張永佳, 張 皓, 李成輝, 金 鑫
(延邊大學農學院,吉林 延吉 133002)
延邊株氣腫疽梭菌鞭毛蛋白FliA基因克隆及生物信息學分析
張永佳, 張 皓, 李成輝, 金 鑫*
(延邊大學農學院,吉林 延吉 133002)
根據氣腫疽鞭毛基因(GenBank登錄號:AB058932)的參考序列,PCR擴增并克隆延邊株氣腫疽梭菌鞭毛蛋白FliA基因。成功克隆后測序,并采用生物信息學方法對鞭毛蛋白FliA基因的蛋白質二級結構、結構功能域、三級結構及抗原表位等重要參數進行了預測和分析。結果表明:與AB058932序列相比,存在38處突變,核苷酸序列的同源性和氨基酸序列的同源性均為97%;FliA蛋白的理論等電點為6.99,不存在跨膜區和信號肽序列,二級結構以α-螺旋和β-折疊為主,主要有15個潛在B細胞抗原表位區,17個限制性CTL抗原表位區。本試驗為延邊株氣腫疽FliA蛋白功能的深入研究奠定了基礎。
氣腫疽梭菌;延邊株;FliA基因;克隆;生物信息學分析
氣腫疽梭菌(Clostridiumchauvoei)又稱肖氏梭菌、費氏梭菌,俗稱黑腿病桿菌,屬細菌綱芽孢桿菌科梭菌屬,為專性厭氧菌。是反芻動物細菌性傳染病—氣腫疽的病原菌。革蘭氏染色不規則,病料及幼齡培養物中呈革蘭氏陽性,而老齡培養菌則呈陰性。主要通過消化道和外傷感染,往往來不及治療就會導致病畜死亡。該病主要感染牛,感染癥狀為肌肉豐滿部位,如股部、臀部、腰部、肩部、頸部及胸部等,發生氣性水腫,呈暗紅棕色到黑色,按壓有捻發音,剖檢局部呈黑色,肌肉干燥呈海綿狀,病變肌肉與正常肌肉相間,局部骨骼肌、皮下和肌間結締組織發生出血或壞死性炎,并產生氣體。……