基于中西醫(yī)臨床病癥特點的短暫性腦缺血發(fā)作的動物模型分析

項麗玲　苗明三　王燦　張夢飛　方曉艷

[摘要]基于短暫性腦缺血發(fā)作的中醫(yī)、西醫(yī)臨床病癥特點，對目前現有的短暫性腦缺血發(fā)作模型進行總結歸納，通過整理分析短暫性腦缺血發(fā)作各個動物模型的優(yōu)缺點、中西醫(yī)診斷標準以及臨床癥狀吻合度，進一步提出相應動物模型的評價思路及改進方法。而且還發(fā)現短暫性腦缺血發(fā)作動物模型雖然造模方法比較多，但不能很好地反映該病的短暫性、可逆性、反復發(fā)作性等典型特征，與臨床病癥特點差異較大，且缺少對該動物模型造模成功與否的合理的量化標準。通過利用現有的單因素動物模型相結合，建立與臨床病癥相結合的、更接近人類短暫性腦缺血發(fā)作典型癥狀的復合動物模型，復制出能更加吻合臨床病癥特點的動物模型。建立合理的模型量化標準，體現其中西醫(yī)病因，完善一套系統(tǒng)完整的模型評價方法，是短暫性腦缺血發(fā)作動物模型未來的發(fā)展方向。

[關鍵詞]短暫性腦缺血發(fā)作； 臨床病癥； 動物模型

[Abstract]Based on the clinical symptom characteristics of transient ischemic attack in Chinese and Western medicines， the existing models of transient ischemic attack were summarized and analyzed Then the advantages and disadvantages of each model， the diagnostic criteria of traditional Chinese and Western medicine and clinical symptoms compliance were analyzed to put forward the evaluation method and improvement method of the corresponding animal models It was found that there were many modeling methods of transient ischemic attack， but they can not reflect the transience， reversibility， recurrence and other typical characteristics of the disease， with significant differences with clinical symptoms Moreover， there is lack of reasonable quantitative criteria for the success of the animal model By combining the existing single factor animal models， a composite animal model that was more closely related to the clinical symptoms of transient ischemic attack was established to replicate an animal model that was more compatible with the characteristics of clinical symptoms It is the future development directions of the transient ischemic attack animal models to establish reasonable quantitative standards， reflect the causes of Chinese and Western medicine symptoms and improving a series of systematic and complete model evaluation methods

[Key words]transient ischemic attack； clinical symptom； animal models

短暫性腦缺血發(fā)作（transient ischemic attack，TIA）是臨床常見的、可以控制的缺血性腦血管病，由顱內血管病變引起的一過性或短暫性、局灶性腦或視網膜功能障礙。一直以來有關TIA的定義不斷在變化，傳統(tǒng)TIA的定義是指短暫的、可逆的、局部的腦血液循環(huán)障礙，癥狀和體征在24 h內完全消失。2002年Albers等[1]提出新定義：臨床癥狀持續(xù)時間小于1 h，且無急性腦梗死證據。2009年修訂后的新的TIA定義為：腦、脊髓或視網膜局灶性缺血引起，未伴急性梗死的短暫性神經功能障礙[2]。TIA新診斷標準更強調神經影像學檢查，不再強調缺血癥狀的持續(xù)時間。具有敏感性高、特異性強，臨床價值大的特點，有利于臨床腦血管病的診斷及治療[3]。

1短暫性腦缺血發(fā)作的病因病機

11西醫(yī)病因病機目前有關TIA的病因、發(fā)病機制尚不清楚，主要有微栓子學說及血流動力學異常學說、腦血管痙攣學說、血液學異常學說、血管的機械梗阻等，TIA機制中最常見的主要是微栓子學說及血流動力學異常學說[4]。以上幾種機制往往同時起作用，血管痙攣可使血管狹窄，從而導致狹窄遠端的血流動力學變化，腦血流量下降，在病變血管的供血區(qū)，出現神經功能缺損的表現[5]。血液學的異常導致血液黏稠度增高，可以增加血流的阻力，其中微栓子堵塞血管及動脈血管壁病變導致血管狹窄或梗阻是最直接的機制，其結果是導致病變血管遠端血流量下降甚至血流中斷[6]。

12中醫(yī)病因病機中醫(yī)學認為TIA多是在內傷積損的基礎上，復因勞逸失度、情志不遂、飲食失節(jié)、或外邪侵襲等觸發(fā)，引起臟腑陰陽失調，內風旋動，夾痰夾風，橫竄經脈，從而反復出現短暫性或一過性的半身不遂、偏身麻木、言語謇澀，目偏不瞬等癥狀[7]，并最終導致中風病的發(fā)生。《素問·評熱病論》曰：“正氣存內，邪不可干，邪之所湊，其氣必虛。”此段意為氣虛、腎虛等正氣虧虛是中風病的主要病因病機。從古至今各醫(yī)家所對于短暫性腦缺血發(fā)作病理基礎的認識大體是以為本虛標實，肝腎虧虛、氣虛血少為致病之本，風、火、痰、氣、瘀為發(fā)病之標，兩者互為因果。

2短暫性腦缺血發(fā)作的臨床特點分析

21西醫(yī)診斷標準TIA核心癥狀主要包括：發(fā)病突然，無

預兆；患者腦部或視網膜出現局部缺血現象；發(fā)病持續(xù)時間一般不會超過24 h；發(fā)作后恢復完全，無任何的遺留癥狀；病情反復發(fā)作[89]。以下癥狀單獨出現不能診斷為TIA，2個以上同時出現或合并有上述①～⑥的癥狀時可認為是TIA。除以下常見癥狀外，頸內動脈系統(tǒng)及椎基底動脈系統(tǒng)TIA還可表現有精神、意識障礙、偏身投擲或偏身舞蹈樣動作等臨床表現[10]。以下參照《中華醫(yī)學會缺血性腦卒中和TIA中國診斷及治療指南2010》，見表1。

22中醫(yī)診斷標準中醫(yī)沒有短暫性腦缺血發(fā)作的病名，該病歸屬于中醫(yī)學“眩暈”、“中風先兆”、“頭痛”、“目眩”等病證范疇[11]，目前對該病的辨證分型及診斷標準研究甚少，多屬于屬定性判斷。肝腎陰虛為致病之本，風、火、痰、氣、瘀為致病之標。所有辯證分型是依據其中醫(yī)病機來分。TIA存在氣虛、氣滯、痰濁、血瘀、陰虛和火熱等證候要素，有單一證候要素、2個或3個、及3個以上證候要素組合類型[12]。中醫(yī)診斷標準參照國家中醫(yī)藥管理局中醫(yī)腦病急癥協作組《中風病中醫(yī)診斷與療效評定標準》。具體辨證分型見表2，結合證候臨床表現，擬定短暫性腦缺血發(fā)作診斷標準，見表3。

3短暫性腦缺血發(fā)作動物模型分析研究現狀

31模型動物的選擇常用于TIA模型的一般選用與人體結構、功能、代謝及疾病特征相似的動物，有大鼠、小鼠、沙土鼠、家兔、樹鼩、貓、狗、豬、獼猴、松鼠猴、短尾猿、狒狒、猩猩等[13]。其中大鼠、小鼠、沙土鼠應用最多，一般選擇雄性動物。目前大多數實驗室選擇嚙齒類動物作為研究對象，鼠的腦血管解剖接近人類，血管性損傷部位恒定，存活率高，重復性好，更經濟。常用品系Wistar大鼠，SpragueDawley大鼠，Fischer334等；沙土鼠缺乏后交通動脈及基底動脈環(huán)，兩側大腦供血相對獨立，阻斷一側或兩側頸總動脈即可復制效果明顯的同側或雙側腦缺血模型。

32造模方法及臨床吻合度現代TIA模型造模方法多采用有創(chuàng)性阻斷腦血流，造成全腦缺血或局灶性腦缺血，再回復灌注。目前現有的TIA動物模型復制方法比較少，基于上述學說研究已有的動物模型見表4。

33觀察指標TIA動物模型觀察的指標通常有以下幾類：第一，腦部平均血流灌注量：造模后由于腦部短暫性缺血，平均血流灌注量顯著下降。通過檢測缺血前后腦膜微循環(huán)平均灌注量，計算灌注量下降百分比。第二，血液流變學：TIA模型造模成功后，全血黏度、血漿黏度、血細胞比容、纖維蛋白原及血小板聚集率等指標有所升高。第三，生化指標：①炎癥因子：IL1β，TNFα，IL6，IL8，IL10，NO及NOS等；②神經營養(yǎng)因子：GDNF，BDNF等；③能量代謝：ATP；④細胞

4討論

在近年來的動物實驗當中，由于TIA典型的臨床病發(fā)特征大多都是短暫性的、可逆的、局部的腦血液循環(huán)障礙，反復發(fā)作的，這些都是腦梗死的前兆[19]。現有的TIA 動物模型造模方法多種多樣，無法準確揭示人類TIA的病因，病理生理及生化等方面的變化，仍與臨床中的多種類型的病癥存在著較大的差距。并不能很好地反映這些典型癥狀，只能單方面體現出TIA某一個類型的臨床病癥。短暫性全腦缺血模型是根據不同實驗動物的腦血管解剖生理學特點，反復短暫性夾閉相應腦動脈造成短暫性全腦缺血。但這種暫時缺血模型廣泛地影響各個腦區(qū)，并不是真正意義上的局灶性、短暫性和反復發(fā)作性的TIA模型。局灶性短暫性腦缺血模型與全腦缺血模型相比，局灶性腦缺血模型較為接近人TIA的發(fā)病情況。由于MCA是人類TIA高頻病發(fā)部位，因此阻斷MCA造成的腦缺血模型被認為是一種理想的腦缺血動物模型。其中開顱法與人類缺血性卒中的病理學改變較為接近，但開顱手術創(chuàng)傷較大，難以制作較長時間的反復TIA模型，雖然在理論上可用此方法制作TIA模型，但目前幾乎不用開顱法制作TIA模型。過氧化物誘導法具有非侵入性、易重復，更接近于人類缺血性卒中的病理生理學改變，對研究腦缺血的病因和病理學改變之間的聯系具有重大意義。

線栓法已在研究領域中得到廣泛應用，是目前最好的一種無需開顱即可觀察再灌注損傷的急、慢性局灶性腦缺血模型，在一定程度上能夠體現出臨床癥狀變化，但手術技術要求極高，且該模型實質上是一種栓塞性卒中，與人類常見的血栓形成性卒中仍存在差異。以上所述的各類型的模型均存在一定的優(yōu)勢和一定的局限性。

在研究TIA動物實驗時，應選擇比較符合臨床病癥的模型，并制定出一套完整的評價體系，這樣才能盡可能地利用動物模型判定某些治療方法和藥物的效應。理想的TIA模型應該具有無創(chuàng)性、局灶性、短暫性神經功能障礙癥狀反復發(fā)作等特點，并且應該可靠、簡便和可控，與人TIA相似。在今后的TIA模型造模方法中，應注意外觀指標和病理、生化指標的結合。TIA動物模型多采用單一因素造模為主，而人體疾病是在內外環(huán)境、飲食、情志等諸因素作用下，發(fā)生病理改變而出現的以某一臟腑組織病變?yōu)橹鞯木C合證候群，因此可以利用現有的單因素的動物模型相結合，結合臨床病癥，建立與臨床病癥相結合的更能反應人類TIA各種癥狀的復合動物模型，進而建立與動物模型相適應的評價指標體系，以及建立合理的量化標準。今后的TIA模型造模方法也可以向中醫(yī)領域進行擴展，開發(fā)出符合臨床各種證候特點的某一證型模型，如血瘀合并短暫性腦缺血模型，此模型是在中醫(yī)理論基礎上創(chuàng)建與臨床復合病癥有高吻合度的優(yōu)勢，充分認清TIA的中醫(yī)“血瘀證”病因病機并利用現代醫(yī)學方法創(chuàng)新復合模型。

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[責任編輯張寧寧]