間充質干細胞聯合白藜蘆醇對實驗性自身免疫性腦脊髓炎小鼠炎癥的影響

王 東，龐曉璐，王 梁，張立紅，王 燁(.河北醫科大學第二醫院神經內科，河北 石家莊 050000；.河北醫科大學診斷學教研室，河北 石家莊 05007；.河北省石家莊市中醫院肛腸科，河北 石家莊 050000)

·論 著·

間充質干細胞聯合白藜蘆醇對實驗性自身免疫性腦脊髓炎小鼠炎癥的影響

王 東1，龐曉璐2，王 梁1，張立紅1，王 燁3
(1.河北醫科大學第二醫院神經內科，河北 石家莊 050000；2.河北醫科大學診斷學教研室，河北 石家莊 050017；3.河北省石家莊市中醫院肛腸科，河北 石家莊 050000)

目的研究間充質干細胞聯合白藜蘆醇治療緩解實驗性自身免疫性腦脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠模型疾病進程的機制，探討聯合治療對EAE小鼠炎癥的作用。方法正常健康C57BL/6雌性小鼠經髓鞘少突膠質細胞糖蛋白35-55多肽(MOG35-55)誘導構建EAE小鼠模型，通過觀察EAE小鼠的臨床評分，判斷EAE小鼠使用間充質干細胞聯合白藜蘆醇處理的效果。通過HE 染色和抗CD4的免疫組織化學檢測單核細胞和T淋巴細胞對于脊髓組織的浸潤。應用ELISA檢測白藜蘆醇和間充質干細胞處理后EAE小鼠血清中Th1型細胞因子γ干擾素(Interferon-γ，IFN-γ)、腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和Th2型細胞因子白細胞介素(interleukin，IL)-4、IL-10的表達量。結果4組平均臨床評分、最大臨床評分、細胞浸潤、CD4+T細胞浸潤、IFN-γ、TNF-α mBM-MSCs處理組、白藜蘆醇處理組、mBM-MSCs聯合白藜蘆醇處理組低于PBS處理組，mBM-MSCs聯合白藜蘆醇處理組低于mBM-MSCs處理組和白藜蘆醇處理組，差異均有統計學意義(P<0.05)；IL-4、IL-10 mBM-MSCs處理組、白藜蘆醇處理組、mBM-MSCs聯合白藜蘆醇處理組高于PBS處理組，mBM-MSCs聯合白藜蘆醇處理組高于mBM-MSCs處理組和白藜蘆醇處理組，差異均有統計學意義(P<0.05)。結論間充質干細胞聯合白藜蘆醇治療可以顯著延緩EAE疾病進程，同時聯合治療能夠顯著降低小鼠EAE模型的疾病嚴重性，從而改善EAE疾病的臨床評分；可以降低EAE小鼠脊髓中的炎癥細胞數目，并促進EAE小鼠Th1型向Th2型細胞因子的轉變。

腦脊髓炎，自身免疫性，實驗性；間質干細胞；白藜蘆醇

多發性硬化是一種中樞神經系統的炎性脫髓鞘疾病，呈現出多種神經系統的病變。主要表現為脫髓鞘現象和中樞神經系統的軸突缺失[1]。多發性硬化表現出緩解和進展2個疾病過程[2]。雖然導致多發性硬化發生的原因現在還不甚清楚，免疫系統破壞和產生髓鞘細胞的衰竭可能是其中潛在的機制。遺傳因素和環境因素如感染、環境污染也被認為是其中潛在的誘因[3]。到目前為止，多發性硬化還沒有有效的治療方法?，F有的治療僅限于在疾病發生之后改善機體功能或是預防新的疾病發生?；瘜W藥物治療是最有效的方法但存在不良反應[4-5]。EAE模型是中樞神經系統免疫性脫髓鞘疾病的模型，是一個腦部炎癥的動物模型，表現為 T細胞介導的自身免疫疾病特征[6]。這一模型由于能夠模擬多發性硬化等某些疾病的特征，所以被作為人類中樞神經系統免疫疾病包括多發性硬化等的動物模型而廣泛研究[7]。干細胞移植能夠誘導神經元的再生，是多發性硬化的一個潛在有效的治療方法。干細胞能夠分化成多種細胞群族并且能夠通過新的細胞重建修復損傷的組織，最終恢復失去的功能[8]。間充質干細胞(mesenchymal stem cells，MSC)和神經干細胞(neural stemcells,NSCs)[9]2種類型的干細胞可以應用于EAE的干細胞治療。MSC來源于成熟組織，能夠抑制介導神經元細胞損傷和炎癥的T細胞，因此降低多發性硬化的癥狀。研究顯示MSC能夠調節EAE的免疫病理，也同樣能夠促進神經細胞的保護作用[10]。NSCs是存在于大腦中多能干細胞的一個特殊的細胞類型。NSCs可以遷移到中樞神經系統里同時經過神經元分化，分化的細胞可以作為細胞代替治療的潛在來源[11]。實驗研究顯示神經干細胞在EAE模型中是有治療效果的，在其他神經退行性疾病中也可見治療效果。神經干細胞能夠分化成少突細胞并且降低脊髓和大腦中炎癥病灶的炎癥效應，而且可以修復EAE小鼠中受損的髓鞘組織[12]。目前應用2種干細胞治療多發生硬化均已經進入到了臨床試驗階段。本研究旨在探討MSC聯合白藜蘆醇對EAE模型的免疫調節作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 實驗用C57BL/6 雌性近交系小鼠40只，18～20 g，6～8周。購于北京維通利華實驗動物技術有限公司，許可證編號:SCXK(京)2012-0001。動物飼養于室溫 (24±2) ℃的環境中，維持光-暗12 h循環交替，并給予足量的食料和潔凈飲水。從小鼠股骨和脛骨中分離骨髓細胞貼壁持續培養后經流式抗體標記，顯示Sca-1+、CD44+、CD45-、CD34-和 CD14-。確定培養細胞帶有MSC的表面標記蛋白。

1.2 EAE小鼠模型的建立、分組及處理 將抗原MOG35-55用生理鹽水稀釋成5 mg/mL，并按1∶1等體積加入完全弗氏佐劑 (其中結核桿菌H37Ra終濃度為4 mg/mL)混合，乳化后按每只0.1 mL于小鼠脊柱兩側分四點皮下注射，第0 h及第48 h腹腔注射500 ng 0.5 mL百日咳毒素，建立EAE模型。免疫在乙醚麻醉和充分固定下進行。將EAE小鼠隨機分為4組(每組n=10)：sham-EAE對照組(PBS處理組)、mBM-MSCs處理組、白藜蘆醇處理組、mBM-MSCs聯合白藜蘆醇處理組。mBM-MSCs在免疫后第7天采用尾靜脈注射(1.5×106個/ 200 mL PBS/每只小鼠)。白藜蘆醇治療則使用腹腔注射(30 mg/kg，在EAE免疫后每天1次連續注射7 d)。而對照小鼠尾靜脈注射等量PBS。用Knoz 5分評分法從免疫后的第5天開始對實驗小鼠評分。具體評分標準如下：0分無癥狀；1分尾部失去張力；2分尾部無力伴隨后肢力弱；3分后肢癱瘓；4分后肢及前肢癱瘓，被動翻身后不能復原；5分瀕臨死亡或死亡。以±0.5分計算癥狀介于兩者標準之間者?！懊咳辗e分均值”由當日組內所有動物神經功能評分的分值總和除以該組動物數量所得。 4組小鼠年齡、體質量均具有可比性。

1.3 觀察指標 在免疫后第21天 取材。每組各取6只小鼠，經水合氯醛麻醉后，4%多聚甲醛灌注固定，取腰膨大處脊髓石蠟包埋，5 μm連續切片制成石蠟切片。采用HE法觀測炎癥浸潤情況，應用CD4抗體檢測免疫細胞聚集情況。

1.4 檢測指標 免疫后21 d將EAE小鼠處死，從心臟采血3 mL置于離心管中，靜置后3 000 r/min離心10 min，取上層血清。應用小鼠ELISA試劑盒檢測血清中IFN-γ、TNF-α、 IL-4、IL-10水平。ELISA實驗操作按照試劑盒提供的操作規程。

1.5 統計學方法 應用SPSS 18.0軟件進行統計分析。實驗所測得數據進行正態性檢驗和方差齊性檢驗，計量資料方差齊時采用F檢驗分析，方差不齊時采用非參數秩和檢驗分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 4組臨床評分比較 4組平均臨床評分與最大臨床評分mBM-MSCs處理組、白藜蘆醇處理組、mBM-MSCs聯合白藜蘆醇處理組低于PBS處理組，mBM-MSCs聯合白藜蘆醇處理組低于mBM-MSCs處理組和白藜蘆醇處理組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表1。

2.2 4組炎癥細胞表達比較 4組細胞浸潤和CD4+T細胞浸潤mBM-MSCs處理組、白藜蘆醇處理組、mBM-MSCs聯合白藜蘆醇處理組低于PBS處理組，mBM-MSCs聯合白藜蘆醇處理組低于mBM-MSCs處理組和白藜蘆醇處理組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表2。

2.3 4組炎癥因子水平比較 4組IFN-γ、TNF-α mBM-MSCs處理組、白藜蘆醇處理組、mBM-MSCs聯合白藜蘆醇處理組低于PBS處理組，mBM-MSCs聯合白藜蘆醇處理組低于mBM-MSCs處理組和白藜蘆醇處理組，差異均有統計學意義(P<0.05)。4組IL-4、IL-10 mBM-MSCs處理組、白藜蘆醇處理組、mBM-MSCs聯合白藜蘆醇處理組高于PBS處理組，mBM-MSCs聯合白藜蘆醇處理組高于mBM-MSCs處理組和白藜蘆醇處理組，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表1 實驗組臨床評分情況Table 1 Clinical score of the experimental group 分)

*P<0.05與PBS處理組比較 #P<0.01與mBM-MSCs處理組比較 △P<0.05與白藜蘆醇處理組比較(秩和檢驗)

組別細胞浸潤CD4+T細胞浸潤PBS處理組100100mBM-MSCs處理組68.50±7.70*57.80±6.80*白藜蘆醇處理組56.60±7.80*65.30±6.40*mBM-MSCs聯合白藜蘆醇處理組26.40±4.10*#△22.50±3.60*#△F6.5796.146P0.0000.000

*P<0.05與PBS處理組比較 #P<0.01與mBM-MSCs處理組比較 △P< 0.05與白藜蘆醇處理組比較(q檢驗)

組別IFN-γTNF-αIL-4IL-10PBS處理組35.7±4.36.31±1.127.48±1.128.78±1.22mBM-MSCs處理組22.1±3.1*4.25±0.76*13.62±1.48*20.45±3.28*白藜蘆醇處理組20.4±2.8*4.03±0.64*14.35±1.55*23.47±3.11*mBM-MSCs聯合白藜蘆醇處理組13.4±1.8*#△2.42±0.47*#△19.17±2.21*#△37.58±4.79*#△F3.5884.6566.2294.132P0.0000.0000.0000.000

*P<0.05與PBS處理組比較 #P<0.01與mBM-MSCs處理組比較 △P<0.05與白藜蘆醇處理組比較(q檢驗)

3 討 論

多發性硬化是最常見的影響中樞神經系統的自身免疫疾病之一[13]。目前臨床急需改善多發性硬化的治療方法。將現有的治療方法聯合新的藥物針對疾病的不同階段進行治療是一個新的研究方向[14]。越來越多的實驗表明白藜蘆醇在多種免疫相關疾病如自身免疫性心肌炎、骨關節炎、胰腺炎和視神經炎等中發揮著潛在的治療效果[15]。骨髓來源的MSC具有免疫調節活性，能夠抑制T淋巴細胞的活化和增殖，并且誘導免疫反應[16]。MSC能夠選擇性地遷移并靶向受損傷的組織，為保護神經元和EAE小鼠的軸突損傷治療提供了一個特殊的方法。而白藜蘆醇和MSC聯合使用的治療效果在多發性硬化中的應用還不多見。

根據既往報道和筆者前期的研究，MSC或是白藜蘆醇單獨使用能夠改善EAE小鼠的疾病嚴重情況；聯合使用MSC和白藜蘆醇更能保護小鼠的腦部完整性，延緩疾病進程[17-18]。筆者進一步研究發現，聯合治療可以有效降低炎性細胞浸潤，并且增強免疫調節活性。而潛藏在這一效果中的機制有很多種可能。

聯合治療的免疫調節效果可能是由于改變了EAE小鼠炎癥因子IL-4、IL-10、IFN-γ、TNF-α的表達。中樞神經系統中Th1和Th2的相互平衡關系是決定EAE小鼠發病進程的一個關鍵因素。而細胞因子的平衡能夠決定自體免疫中的耐受性和敏感性。最近的研究表明，髓鞘特異性的T細胞介導了多發性硬化的發生，其中Th2與Th1的比例決定了炎癥的部位[19]。兩者的比例大于1會導致腦脊髓實質中的炎癥[20]。在起始的免疫原性多肽的活化下，初始T細胞能夠分化成為2種輔助性T淋巴細胞，即Th1和Th2細胞[21]。Th1細胞產生IL-2和IFN-γ等細胞因子，誘導巨噬細胞活化，并且調控胞內抗原的感染。Th2細胞分泌IL-4、IL-5和IL-13等細胞因子，幫助B細胞產生抗體，并且在根除蠕蟲和寄生蟲中發揮著必需的作用[22]。另外，還有其他的CD4+T細胞亞群存在并分泌高水平的IL-10和TGF-β，起著抑制Th1和Th2細胞反應的作用。 EAE的敏感性與TNF-α和IFN-γ相關，這兩種都是Th1細胞的初始促炎癥細胞因子[23]。然而Th2細胞因子如IL-4和IL-10是抗炎細胞因子。TNF-α、IFN-γ、 IL-4、IL-10在EAE的病理過程中極其重要，是指導Th1和Th2細胞發育的標志性細胞因子[24]。MSC能夠抑制T淋巴細胞活化和增殖，誘導Th2細胞極化的免疫反應，促進內源性的修復，因此發揮著免疫調節的作用。而MSC和白藜蘆醇聯合使用改善了單獨治療的效果，表現出了協同的治療作用[25]。

另一個可能的機制就是抑制炎癥。炎癥是一個牽涉到免疫細胞、血管的保護性反應，是組織遭受損傷刺激時的一個復雜的生物學反應。免疫炎癥消除了早期的細胞損傷成因，清除了壞死細胞和損傷組織并且起始組織修復，但是在復發緩解型EAE模型中炎癥能夠造成組織損傷。因此，抵抗炎癥成了治療最初始的一個目的[26]。多發性硬化及它的EAE動物模型是由活化的免疫細胞如T和B淋巴細胞和巨噬細胞、小膠質細胞介導的自身免疫疾病，是中樞系統的免疫疾病[27]。淋巴細胞是被外周組織中的抗原激活，并且克隆擴增浸潤到中樞神經系統中。它們產生大量的炎癥細胞因子和氮氧化物，從而導致髓鞘脫失和軸突退化。影響中樞神經系統的抗炎癥的藥物通過降低炎癥治療疼痛[28]，大半是止痛藥。非甾體抗炎藥能夠中和環氧合酶的活性減輕疼痛。環氧合酶能夠通過合成前列腺素促進炎癥的發生，而非甾體抗炎藥能夠防止合成前列腺素，從而減輕疼痛[29]。本研究結果顯示，MSC或是白藜蘆醇單獨使用，或是聯合使用都能顯著地降低T細胞的浸潤。最近的研究表明白藜蘆醇能夠與多種細胞中的分子相互作用，如信號轉導分子和細胞周期相關的蛋白等[30]。通過這種方式，白藜蘆醇活化一系列轉錄因子，抑制抗凋亡基因，抑制多種蛋白激酶和血管生成相關基因的表達，并且下調炎癥生物分子的表達[31]。本研究與以往的關于白藜蘆醇抗炎活性的研究結果一致。

當然，MSC聯合白藜蘆醇所起到增強效果的具體機制還有待于進一步深入探討。

[1] Bjelobaba I,Savic D,Lavrnja I. Multiple sclerosis and neuroinflammation:The overview of current and prospective therapies[J]. Curr Pharm Des,2017,23(5):693-730.

[2] Borjini N,Fernandez M,Giardino L,et al. Cytokine and chemokine alterations in tissue,CSF,and plasma in early presymptomatic phase of experimental allergic encephalomyelitis (EAE),in a rat model of multiple sclerosis[J]. J Neuroinflammation,2016,13(1):291.

[3] Briken S,Rosenkranz SC,Keminer O,et al. Effects of exercise on Irisin,BDNF and IL-6 serum levels in patients with progressive multiple sclerosis[J]. J Neuroimmunol,2016,299:53-58.

[4] Biller A,Pflugmann I,Badde S,et al. Sodium MRI in Multiple Sclerosis is Compatible with Intracellular Sodium Accumulation and Inflammation Induced Hyper-Cellularity of Acute Brain Lesions[J]. Sci Rep,2016,6:31269.

[5] 朱毅，朱一飛，李世平，等.α硫辛酸酸對實驗性自身免疫性腦脊髓炎大鼠軸索損傷的保護作用[J].河北醫科大學學報，2015,36(8)：874-877.

[6] Comi G,Radaelli M,Soelberg Sorensen P. Evolving concepts in the treatment of relapsing multiple sclerosis[J]. Lancet,2017,389(10076):1347-1356.

[7] Cordiglieri C,Baggi F,Bernasconi P,et al. Identification of a gene expression signature in peripheral blood of multiple sclerosis patients treated with disease-modifying therapies[J]. Clin Immunol,2016,173:133-146.

[8] Covacu R,Brundin L. Endogenous spinal cord stem cells in multiple sclerosis and its animal model[J]. J Neuroimmunol,2016,16:30403-30409.

[9] Cross AH,Song SK. A new imaging modality to non-invasively assess multiple sclerosis pathology[J]. J Neuroimmunol,2017,304:81-85.

[10] Jeong SI,Shin JA,Cho S,et al. Resveratrol attenuates peripheral and brain inflammation and reduces ischemic brain injury in aged female mice[J]. Neurobiol Aging,2016,44:74-84.

[11] Jiang L,Zhang L,Kang K,et al. Resveratrol ameliorates LPS-induced acute lung injury via NLRP3 inflammasome modulation[J]. Biomed Pharmacother,2016,84:130-138.

[12] Kakalij RM,Kumar BD,Diwan PV. Comparative evaluation of nephro- protective potential of resveratrol and piperine on nephrotic BALB/c mice[J]. Indian J Pharmacol,2016,48(4):382-387.

[13] Lancon A,Frazzi R,Latruffe N. Anti-Oxidant,Anti-Inflammatory and Anti-Angiogenic Properties of Resveratrol in Ocular Diseases[J]. Molecules,2016,21(3):304.

[14] Lannan KL,Refaai MA,Ture SK,et al. Resveratrol preserves the function of human platelets stored for transfusion[J]. Br J Haematol,2016,172(5):794-806.

[15] Lee HY,Kim IK,Yoon HK,et al. Inhibitory Effects of Resveratrol on Airway Remodeling by Transforming Growth Factor-beta/Smad Signaling Pathway in Chronic Asthma Model[J]. Allergy Asthma Immunol Res,2017,9(1):25-34.

[16] Lee JA,Ha SK,Cho E,et al. Resveratrol as a Bioenhancer to Improve Anti-Inflammatory Activities of Apigenin[J]. Nutrients,2015,7(11):9650-9661.

[17] Li A,Zhang S,Li J,et al. Metformin and resveratrol inhibit Drp1-mediated mitochondrial fission and prevent ER stress-associated NLRP3 inflamm-asome activation in the adipose tissue of diabetic mice[J]. Mol Cell Endocrinol,2016,434:36-47.

[18] Li D,Liu N,Zhao L,et al. Protective effect of resveratrol against nigrostriatal pathway injury in striatum via JNK pathway[J]. Brain Res,2017,1654(Pt A):1-8.

[19] Limagne E,Lancon A,Delmas D,et al. Resveratrol Interferes with IL1-beta-Induced Pro-Inflammatory Paracrine Interaction between Prim- ary Chondrocytes and Macrophages[J]. Nutrients,2016,8(5)：E280.

[20] Liu PL,Chong IW,Lee YC,et al. Anti-inflammatory Effects of Resveratrol on Hypoxia/Reoxygenation-Induced Alveolar Epithelial Cell Dysfunction[J]. J Agric Food Chem,2015,63(43):9480-9487.

[21] Luo G,Li Z,Wang Y,et al. Resveratrol Protects against Titanium Particle-Induced Aseptic Loosening Through Reduction of Oxidative Stress and Inactivation of NF-κB[J]. Inflammation,2016,39(2):775-785.

[22] Maepa M,Razwinani M,Motaung S. Effects of resveratrol on collagen type Ⅱ protein in the superficial and middle zone chondrocytes of porcine articular cartilage[J]. J Ethnopharmacol,2016,178:25-33.

[23] McGill MR,Du K,Weemhoff JL,et al. Critical review of resveratrol in xenobiotic-induced hepatotoxicity[J]. Food Chem Toxicol,2015,86:309-318.

[24] Monserrat Hernandez-Hernandez E,Serrano-Garcia C,Antonio Vazquez-Roque R,et al. Chronic administration of resveratrol prevents morphol-ogical changes in prefrontal cortex and hippocampus of aged rats[J]. Synapse,2016,70(5):206-217.

[25] Ni ZH,Tang JH,Chen G,et al. Resveratrol inhibits mucus overproduction and MUC5AC expression in a murine model of asthma[J]. Mol Med Rep,2016,13(1):287-294.

[26] Nohr MK,Kroager TP,Sanggaard KW,et al. SILAC-MS Based Characterization of LPS and Resveratrol Induced Changes in Adipocyte Proteomics-Resveratrol as Ameliorating Factor on LPS Induced Changes[J]. PLoS One,2016,11(7):e0159747.

[27] Ornstrup MJ,Harslof T,Sorensen L,et al. Resveratrol increases Osteoblast Differentiation In Vitro Independently of Inflammation[J]. Calcif Tissue Int,2016,99(2):155-163.

[28] Pan S,Li S,Hu Y,et al. Resveratrol post-treatment protects against neon-atal brain injury after hypoxia-ischemia[J]. Oncotarget,2016,7(48):79247-79261.

[29] Park D,Jeong H,Lee MN,et al. Resveratrol induces autophagy by directly inhibiting mTOR through ATP competition[J]. Sci Rep,2016,6:21772.

[30] Pektas MB,Sadi G,Koca HB,et al. Resveratrol Ameliorates the Components of Hepatic Inflammation and Apoptosis in a Rat Model of Streptozotocin-Induced Diabetes[J]. Drug Dev Res,2016,77(1):9-12.

[31] Rai G,Mishra S,Suman S,et al. Resveratrol improves the anticancer effects of doxorubicin in vitro and in vivo models:a mechanistic insight[J]. Phytomedicine,2016,23(3):233-242.

(本文編輯：劉斯靜)

Effects of mesenchymal stem cells combined with resveratrol on inflammation in mice with experimental autoimmune encephalomyelitis

WANG Dong1, PANG Xiao-lu2, WANG Liang1, ZHANG Li-hong1, WANG Ye3
(1.DepartmentofNeurology,theSecondHospitalofHebeiMedicalUnivesity，Shijiazhuang050000，China；2.DepartmentofDiagnostics,HebeiMedicalUnivesity，Shijiazhuang050017，China； 3.DepartmentofProctology,theTraditionalChineseMedicineHospitalofShijiazhang，Shijiazhuang050000，China)

Objective To study in depth the machenism underlying the therapeutic efficiency of mesenchymal stem cell combined with resveratrol in encephalomyelitis(EAE), and to investigate the effect of mesenchymal stem cell combined with resveratrol on immune inflammation in EAE mice. Methods We investigate the therapeutic efficiency of bone marrow mesenchymal stem cell combined with resveratrol in experimental autoimmune encephalomyelitis by clinical score. The infliteration of immune cells such as monocytes and lymphocytes into brain was observed using HE staining and immunohistochemistry with anti-CD4 antibody. ELISA was conducted to detect the secretion of IFN-γ/TNF-α and IL-4/IL-10 inserum. Results The average clinical score, maximal clinical score, CD4+T cell infiltration, IFN-γ, TNF-α were lower in mBM-MSCs group, resveratrol group, mBM-MSCs combined resveratrol group than that in PBS group. The mBM-MSCs combined resveratrol treatment group was lower than the mBM-MSCs treatment group and the resveratrol treatment group(P<0.05); The levels of IL-4 and IL-10 were higher in mBM-MSCs group, resveratrol group, mBM-MSCs combined resveratrol group than that in PBS group. Combination treatment group was higher than mBM-MSCs group or resveratrol group. The differences were statistically significant(P<0.05). Conclusion Combination treatment with mBM-MSCs and resveratrol can significantly delay the progression of EAE disease. Combined treatment can reduce the number of infla- mmatory cells in EAE mouse spinal cord and promote the transition of type Th1 to type Th2 cytokines in EAE mice.

encephalomyelitis, autoimmune, experimental; mesenchymal stem cells; resveratrol

2017-02-15；

2017-05-25

河北省醫學科學研究重點課題(20170534)

王東(1982-)，男，河北霸州人，河北醫科大學第二醫院主治醫師，醫學博士，從事神經內科疾病診治研究。

R744.3

A

1007-3205(2017)07-0745-05

10.3969/j.issn.1007-3205.2017.07.001