麻醉劑對小鼠非手術胚胎移植效果的影響

薛如冰

（河北農業大學動物科技學院 河北 保定 071000）

麻醉劑對小鼠非手術胚胎移植效果的影響

薛如冰

（河北農業大學動物科技學院 河北 保定 071000）

胚胎移植是將著床前的早期胚胎利用器械移植到同種的生理狀態相同的動物子宮內，使之繼續發育為新個體的技術，是動物克隆、轉基因動物以及試管嬰兒等領域非常重要的一個環節。目前胚胎移植技術主要應用于4個物種：小鼠、人類、牛、羊。其中人類和牛主要采用非手術法胚胎移植，小鼠和羊主要采用手術法胚胎移植。小鼠手術法胚胎移植操作繁瑣、費用高、難度大、易感染，且不符合實驗動物福利原則。因此，建立高效簡易的非手術胚胎移植技術迫在眉睫。

我們研究發現麻醉狀態下與非麻醉狀態下相對比，在麻醉狀態下進行非手術胚胎移植對小鼠子宮內膜的損傷更小，移植效果更好。

1 試驗動物

實驗小鼠CD-1品系，購自北京維通利華實驗動物技術有限公司。所有小鼠均采用12 L∶12 D循環光照(6：00～18：00光照)，清潔級小鼠房，溫度22℃～25℃，濕度50%～60%，小鼠自由采食和飲水。

2 麻醉方式

我們采用兩種不同的麻醉方式進行非手術胚胎移植。

2.1 阿佛丁全身麻醉

2.2 利多卡因或丁卡因子宮頸局部麻醉

3 試驗方法

我們將小鼠分為四組來進行對照試驗。第一組，在不麻醉狀態下對其進行非手術法胚胎移植。第二組，利用丁卡因子宮頸局部麻醉法對其進行非手術法胚胎移植。第三組，利用利多卡因子宮頸局部麻醉法對其進行非手術法胚胎移植。第四組，利用阿佛丁全身麻醉法對其進行非手術法胚胎移植。

小鼠在麻醉期間代謝微弱，體溫下降嚴重，因此移植后最好將小鼠放于熱臺上待體溫回升后放回籠中。

4 試驗結果

在非麻醉狀態下，小鼠子宮頸口接受刺激后會發生腫脹且子宮收縮加劇，這可能會導致移入的胚胎被擠出子宮角。而在麻醉狀態下，子宮的收縮活動相對減弱，有利于胚胎在子宮內的沉積，降低了胚胎由于子宮收縮而被擠出子宮角的可能性。同時，子宮頸口松弛、子宮平滑肌的張力和強度降低，也會減少移植器械對子宮內膜的損傷。

表1 麻醉劑對小鼠非手術法胚胎移植的影響

由試驗結果可知，麻醉組的移植效率顯著高于不麻醉組，且阿佛丁組的移植效率最高，為67.1%，不同的麻醉方式之間沒有顯著差異(P＞0.05)，說明小鼠在全身麻醉的狀態下進行胚胎移植，子宮損傷最小，移植效率最高。

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