液基細胞學檢測技術在胸腔積液細胞學診斷中的應用價值

楊槐，楊娜，劉智，夏勤，李林豐，崔麗娟，梁鵬，夏涌然，劉汝藝，劉祿

(遂寧市中心醫院，四川 遂寧 629000)

液基細胞學檢測技術在胸腔積液細胞學診斷中的應用價值

楊槐，楊娜，劉智，夏勤，李林豐，崔麗娟，梁鵬，夏涌然，劉汝藝，劉祿*

(遂寧市中心醫院，四川 遂寧 629000)

目的：探討液基細胞學檢測技術在胸腔積液細胞學診斷中的應用價值。方法：選取遂寧市中心醫院病理科胸腔積液細胞學標本238 例，采用液基細胞薄層涂片檢測(TCT)法及傳統手工細胞學涂片法進行細胞學檢測，檢測結果以病理活組織檢查為標準，并對兩種方法的檢出率進行比較。結果：238 例胸腔積液標本中，傳統涂片法檢出73 例(30.7%)，TCT法檢出97 例(40.8%)。238 例中共檢出肺癌80 例，兩種方法對腺癌、鱗狀細胞癌、小細胞癌的檢出率比較，差異均有統計學意義。結論：液基細胞學檢測技術在胸腔積液細胞學診斷中具有較高的病變檢出率，尤其對惡性腫瘤的檢出率具有重要臨床診斷價值。

液基細胞學；胸腔積液；細胞學；診斷

液基細胞薄層涂片檢測(TCT)是采用濾過膜或重力沉淀原理，利用特殊制片系統制作標準化優良細胞學病理薄片的一項技術[1]。該技術是現代細胞病理學的一項重大革新，自1999年引進我國，廣泛應用于婦科宮頸癌的早期篩查，是女性宮頸疾病早診早治的重要檢查方法，為宮頸癌早診早治做出了重要貢獻。近年來，該技術在非婦科方面的應用也逐漸普及。本文238 例胸腔積液標本均采用TCT法與傳統手工細胞涂片法進行檢測，對結果進行比較。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月—2016年8月遂寧市中心醫院病理科胸腔積液標本238 例，其中男178 例，女60 例，年齡21～76 歲，胸腔積液均進行細胞學檢查并行胸膜腔穿刺活組織檢查術或纖維支氣管鏡活組織檢查術，病理診斷結果以活組織檢查診斷為標準。

1.2 試劑與儀器

巴氏染色液、TCT處理液及TCT制片機均購自泰普生物科技有限公司(福州，泰普)，無水乙醇、二甲苯、甲醛溶液均購自科隆試劑有限公司(成都，科隆)。

1.3 方法

238 例胸腔積液細胞學病理薄片制作采用傳統手工涂片法與TCT法同時進行取材制片。標本前期處理方法為：送檢標本4 ℃靜置6～8 h，棄上清液，保留液體150～200 mL。傳統手工細胞涂片法：用移液管于前期處理后的標本液體中層吸取3 mL進行手工細胞涂片，保持液體均勻分布于載玻片，室溫下干燥，轉入75%乙醇固定4 h，進行巴氏染色，染色步驟按操作手冊進行。TCT法：將前期處理后標本液體50 mL轉入TCT標本處理液中，靜置1 h，置渦旋振蕩器5 min振蕩混勻，將標本轉入帶有濾網的試管，以2 000 r/min離心10 min，棄上清液，加入10 mL Tris緩沖液再次振蕩混勻，將混勻液體轉入TCT制片機按操作進行制片，染色。

1.4 分組依據

238 例胸腔積液病變在進行細胞學病理診斷后，均行相應活組織檢查，最終診斷標準依據活組織檢查的組織石蠟切片為準。將胸腔積液檢測結果分為良性病變和惡性病變兩大類，其中良性病變分為肺炎組(A組，81 例)和肺結核組(B組，77 例)，惡性病變為肺癌組(C組，80 例)。肺癌組根據癌腫類型分為腺癌組(Ⅰ組，41 例)、鱗狀細胞癌組(Ⅱ組，27 例)、小細胞癌組(Ⅲ組，12 例)。

1.5 統計學方法

采用SPSS17.0統計學軟件對所得數據進行處理，計數資料采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 傳統涂片法與TCT法對胸腔積液細胞學總檢出率比較

傳統涂片法檢出73 例，檢出率為30.7%，TCT法檢出97 例，檢出率為40.8%，兩種方法比較差異有統計學意義(P<0.05)。A組與B組兩種方法檢出率比較差異無統計學意義(P>0.05)，C組兩種方法檢出率比較，差異有統計學意義(P<0.05)(見表1)。

表1 兩種方法對胸腔積液細胞學總檢出率比較例(%)

2.2 傳統涂片法與TCT法對胸腔積液細胞學中肺癌組檢出率比較

238 例研究對象中肺癌80 例，傳統涂片法檢出25 例，檢出率為31.2%，TCT法檢出43 例，檢出率為53.8%，兩種方法檢出率比較差異有統計學意義(P<0.05)。將Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組傳統涂片法與TCT法檢出率進行比較，差異有統計學意義(P<0.05)(見表2)。

表2 兩種方法對胸腔積液細胞學中肺癌組檢出率比較

3 討 論

3.1 胸腔積液細胞學診斷標準

3.1.1 炎癥

病理學診斷胸腔積液炎癥性病變的病理特征為胸腔積液細胞學涂片中可查見中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、淋巴細胞等炎癥性細胞，背景中有纖維素樣滲出物及壞死細胞碎片等，常見胸膜脫落的內皮細胞，無異常腫瘤樣細胞[2]。

3.1.2 結核性病變

結核性胸腔積液具有典型渾濁特點，經沉淀后胸腔積液可分層，表層為一層薄層的油脂樣膜，其下為澄清滲出液及脫落細胞，底層為壞死組織碎片沉淀[3]。在細胞學片上可見大量的淋巴細胞，并可見多核巨細胞，背景較多為干酪樣壞死。

3.1.3 腺癌

胸腔積液中腺癌細胞多為成團分布，癌細胞團的大小、形狀不一，極性消失。癌細胞常相互重疊擠壓，呈桑葚樣排列，形狀為卵圓形，細胞核明顯，核膜厚，核染色質呈疏松顆粒樣，核仁大而明顯[4]。TCT法中癌細胞可呈單個分布或3～5個排列，胞漿常有分泌空泡。

3.1.4 鱗狀細胞癌

胸腔積液中鱗狀細胞癌多為單個散在分布，形態多樣，常可出現不規則、多邊形等奇異性細胞，細胞背景有較多紅細胞及壞死樣不定形物質，TCT法中癌細胞多均勻分散，平鋪于切片上，背景清晰，核染色質呈塊狀或粗顆粒狀，深染，有的可呈墨水滴樣，分化差的可見明顯核仁，部分區域癌細胞呈巢團狀分布，且具有一定極性，并在一定程度上表現為鱗狀上皮的排列特點[5]。

3.1.5 小細胞癌

胸腔積液中小細胞癌為惡性神經內分泌腫瘤，惡性度極高。癌細胞起源于神經內分泌細胞，體積較小，呈圓形、卵圓形或燕麥樣，細胞質極少，以細胞核為主，該腫瘤細胞單個散在分布時極易與淋巴細胞相混淆，癌細胞大小約為淋巴細胞的1.5～2.0倍，核畸形明顯，染色質濃集，細胞常成群出現。TCT法可收集較多量的細胞于切片上[6]，有助于較多異型性細胞的檢出，并且增加癌細胞與正常淋巴細胞的對比，可大大減少漏診及誤診率。

3.2 細胞病理學在病理學診斷中的地位

病理學由組織病理學、細胞病理學及尸檢病理學三大部分組成。其中，細胞病理學是臨床診斷病理學的一個重要組成部分[7]。目前，已經發展到分子生物學水平，液基細胞學檢測技術的優點[8]：第一，處理系統改變了標本采集和處理的方法，能夠消除標本中黏液及紅細胞，使背景清晰、無污染，保持細胞完整無損，更加清楚細膩地獲得了細胞核核質及核仁的三維立體結構。第二，取材標本量較大，本研究中TCT法所取標本為經過靜置沉淀處理后的標本，取材量達到近200 mL，大大提高了陽性標本的檢出率，降低了漏檢比例。直接涂片法的陽性符合率較低及出現假陰性的原因為：第一，涂片中沒有具有診斷意義的細胞或涂片質量差且厚薄不均勻。第二，過多黏液和(或)血液造成背景雜亂，干擾結果。第三，炎癥細胞、上皮細胞過度重疊使具有診斷意義的細胞被遮蓋，導致無法觀察而影響診斷。

3.3 液基細胞學在細胞病理學的地位

液基細胞學檢測技術的優勢[9]：第一，能夠去除影響閱片的細胞同時還能夠保證有足夠的細胞數量供診斷參考，并避免了直接涂片過程中所引起的細胞過度干燥造成的假象[10]。第二，自動化程序制出的薄片分布均勻，濕潤固定的細胞核結構清晰易于觀察。第三，每張切片的細胞較為集中排列在固定區域內，便于觀察，減少因疲勞造成的漏診情況。第四，程序化制片，具有高效率、高穩定性、高規范化等特點，保證制片的細胞的效果，避免人工涂片造成人為細胞擠壓而出現腫瘤假象[11]。制片質量高，使診斷細胞病理學提高到標準化自動化的階段，提高了非婦科細胞學診斷的準確性與可靠性。對早期發現診斷腫瘤及腫瘤防治研究具有重要意義，液基細胞學技術作為一種改良的細胞學制片技術還可以用于免疫細胞化學和分子水平的研究[12]。本研究中，238 例胸腔積液標本總檢出率、肺癌組檢出率及肺癌類型分型檢出率比較，TCT法均優于傳統涂片法，顯示TCT技術在非婦科液基細胞學檢測中也具有較高的應用價值。

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The value application of thin-prep cytology test in the diagnosis of pleural effusion cytology

YANG Huai，YANG Na，LIU Zhi，XIA Qin，LI Linfeng，CUI Lijuan，LIANG Peng，XIA Yongran，LIU Ruyi，LIU Lu

(Suining Central Hospital，Suining 629000，China)

Objective：To explore the value of liquid-based cytology in the diagnosis of pleural effusion cytology.Methods：All 238 cases of pleural effusion cytology were collected from Suining Central Hospital.The TCT method and traditional manual cytology smear were used for cytology.The detection results were based on pathologic biopsy and the detection rate of the two methods were compared.Results：In the 238 cases of pleural effusion，73 cases (30.7%) were detected by traditional smear，97 cases (40.8%) were detected by TCT method.In 238 cases，lung cancer in 80 cases，compared with the traditional smear detection rate，the difference was statistically significant.Conclusion：Thin-prep cytology test in the pleural effusion cytology diagnosis has higher detection rate of pathological changes，especially for malignant tumor detection rate with the clinical diagnostic value.

thin-prep cytology test；pleural effusion；cytology；diagnose

1671-8631(2017)06-0456-03

*本文通訊作者：劉祿

R561

B

2016-08-16

(本文編輯：王作利)

楊槐(1974— )，男，重慶市潼南縣人，副主任醫師。研究方向：細胞學病理診斷。