分析核酸檢驗與酶聯免疫檢測血液病毒的應用及檢驗準確率

虢娟 鄧凱航 林雪珍 賴艷娥 李尚烽

分析核酸檢驗與酶聯免疫檢測血液病毒的應用及檢驗準確率

虢娟 鄧凱航 林雪珍 賴艷娥 李尚烽

目的分析核酸檢驗與酶聯免疫檢測血液病毒的應用及檢驗準確率。方法25087份無償獻血者標本, 有24383份標本做完酶聯免疫檢測后又進行核酸檢驗。比較兩種檢驗準確率。結果24383份標本, 其中酶聯免疫檢測陽性130份, 準確率為0.53%, 核酸檢驗陽性32份, 準確率為0.13%, 兩種檢驗方法準確率對比差異具有統計學意義(P＜0.05)。結論通過核酸檢驗對血液病毒進行檢測具有較高的準確率和靈敏度, 能大大減少誤檢、漏檢的發生率, 值得在臨床推廣應用。

核酸檢驗；酶聯免疫檢測；血液病毒；檢驗準確率

輸血是艾滋病病毒(HIV)、乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)等疾病的重要傳播途徑之一, 在輸血之前對血液進行抗體檢測或抗原檢測, 是控制疾病傳染的有效方式［1］。目前, 我國《血站技術操作規程》(2015版)規定血液檢測HIV、HBV和HCV感染標志物應采用2次血清學檢測和1次核酸檢驗。本次研究分析核酸檢驗與酶聯免疫檢測血液病毒的應用及準確率, 取得了良好的成果。報告如下。

1 資料與方法

1. 1一般資料 選取本站2016年1～12月25087份無償獻血者標本, 對無償獻血者檢測24383份, 所有標本均經通過梅毒或轉氨酶檢測合格。每個標本根據每項試驗的技術要求,采用相應類型的真空采血管留取, 放置在2～8℃下進行保存。5 ml EDTA-K2抗凝管的標本應當在24 h內分離血漿, 通過酶聯免疫法進行檢測；5 ml無菌、無DNA酶、無RNA酶的EDTA-K2分離膠真空采血管, 應當在4 h內分離血漿, 進行核酸檢驗。

1. 2方法 對5 ml EDTA-K2抗凝管進行室溫離心, 分離血漿, 利用全自動加樣儀(Tecan EVO)自動加樣, 通過全自動酶聯免分析儀進行檢測, 記錄檢測結果。對5 ml的EDTAK2分離膠抗凝管標本進行20 min的離心, 現場保存溫度在2～8℃, 運輸2～10℃。當血液標本經過酶聯免疫檢測合格后, 放置在加樣儀樣品的條架上。WanTag核酸血液篩查系統檢測原理(6混樣)：采用特異性磁珠核酸純化技術, 提取HBV、HCV、HIV-1病毒的核酸；利用實時熒光定量探針法設計特異性引物及熒光探針, 并結合競爭性內標技術檢測人血清或血漿中的HBV、HCV、HIV-1病毒核酸。

1. 3統計學方法 采用SPSS12.0統計學軟件對數據進行統計分析。計數資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

24383份標本, 其中酶聯免疫檢測陽性130份, 準確率為0.53%, 核酸檢驗陽性32份, 準確率為0.13%, 兩種檢驗方法準確率對比差異具有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

表124383份標本兩種檢測方法結果對比(n, %)

3 討論

多數傳染病都可以通過血液進行傳播, 其中乙型肝炎、艾滋病是傳播能力較強的一類病癥, 會嚴重影響人們的身體健康, 降低生活質量［2］。因此, 對無償獻血者進行血液檢驗有著重要的意義, 是降低輸血可能存在的傳播性風險的必要手段。過去我國大多數血站只用2次酶聯免疫檢測方式進行檢測［3-5］。該檢測方式存在一定的缺陷, 檢出率較低, 常出現誤檢、漏檢的情況, 導致血液檢查有效率不高, 為血站的治療埋下了安全隱患。

血液病毒感染患者在臨床上大多無明顯癥狀, 短期內也不會發病, 同時部分患者的抗體濃度較低, 無法進行有效的檢測, 因此酶聯免疫檢測的適用性不強。若有誤檢、漏檢患者的血液進入到其他患者體內, 會直接導致血液污染, 甚至出現交叉感染的情況。血液病毒指的是HIV、HBV、HCV等,這些病毒會在人體中潛伏較長的時間, 有些患者甚至不知道已經被感染。一旦這些患者進行獻血, 會大大增加血液病毒的傳播性, 這也是目前血液病毒傳播的主要途徑之一［6-9］。酶聯免疫檢測主要是對患者血液的病毒抗原進行檢測, 若患者存在血液病毒, 分析儀在對樣本分析后, 波長會出現一定的變化, 一般臨床醫師會根據變化的具體數值, 對患者的情況進行判斷。但血液病毒會在人體中潛伏, 只有當潛伏到一定時間后再能被檢測, 這段時間也被稱作窗口期。對于窗口期的血液病毒, 該檢測方法無法進行有效的檢測, 例如HIV在人體內的潛伏時間格外長, 一旦出現誤檢、漏檢, 會嚴重影響到其他患者的生存質量, 為疾病的傳播埋下了隱患。另一方面, 酶聯免疫檢測還會受到氣溫的影響。HBV感染一般和季節、溫度有關, 冬季氣溫較低, 人體內部乙型肝炎表面抗原(HBsAg)活性較低, 表達能力較差, 因此在檢測時不能僅對HBsAg進行篩查, 需要給予一定的重視。

核酸檢驗采用病毒核酸擴增技術, 直接讓病毒擴增到陽性匯集孔, 對各類血液病毒的靈敏性均較高, 即使血液病毒存在于窗口期, 也能進行有效的檢測, 漏檢、誤檢率較低,陽性檢出率較高。隨著醫學技術的不斷發展, 核酸檢測在我國也有了廣泛的應用, 尤其是在血站血液檢測中, 優勢明顯。但從整體上來看, 我國核酸檢驗技術起步較晚, 技術水平和國外相比還有一定差距, 從臨床時間來看, 有必要將其作為血液篩查的主要手段, 重視其發展與應用［10］。

本次研究中, 分別通過核酸檢驗與酶聯免疫法進行檢測。結果顯示, 酶聯免疫法檢測準確率低于核酸檢驗, 差異有統計學意義(P＜0.05)。

綜上所述, 通過核酸檢驗對血液病毒進行檢測具有較高的準確率和靈敏度, 能大大減少誤檢、漏檢的發生率, 值得在臨床推廣應用。

［1］ 鐘萬芬, 唐小勇. HBsAg 和抗-HCV 酶聯免疫檢測與血液病毒核酸篩查技術之間的相關性分析.肝臟, 2015, 20(11):876-878.

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［9］李玉泉. 核酸檢測與酶聯免疫檢測血液病毒的比較分析. 中國衛生產業, 2016, 13(31):45-47.

［10］ 郭振秀, 李凌云. 采用核酸檢驗與酶聯免疫檢測血液病毒的應用及準確率對比分析. 世界最新醫學信息文摘(連續型電子期刊), 2016, 16(12):8-9.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.13.028

2017-04-06］

511518 清遠市中心血站