異型淋巴細(xì)胞報(bào)警信息在CellaVision DM96中的驗(yàn)證

張彥平，賀軍濤，魏 偉，袁曉紅

西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院(西安 710004)

·臨床檢驗(yàn)·

異型淋巴細(xì)胞報(bào)警信息在CellaVision DM96中的驗(yàn)證

張彥平，賀軍濤△，魏 偉，袁曉紅

西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院(西安 710004)

目的：比較Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀異型淋巴細(xì)胞報(bào)警信息與CellaVision DM96檢測(cè)結(jié)果的一致性。方法：隨機(jī)選取門(mén)診病人EDTA抗凝全血標(biāo)本322份，用XE-2100血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測(cè)并統(tǒng)計(jì)報(bào)警信息，同時(shí)用CellaVision DM96檢測(cè)，兩組結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果：對(duì)Sysmex XE-2100 血細(xì)胞分析儀檢測(cè)結(jié)果與CellaVision DM96檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較，以CellaVision DM96的結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，得出靈敏度75.6%，特異度99.3%，陰性預(yù)測(cè)值96.5%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值93.9%。結(jié)論：Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀能夠?qū)ν庵苎械漠愋土馨图?xì)胞及時(shí)報(bào)警，具有一定的可靠性，但是假陰性率較高，仍需要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行復(fù)檢，確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。

異型淋巴細(xì)胞是外周血中出現(xiàn)的一種形態(tài)變異，甚至發(fā)生母細(xì)胞化或正在返幼的T淋巴細(xì)胞，細(xì)胞特點(diǎn)是細(xì)胞體較大， 細(xì)胞質(zhì)有很強(qiáng)的嗜堿性，細(xì)胞核大，染色質(zhì)疏松，甚至?xí)霈F(xiàn)模糊的核仁或核分裂象[1]。健康人外周偶見(jiàn)異型淋巴細(xì)胞。臨床上異型淋巴細(xì)胞增多主要見(jiàn)于傳染性單核細(xì)胞增多癥、病毒性肝炎、流行性出血熱、濕疹等病毒性疾病和過(guò)敏性疾病[2]。

材料與方法

1 材料來(lái)源 隨機(jī)選取西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院2015年11～12月門(mén)診EDTA抗凝全血標(biāo)本共322例，年齡0～78歲，男性159例，女性163例。

2 儀器與試劑 XE-2100血細(xì)胞分析儀(日本Sysmex公司)；SP-1000i自動(dòng)推片染色儀(日本Sysmex公司)；DM96自動(dòng)化數(shù)字圖像分析系統(tǒng)(瑞典CellaVision AB公司)；試劑均為其原裝配套試劑；室內(nèi)質(zhì)控良好。

3 研究方法 將收集的322份標(biāo)本用XE-2100血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測(cè)，記錄異型淋巴細(xì)胞報(bào)警信息，同時(shí)用Sysmex SP-1000i儀器對(duì)標(biāo)本進(jìn)行推片染色，將染好的血涂片放入DM96進(jìn)行細(xì)胞預(yù)分類，然后人工審核，記錄結(jié)果。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 利用統(tǒng)SPSS18.0計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，所有指標(biāo)均進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料數(shù)據(jù)以%表示，組間比較采用卡方檢驗(yàn)，以P<0.05為結(jié)果差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

結(jié) 果

1 Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀檢測(cè)與DM96檢測(cè)結(jié)果的比較 以DM96的檢測(cè)結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)數(shù)200個(gè)白細(xì)胞，可見(jiàn)2個(gè)以上異型淋巴細(xì)胞即百分比大于1%判定為陽(yáng)性，以XE-2100散點(diǎn)圖出現(xiàn)Atypical Ly報(bào)警信息為陽(yáng)性。經(jīng)過(guò)計(jì)算，XE-2100血細(xì)胞分析儀對(duì)異型淋巴細(xì)胞報(bào)警提示的敏感度為75.6%，特異度為99.3%，陰性預(yù)測(cè)值為96.5%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為93.9%，假陰性率為24.4%，假陽(yáng)性率為0.7%。通過(guò)SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件計(jì)算，P<0.01，因此可以得出異型淋巴細(xì)胞Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀檢測(cè)結(jié)果與DM96檢測(cè)結(jié)果差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀檢測(cè)與DM96檢測(cè)結(jié)果的比較,見(jiàn)表1。

表1 XE-2100檢測(cè)結(jié)果與DM96檢測(cè)結(jié)果比較(例)

2 XE-2100血細(xì)胞分析儀出現(xiàn)異型淋巴細(xì)胞報(bào)警信息散點(diǎn)圖及異型淋巴細(xì)胞形態(tài)圖 Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀異型淋巴細(xì)胞報(bào)警信息，Q-flags為220時(shí)異型淋巴細(xì)胞Q-flags報(bào)警見(jiàn)圖1。

當(dāng)Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀出現(xiàn)異型淋巴細(xì)胞報(bào)警時(shí)，可見(jiàn)散點(diǎn)圖淋巴細(xì)胞區(qū)域增大，出現(xiàn)Atypical Ly等報(bào)警提示，見(jiàn)圖2。

CellaVision DM96分類出的異型淋巴細(xì)胞形態(tài),可見(jiàn)細(xì)胞胞體較大，外形不規(guī)則，胞質(zhì)豐富，染色質(zhì)較粗糙，見(jiàn)圖3。

Sysmex XE-2100全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的白細(xì)胞分類檢測(cè)原理為:采用半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞技術(shù),結(jié)合核酸熒光染色技術(shù)進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類。半導(dǎo)體激光照射在通過(guò)鞘流技術(shù)處理的細(xì)胞上,根據(jù)每個(gè)細(xì)胞所產(chǎn)生的三種信號(hào)來(lái)鑒別細(xì)胞類別[3]。DIFF 通道根據(jù)不同類型及不同成熟度的白細(xì)胞對(duì)熒光染料著色能力的差異，檢測(cè)散射光信號(hào)以區(qū)分淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞。橫坐標(biāo)是側(cè)向散射光，反映細(xì)胞內(nèi)容物，如核和顆粒等;縱坐標(biāo)是側(cè)向熒光強(qiáng)度，反映細(xì)胞內(nèi) DNA 和 RNA 的含量[4]。當(dāng)儀器懷疑有異型淋巴細(xì)胞時(shí)，會(huì)出現(xiàn)Atypical Ly等報(bào)警提示[5]。CellaVision DM96自動(dòng)化數(shù)字圖像分析系統(tǒng)采用與血細(xì)胞分析儀的流式細(xì)胞術(shù)完全不同的技術(shù)，是一種結(jié)合傳統(tǒng)顯微鏡檢查和現(xiàn)代神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)技術(shù)的新型細(xì)胞分析技術(shù)，用于血細(xì)胞形態(tài)分析[6]。異型淋巴細(xì)胞也稱不典型淋巴細(xì)胞，指淋巴細(xì)胞經(jīng)抗原(多數(shù)為EBV)或絲裂原刺激后，DNA大量復(fù)制，并相繼合成大量RNA向幼稚細(xì)胞或漿細(xì)胞方向轉(zhuǎn)化，這種處于轉(zhuǎn)化過(guò)程中，具有一些新的形態(tài)特點(diǎn)的細(xì)胞[7]。臨床上根據(jù)形態(tài)不同將異型淋巴細(xì)胞分為3型：1型為空泡型，Ⅱ型為幼稚型，Ⅲ型為不規(guī)則形。

本研究表明，XE-2100血細(xì)胞分析儀對(duì)異型淋巴細(xì)胞的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為93.9%，敏感度75.6%，說(shuō)明XE-2100血細(xì)胞分析儀對(duì)異型淋巴細(xì)胞有一定的篩查功能；結(jié)果得出假陰性率24.4%，這是因?yàn)閄E-2100規(guī)定: 標(biāo)本中異型淋巴細(xì)胞的Q-flags>100時(shí)，XE-2100血細(xì)胞分析儀即做出異常報(bào)警；我們將異型淋巴細(xì)胞作為疾病診斷的一個(gè)很重要的信息，因此，對(duì)于DM96來(lái)說(shuō)，只要異型淋巴細(xì)胞數(shù)量大于%1即可報(bào)警，因此才出現(xiàn)了這么高的假陰性率，要消除這種假陰性，我們可將Q-flags的值降低在100以下；出現(xiàn)假陽(yáng)性的原因則是XE-2100血細(xì)胞分析儀不能明確的把異型淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞、幼稚細(xì)胞區(qū)別開(kāi)。因此，要為臨床醫(yī)生提供一份準(zhǔn)確可靠的信息還需要進(jìn)行復(fù)檢，以防漏診。本院對(duì)于異型淋巴細(xì)胞的復(fù)檢規(guī)則為：淋巴細(xì)胞數(shù)量>70%且出現(xiàn)異型淋巴細(xì)胞，則推片。

綜上所述，Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀對(duì)異型淋巴細(xì)胞報(bào)警具有一定的可靠性，可以作為初篩工具，但同時(shí)具有一定的假陰性率，我們需要儀器與人工鏡檢相結(jié)合，確保結(jié)果的準(zhǔn)確性，但是由于人工鏡檢的主觀性和困難性，耗費(fèi)了檢驗(yàn)人員的時(shí)間，因此我們可以利用DM96來(lái)預(yù)分類細(xì)胞，然后人工審核，在DM96進(jìn)行預(yù)分類的同時(shí)可以做一些其他工作，這樣不僅節(jié)省了時(shí)間，也提高了工作效率。同時(shí)，因?yàn)镈M96的圖像保存系統(tǒng)，我們還可以用于教學(xué)，也便于病人結(jié)果的復(fù)查。我們這次只研究了異型淋巴細(xì)胞報(bào)警信息結(jié)果的可靠性，在接下來(lái)的時(shí)間里，我們還會(huì)繼續(xù)研究白細(xì)胞中其他細(xì)胞報(bào)警信息結(jié)果的可靠性。

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(收稿：2016-11-01)

@血細(xì)胞分析儀 @報(bào)警信息 @DM96 淋巴細(xì)胞

R446

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2017.07.056

△通訊作者