人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)腦梗死兔神經(jīng)功能障礙和頭部核磁共振波譜的影響

黃海麗， 管葉明， 劉學(xué)春， 劉紅娟， 汪青松

人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)腦梗死兔神經(jīng)功能障礙和頭部核磁共振波譜的影響

黃海麗， 管葉明， 劉學(xué)春， 劉紅娟， 汪青松

目的 觀察人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)缺血再灌注兔神經(jīng)功能障礙和頭部核磁共振波譜參數(shù)的影響。方法 采集足月新生兒臍帶血60～80 ml，分離hUCB-MSCs，并體外培養(yǎng)。將造模成功的大腦中動(dòng)脈栓塞模型30只兔隨機(jī)分為腦梗死組、干細(xì)胞組、生理鹽水組，每組10只，后兩組移植人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞和生理鹽水。移植48 h、2 w時(shí)，采用Purdy評(píng)分進(jìn)行神經(jīng)損害嚴(yán)重程度評(píng)估，行核磁共振及氫質(zhì)子核磁共振波譜檢查，進(jìn)行梗死體積、及梗死中心區(qū)N-乙酰天門冬氨酸、 膽堿和肌酸等代謝物含量的測(cè)定。結(jié)果 與腦梗死組及生理鹽水組相比，干細(xì)胞組NSS評(píng)分較低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；生理鹽水組與腦梗死組NSS評(píng)分無(wú)明顯差異(P>0.05)。與腦梗死組和生理鹽水組相比，干細(xì)胞組梗死體積明顯減小(P<0.05)。與假手術(shù)組相比，干細(xì)胞組、腦梗死組與生理鹽水組NAA/Cr、Cho/Cr比值均明顯下降，Lac/Cr比值均顯著上升(P<0.01)；但干細(xì)胞組NAA/Cr、Cho/Cr比值顯著高于腦梗死組及生理鹽水組(P<0.05)，Lac/Cr比值顯著低于后兩組(P<0.05)；而生理鹽水組NAA/Cr、Cho/Cr、Lac/Cr比值與腦梗死組之間無(wú)明顯差異(P>0.05)。結(jié)論 臍血間充質(zhì)干細(xì)胞移植能提高腦梗死兔腦NAA/Cr、Cho/Cr比值，降低Lac/Cr比值，縮小梗死范圍，明顯改善兔神經(jīng)功能。

人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞； 腦梗死； 神經(jīng)功能； 磁共振波譜

腦卒中以其高發(fā)病率、高病死率和高致殘率嚴(yán)重影響著人們的生存及生活質(zhì)量，缺血性腦卒中是最常見的類型。通過(guò)溶栓和介入治療，能部分恢復(fù)血管再通，但由于時(shí)間及適應(yīng)證的局限性，僅少數(shù)患者從中受益。干細(xì)胞工程的興起給缺血性腦卒中患者的治療帶來(lái)了新希望。而臍血作為MSCs的重要來(lái)源之一，具有自我更新、免疫調(diào)控、向不同組織分化潛能、促進(jìn)微血管形成等特點(diǎn)，與其他類似干細(xì)胞相比，具有易于采集、來(lái)源廣泛、免疫排斥性弱、無(wú)倫理學(xué)爭(zhēng)議及被病原體污染可能性小等優(yōu)點(diǎn)[1]。

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)線栓法建立兔大腦中動(dòng)脈栓塞再灌注模型，觀察hUCB-MSCs移植對(duì)缺血再灌注兔腦核磁共振波譜成像、血清hs-CRP水平和梗死體積的影響，探索hUCB-MSCs移植改善缺血性腦卒中的可能機(jī)制，為hUCB-MSCs治療缺血性腦卒中提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選用健康雄性新西蘭大白兔40只，體重2.5～3.0 kg，購(gòu)自安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。均通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)管理辦法，通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理論證。

1.2 試劑和器材 細(xì)胞培養(yǎng)箱購(gòu)自美國(guó)Thermo Scientific公司。水浴箱購(gòu)自上海精密實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司。-80 ℃低溫冰箱購(gòu)自美國(guó)NBS公司。超凈工作臺(tái)購(gòu)自上海榮翔實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司。流式細(xì)胞儀購(gòu)自美國(guó)Beckman Coulter公司。DMEM (500 ml)培養(yǎng)基購(gòu)自美國(guó)Invitr公司。CD34-PE、CD44-FITC單抗及CD45-PE、CD29-FITC單抗購(gòu)自美國(guó)Beckman Coulter。線栓購(gòu)自北京沙東生物有限公司。Siemens Novus 1.5T MR掃描儀及Siemens Novus 1.5T MR 圖像處理軟件購(gòu)自Siemens公司。

1.3 hUCB-MSCs的分離、培養(yǎng)及鑒定 無(wú)菌條件下采取本院產(chǎn)科健康分娩新生兒的臍血60 ml～80 ml，用一次性采血袋收集，搖勻后冰盒保存，2 h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室分離。臍血與PBS液按1∶1混勻，疊加于人淋巴細(xì)胞分離液上(1∶1∶1)，2500 rpm離心20 min，收集白膜層，加入等量紅細(xì)胞裂解液混勻，放置4 ℃冰箱10 min后離心棄上清。以1×106/ml接種于DMEM培養(yǎng)基中，37 ℃，5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。分離后72 h后首次換液(半量)，除去未貼壁細(xì)胞。以后根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)情況，以后每3 d～4 d換液一次，更換培養(yǎng)基，倒置相差顯微鏡逐日觀察細(xì)胞形態(tài)、貼壁情況及生長(zhǎng)情況。10 d～14 d待細(xì)胞80%融合時(shí)，0.25%胰蛋白酶消化，1∶2的比例傳代接種于培養(yǎng)皿中，置于37 ℃，5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。直至貼壁細(xì)胞彼此融合鋪滿皿底時(shí)，重復(fù)上述操作，反復(fù)傳代擴(kuò)增，并標(biāo)記為P1(Passage1，P1)至P4等。通過(guò)貼壁培養(yǎng)法，每次換液棄除懸浮細(xì)胞。貼壁細(xì)胞主要是hUCB-MSCs，但可能混有淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞，每次傳代用0.25%胰蛋白酶，0.02%EDTA(0.1 ml/cm3)消化1 min。輕度吹打，嚴(yán)格控制消化液的量和消化時(shí)間，利用hUCB-MSCs較易脫落的特點(diǎn)，保證hUCB-MSCs在短暫的作用時(shí)間內(nèi)與培養(yǎng)瓶底分開，淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞則因貼壁性強(qiáng)仍貼附于培養(yǎng)皿底，從而使hUCB-MSCs得到純化。取傳3代后的細(xì)胞，去掉培養(yǎng)液，PBS洗兩遍，用1∶1的0.25%胰蛋白酶和0.02%EDTA混合液消化，以1000 rpm離心5 min，用PBS洗滌一次，調(diào)整細(xì)胞濃度，制成濃度為1×109/L的單細(xì)胞懸液。每個(gè)EP管加1 ml細(xì)胞懸液，PBS或0.9%生理鹽水離心洗滌后，分別加入各種抗體。其中1管為陰性對(duì)照，其余2管分別加入CD29-FITC、CD45-PE和CD44-FITC、CD34-PE單抗，室溫避光孵育20 min，流式細(xì)胞儀檢測(cè)鑒定細(xì)胞表型。

1.4 動(dòng)物模型 參考Longa等[2]的線栓法，制成兔右側(cè)大腦中動(dòng)脈栓塞再灌注模型。術(shù)前動(dòng)物禁食24 h，耳緣靜脈緩慢注射2%戊巴比妥鈉(劑量為20 mg/kg)，麻醉成功后，頸部備皮，利多卡因局部麻醉，取頸部正中切口，長(zhǎng)3 cm～3.5 cm，暴露右側(cè)頸總動(dòng)脈和頸外動(dòng)脈，4號(hào)線結(jié)扎頸外動(dòng)脈，分離與頸總動(dòng)脈伴行的迷走神經(jīng)，在距頸總動(dòng)脈分叉處近心端1.5 cm處結(jié)扎頸總動(dòng)脈，在結(jié)扎線的遠(yuǎn)端，置線備用。用微小動(dòng)脈夾夾閉備用線遠(yuǎn)心端的頸總動(dòng)脈，在備用線的近端用眼科剪剪一小切口，將標(biāo)記線栓(頭端直徑0.53 mm)送入切口，將備用線扎緊，逐漸松開動(dòng)脈夾，將線栓沿頸總動(dòng)脈、頸內(nèi)動(dòng)脈順行向上插入至大腦中動(dòng)脈(middle cerebral artery,MCA)起始部，遇阻力時(shí)停止，從頸總動(dòng)脈分叉處計(jì)算插入深度5.0 cm～6.0 cm，造成大腦中動(dòng)脈栓塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)。逐層縫合皮膚，將線栓末端留于皮外，缺血2 h后，無(wú)需再次麻醉，輕輕抓握動(dòng)物將線栓緩慢拔出，頸總動(dòng)脈切口處按壓數(shù)分鐘，防止少量出血。造模時(shí)室溫保持在25 ℃左右。術(shù)后將動(dòng)物置于放有清潔墊料的飼養(yǎng)箱。另外部分兔子只需分離頸總動(dòng)脈、頸內(nèi)動(dòng)脈，無(wú)需插入線栓。

1.5 動(dòng)物分組與干細(xì)胞的移植 兔清醒后出現(xiàn)左側(cè)肢體偏癱造模成功方可納入實(shí)驗(yàn)組。除去死亡或造模失敗的兔子(13只)。將造模成功的兔子隨機(jī)分腦梗死組(n=10)、干細(xì)胞組(n=10)和生理鹽水組(n=10)。只行分離頸總動(dòng)脈、頸內(nèi)動(dòng)脈，無(wú)需插入線栓的10只兔子作為假手術(shù)組。干細(xì)胞組與生理鹽水組分別于建模后1 d經(jīng)股靜脈注射已制備好的hUCB-MSCs懸液及等體積0.9%的生理鹽水。

1.6 神經(jīng)功能缺損評(píng)分 采用Purdy評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，于移植后2 d、7 d、14 d對(duì)腦缺血再灌注模型家兔的意識(shí)、行為、轉(zhuǎn)頭、轉(zhuǎn)圈及偏盲五方面進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評(píng)分。總得分最低分為2分，表示完全正常，無(wú)神經(jīng)功能缺陷；總得分最高分為11分，表示動(dòng)物意識(shí)喪失或死亡。

1.7 氫質(zhì)子核磁共振波譜MRS檢查 用Siemens Novus 1.5T超導(dǎo)型磁共振系統(tǒng)行MRI及1H-MRS檢查。檢測(cè)梗死中心區(qū)代謝產(chǎn)物，包括N-乙酰天門冬氨酸(NAA)、乳酸(Lac)、膽堿(Cho)和肌酸(Cr)的含量，并以Cr作為標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算各代謝物與其比值。所得圖像用Siemens Novus 1.5T MR圖像處理軟件進(jìn)行相同基線校正、相位調(diào)整及化學(xué)移位確定，自動(dòng)獲取波譜各代謝物以Cr為參照的代謝產(chǎn)物比值而進(jìn)行比較。

2 結(jié) 果

2.1 移植后各組兔神經(jīng)功能評(píng)分對(duì)比 采用Purdy評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)移植后各組兔神經(jīng)功能進(jìn)行評(píng)分，假手術(shù)組各時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)功能評(píng)分均為2分。移植2 d時(shí)，腦梗死組、干細(xì)胞組和生理鹽水組NSS評(píng)分比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。移植7 d、14 d時(shí)，干細(xì)胞組NSS評(píng)分明顯低于2 d時(shí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。在移植14 d時(shí)，各組NSS評(píng)分較2 d顯著減低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且干細(xì)胞組NSS評(píng)分明顯低于腦梗死組和生理鹽水組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(見表1)。

2.2 各組兔腦梗死體積比較 采用Siemens Novus 1.5T MR 圖像處理軟件自動(dòng)得出各層梗死面積，再乘以層厚得出各層梗死體積，再將各層梗死體積求和得出總梗死體積。結(jié)果(見表2)。由表2可知：與生理鹽水組和腦梗死組相比，干細(xì)胞組梗死體積明顯減小(P<0.05)。與腦梗死組相比，生理鹽水組梗死體積未見明顯減小(見圖1)。

2.3 MRS檢測(cè)代謝物含量的比較 MCAO 2 h再灌注2 d和2 w時(shí)MRS檢查結(jié)果顯示，腦缺血區(qū)代謝物含量在不同組有明顯差異。與假手術(shù)組相比，干細(xì)胞組、腦梗死組與生理鹽水組NAA/Cr、Cho/Cr比值均明顯下降，Lac/Cr比值均顯著上升(P<0.01)；與腦梗死組及生理鹽水組相比，干細(xì)胞組NAA/Cr、Cho/Cr比值顯著增高(P<0.05)，Lac/Cr 比值顯著降低(P<0.05)；與腦梗死組相比，生理鹽水組NAA/Cr、Cho/Cr、Lac/Cr比值無(wú)明顯改變(P>0.05)(見表3、表4、圖2)。

表1 各組細(xì)胞移植后NSS的比較

與2 d比較*P<0.05；與梗死組比較#P<0.05；與生理鹽水組比較△P<0.05

表2 各組兔不同時(shí)間點(diǎn)梗死體積比較(n=10， ±s)

與腦梗死組比較*P<0.05；與生理鹽水組比較#P<0.05

表3 各組2 d時(shí)腦梗死區(qū)代謝物含量比值比較

與假手術(shù)組比較*P<0.01；與腦梗死組比較#P<0.05；與生理鹽水組比較△P<0.05

表4 各組2 w時(shí)腦梗死區(qū)代謝物含量比值比較±s)

與假手術(shù)組比較*P<0.01；與腦梗死組比較#P<0.05；與生理鹽水組比較△P<0.05

A：假手術(shù)組；B：腦梗死組；C：生理鹽水組；D：干細(xì)胞組

圖1 各組兔腦MRI圖

A：假手術(shù)組；B：腦梗死組；C：生理鹽水組；D：干細(xì)胞組

圖2A:假手術(shù)組兔MRS圖，可見NAA、Cho為直立陡峭波峰，未檢出Lac峰。圖2B、C分別為腦梗死組及生理鹽水組，較圖2A，NAA峰減低，可見高大的Lac峰；圖2D:為干細(xì)胞組，與圖2A相比，NAA峰減低，可見明顯Lac峰；與圖2B和2C相比，NAA峰明顯增高，而Lac峰顯著減低

圖2 造模后各組兔顱腦MRS成像

3 討 論

缺血性腦卒中現(xiàn)有的抗血小板聚集、改善腦血循環(huán)、促進(jìn)腦代謝、使用脫水劑等藥物均不能保證腦梗死后缺血區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的存活，而溶栓、拉栓等介入治療手段仍存在很大的局限性，不能根本改善腦梗死的預(yù)后。近年來(lái)，干細(xì)胞移植為中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的修復(fù)帶來(lái)了新的希望。臍血被認(rèn)為是各種干細(xì)胞的來(lái)源[3]。臍血中的MSCs被認(rèn)為是用于移植的最佳選擇。

干細(xì)胞治療的最終目標(biāo)是將活細(xì)胞送入腦內(nèi)，并希望這些細(xì)胞或其釋放的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子可重建受損的宿主神經(jīng)連接，或通過(guò)形成新的網(wǎng)絡(luò)或重建原有通路，從而促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)[4]。有多項(xiàng)研究證實(shí)，UCB-MSC具有神經(jīng)分化潛能。另外，UCB-MSC具有重要的“免疫逃避”特性、免疫調(diào)節(jié)功能和遷移性等特點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)將體外分離的hUCB-MSCs經(jīng)靜脈途徑注射入MCAO兔體內(nèi)，設(shè)立腦梗死組及生理鹽水組，結(jié)果顯示自14 d起，干細(xì)胞組NSS評(píng)分顯著低于腦梗死組及生理鹽水組，而生理鹽水組與腦梗死組之間無(wú)顯著差異。提示hUCB-MSC能促進(jìn)腦缺血再灌注兔神經(jīng)功能的恢復(fù)。此外該試驗(yàn)通過(guò)對(duì)各組兔腦MRI檢查統(tǒng)計(jì)分析，顯示干細(xì)胞組梗死體積明顯小于生理鹽水組及腦梗死組，提示hUCB-MSC移植可減輕腦缺血再灌注兔腦的損傷。因此，我們推測(cè)hUCB-MSCs具有神經(jīng)分化潛能及遷移等特性。

質(zhì)子磁共振波譜是目前唯一能非創(chuàng)傷性觀察活體內(nèi)某一特定組織區(qū)域的代謝物濃度改變的檢測(cè)手段，采用MRS觀察組織病理生理改變亦逐漸在臨床上運(yùn)用。這對(duì)早期診斷以及預(yù)后和療效的判斷非常有用，目前臨床上NAA、Cr、Cho、MI、Lac的測(cè)定較為常用。NAA作為公認(rèn)的神經(jīng)元損傷相關(guān)的標(biāo)記物，主要存在于有功能的神經(jīng)元的胞體和軸突內(nèi)，由神經(jīng)元的線粒體產(chǎn)生，能敏感地反映神經(jīng)元的脫失、功能失活及殘存神經(jīng)元的狀態(tài)[5,6]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，腦梗死組、干細(xì)胞組及生理鹽水組較假手術(shù)組NAA/Cr均顯著降低，但干細(xì)胞組降低幅度較腦梗死組及生理鹽水組小。因此，我們可以推斷，hUCB-MSCs移植可以阻斷細(xì)胞凋亡，減少神經(jīng)元的損傷，提高缺血區(qū)域神經(jīng)元的數(shù)量或神經(jīng)元的密度，從而使缺血區(qū)域的NAA增高。

Lac是葡萄糖無(wú)氧酵解的產(chǎn)物，反映早期缺血性腦梗死嚴(yán)重程度，同時(shí)認(rèn)為L(zhǎng)ac是早期腦梗死最敏感的標(biāo)記物，它可能在常規(guī)MR出現(xiàn)異常之前就能被檢測(cè)到，可根據(jù)Lac峰值出現(xiàn)的位置提示疑似早期缺血的腦組織的部位及范圍。在腦梗死中，Lac濃度呈動(dòng)態(tài)變化過(guò)程。有多項(xiàng)研究報(bào)道[7～9]，Lac在腦梗死發(fā)生后3 h就可被檢測(cè)出，48 h內(nèi)顯著升高，隨后急性期繼續(xù)升高，并達(dá)到高峰，亞急性期開始有不同程度的下降，以后隨病程的延長(zhǎng)呈進(jìn)行性下降，至慢性晚期(發(fā)病后1 m以上)逐漸消失。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，腦缺血后，Lac水平顯著上升，48 h Lac水平明顯高于2 w的。并且，干細(xì)胞組Lac水平顯著低于生理鹽水組及腦梗死組的。這可能與hUCB-MSCs移植能在宿主腦內(nèi)存活、分化，促進(jìn)新生血管的再生有關(guān)。近年來(lái)，有多項(xiàng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，MSCs能增加缺血區(qū)域的新生血管的生成[10,11]，能顯著改善局部血流灌注及腦細(xì)胞缺血缺氧。而MaXL[12]等的實(shí)驗(yàn)研究表明移植hUCB-MSCs能導(dǎo)致腦缺血大鼠血管生成素-1(Angiopoietin-1)和大鼠血管生成素-2 mRNA的顯著上調(diào)，且Ang-2的表達(dá)早于Ang-1，提示Ang-2可能是血管生成的起始物。

Cho是細(xì)胞膜磷脂代謝的中間產(chǎn)物，主要存在于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中，參與細(xì)胞膜的合成和髓鞘的降解。Cho含量的變化可間接反映細(xì)胞的增殖情況。而有關(guān)腦梗死后Cho變化規(guī)律的文獻(xiàn)報(bào)道不盡相同，多數(shù)研究以下降多見[7,13]。也有研究報(bào)道[8]不同年齡腦梗死時(shí)Cho的變化存在差異性，可能與年齡和代謝水平有一定的關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示腦缺血后Cho顯著下降，并且干細(xì)胞組較生理鹽水組及腦梗死組下降幅度小。腦缺血后Cho持續(xù)下降，反映隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，缺血區(qū)神經(jīng)元壞死、丟失增多，細(xì)胞密度下降，而干細(xì)胞組較生理鹽水組下降幅度小，也間接表明干細(xì)胞移植在一定程度上能阻斷梗死灶中心區(qū)神經(jīng)元的凋亡。

綜上所述，MRS能動(dòng)態(tài)觀察腦梗死后代謝物的變化，有助于了解腦梗死發(fā)生發(fā)展的過(guò)程，在腦梗死的研究中具有重要的價(jià)值。本研究表明hUCB-MSCs移植能改善腦缺血再灌注兔神經(jīng)功能缺損，減小梗死體積，提高缺血中心區(qū)NAA/Cr、Cho/Cr比值，降低Lac/Cr比值，為hUCB-MSCs移植能改善缺血區(qū)細(xì)胞缺血缺氧，并在一定程度上減少神經(jīng)元的凋亡提供間接的證據(jù)。

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Effect of human umbilical cord blood mesenchymal stem cells transplantation on functional recovery and the1H-MRS parameters in the rabbits with cerebral ischemia-reperfusion

HUANGHaili,GUANYeming,LIUXuechun,etal.

(DepartmentofNeurology,The105thHospitalofChinesePeople’sLiberationArmy,Hefei230031,China)

Objective To observe the effect of human umbilical cord blood mesenchymal stem cells (hUCB-MSCs) transplantation on functional recovery and the1H-MRS parameters in the rabbits with cerebral ischemia-reperfusion.Methods The hUCB-MSCs abstracted from 60～80 ml of cord blood of full term babies were cultured in vitro.The cerebral artery occlusion(MCAO) rabbits models were divided into three groups:cerebral infarction(CI) group,stem cell group and saline group,and the last two groups were separately transplanted with hUCB-MSCs and saline.On 2 d,14 d after reperfusion,neurological deficits were evaluated by the neurological severity scores (NSS) in the last three groups.The volume of cerebral infarction and the level of NAA,Cho,Cr,Lac in center area of ischemia were detected by using MR scanning.Results The neurological scores of hUCB-MSCs group significantly decreased,compared with CI group and saline group(P<0.05).There was no significant difference between CI group and saline group(P>0.05).Conclusion hUCB-MSCs treatment could increase the ratio of NAA/Cr,Cho/Cr,decrease the ratio of Lac/Cr,reduce the infarct volume,and could significantly improve the neurological function of rabbit.

Human umbilical cord blood mesenchymal stem cells; Cerebral infarction; Neurological dysfunction; Proton magnetic resonance spectros-copy

1003-2754(2017)06-0484-04

2016-12-05；

2017-03-29

國(guó)家自然科學(xué)基金(No.81171108)

(解放軍第一〇五醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，安徽 合肥 230031)

汪青松，E-mail：Wangqs65@yahoo.com

R743.3

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