 r/min，10 min，取上清備用。在玻片上每孔加15 μL處理過的上清并37℃溫育90 min。PBS緩沖液沖洗玻片2次，待干。每孔加入15 μL FITC標記第二抗體試劑，并于37℃溫育30 min。重復上述洗滌步驟。封片后加蓋玻片，在暗室內用熒光顯微鏡400倍放大率下觀察結果。檢測時同時設立陰陽性對照。

1.4 結果判斷

陽性：病毒類型陽性熒光出現于細胞核、胞漿和/或胞膜，每個高倍鏡視野約3個陽性細胞，陽性細胞外形完整，熒光清晰可見，即可報陽性。其余非典型病原體熒光模式：嗜肺軍團菌血清1型、Q熱立克次體、肺炎衣原體陽性菌形態典型、大小均一、均勻布滿視野，熒光清晰明亮，即可報陽性。肺炎支原體陽性細胞數達10%以上，報陽性。

陰性：病毒或支原體的細胞或菌體呈紅色；嗜肺軍團菌、肺炎衣原體和Q熱立克次體視野中無熒光。

2 結果

2.1 非典型病原體與病毒檢測結果

290例患者中共檢測病原體71份，總陽性率為24.5%。陽性感染最高的是肺炎支原體，共34例（11.7%），其次為嗜肺軍團菌血清1型10例（3.4%）和乙型流感病毒8例（2.7%）。各病原體陽性例數、陽性率詳見表1。陽性病例中共有17份多重感染陽性，混合感染率為5.8%。其中雙重感染病例有13例，三重感染4例。見表2。71份陽性病例被診斷為社區獲得性肺炎56例，其中肺炎支原體檢出最高，檢出率為50%；診斷為慢性阻塞性肺疾病急性加重10例，嗜肺軍團菌血清1型檢出率最高，檢出率為40%；診斷為支氣管擴張急性加重5例，肺炎支原體檢出率最高，檢出率為60%。

2.2 患者一般情況

收集下呼吸道感染病例共290例，其中社區獲得性肺炎（CAP）224例，慢性阻塞性肺疾病急性加重（ACCOPD）61例，支氣管擴張急性加重5例。患者居住地區遍布廣州市各區，其中以越秀區患者最多，其次為海珠區，第三為荔灣區。見表4。290位下呼吸道感染老年患者平均年齡為77歲，男女比例1.45：1；基礎疾病以高血壓的病例最多，為34例。患者經過治療，病情痊愈或好轉184例，6例病情加重要求出院，8例死亡。每人平均住院時長9 d，西醫平均醫藥費用高于中醫藥費用。細菌培養鑒定共有22人次獲得陽性結果，其中痰培養陽性18人次，革蘭陽性菌、革蘭陰性均以及真菌的檢出比為1：4：5；血培養陽性4人次。

2.3 臨床特征

分析290位下呼吸道感染老年患者臨床特征，發現發熱患者有共182例，主要集中于0～3 d，最高體溫≥38℃有107例。下呼吸道感染老年患者以咳嗽、咳痰為常見呼吸道癥狀，氣促、乏力、口干、胸悶多見，肺部實變體征的比例為75.8%（220/290）。

3 討論

目前國內對成人呼吸道感染患者呼吸道病毒及非典型病原體的分析已經有較多的研究[7-8]，由于60歲以上老年患者對于呼吸道病毒及非典型病原體不論在病原流行情況、臨床特征還是流行病學均與其它年齡段的成年患者的表現不同，而且隨著年齡的增加，肺炎發生率明顯增高[9]，所以十分有必要單獨挑選60歲以上老年人作為研究對象。

本研究所檢測290份老年病例中，總陽性率是24.5%，低于我國同類研究[10-12]，主要原因考慮是由于老年患者病毒檢出率不高所致整體陽性率較低。老年患者的病毒檢出率不高的原因可能是機體具有良好的記憶T細胞種群，可以應答曾遇到過的病原體有關。在非典型病原體結果中，肺炎支原體、嗜肺軍團菌和肺炎衣原體的陽性率與國外針對世界范圍的非典型病原體檢測結果相符[13-14]。

在對下呼吸道感染疾病分類分析的過程中，本研究發現慢性阻塞性肺疾病和支氣管擴張的急性加重并不是我們所研究的非典型病原體和病毒所引起的，其主要病原體仍需擴大收集標本，進一步深入研究。本次研究中多重感染率為5.8%，以雙重感染為主，其中以肺炎支原體合并其他非典型病原體或病毒為多見，同時發現患有高血壓基礎疾病的患者其多重感染率升高，以肺炎支原體合并甲型流感病毒模式為主。

本研究陽性結果對象主要來自廣州市越秀區、海珠區和荔灣區三個老城區，結合本研究的臨床特征數據，如果基層臨床醫生發現60歲以上老年患者出現以下癥狀，應高度警惕患者是否有下呼吸道感染的可能：發病3 d內最高發熱體溫38℃以上，有口干，咳嗽，咳痰，胸悶，氣促，納差等癥狀，多結合肺部實變體征改變。

呼吸道病原體九聯檢試劑盒是基于間接免疫熒光，其敏感性和特異性已有多個報道[15-17]，可為臨床提供下呼吸道感染患者合理的病原體證據。本研究發現，廣州地區老年人下呼吸道感染的非典型病原體以肺炎支原體為主，其臨床特征以咳嗽、咳痰為常見呼吸道癥狀，氣促、乏力、口干、胸悶多見，多結合肺部實變體征改變。

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（收稿日期：2017-01-19 本文編輯：蘇 暢）