潰瘍性結腸炎患者體內新型IL因子表達研究

吳炳卓+劉杰鋒+黃麗嫦

[摘要] 目的 探討潰瘍性結腸炎（UC）患者體內新型IL因子表達。 方法 選取2014年1月～2016年12月收治的潰瘍性結腸炎患者50例作為觀察組，另選擇我院同期健康體檢者50例作為對照組，測定兩組體內外周血清中白細胞介素-17（IL-17）、白細胞介素-21（IL-21）、白細胞介素-22（IL-22）、白細胞介素-23（IL-23）等主要炎性因子含量及不同程度的UC患者體內IL因子的表達，并進行統計學分析。 結果 觀察組患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子均明顯高于健康對照組，且差異有統計學意義（P<0.05）；重度UC患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子均明顯高于輕中度UC患者，且差異有統計學意義（P<0.05）；50例潰瘍性結腸炎治療后外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子表達水平明顯低于治療前，且差異有統計學意義（P<0.05）。 結論 UC患者外周血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平明顯升高，與疾病活動度密切相關，可預測UC發展或評估治療效果。

[關鍵詞] 潰瘍性結腸炎；炎性因子；IL-17；IL-21；IL-22；IL-23；表達；影響

[中圖分類號] R574.62 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2017）13-223-03

[Abstract] Objective To investigate the expression of IL-1 in patients with ulcerative colitis（UC）. Methods 50 patients with ulcerative colitis admitted from January 2014 to December 2016 were selected as the observation group.50 patients in the same period were selected as the control group.The levels of interleukin-17（IL-17），interleukin-21（IL-21），interleukin-2（IL-22），interleukin-23（IL-23）and other major inflammatory factors，the expression of IL factor in patients was analyzed and analyzed statistically. Results The levels of IL-17，IL-21，IL-22 and IL-23 in the serum of the observation group were significantly higher than those of the healthy control group （P<0.05）.The levels of IL-17，IL-21，IL-22 and IL-23 in serum of patients with UC were significantly higher than those of mild to moderate UC patients，and the difference was statistically significant（P<0.05）.The expression of IL-17，IL-21，IL-22 and IL-23 in peripheral blood of patients with ulcerative colitis was significantly lower than that before treatment，and the difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion The levels of IL-17，IL-21，IL-22 and IL-23 in peripheral blood of patients with UC are significantly higher than those of UC，which can predict the development of UC or evaluate the therapeutic effect.

[Key words] Ulcerative colitis；Inflammatory factors；IL-17；IL-21；IL-22；IL-23；Expression；Influence

潰瘍性結腸炎（ulcemtive colitis，UC）病變部位多在直腸和乙狀結腸，有時也可以延伸至降結腸甚至遍及整個結腸，但病變僅局限于結腸粘膜和黏膜下層，具有原因不明、反復發作而且病程較長的特點。目前UC發病機制尚未明確.可能與感染、遺傳和免疫等方面有關，其中炎癥介質可能引發一系列免疫反應。本研究分別檢測50例UC患者與50例健康者體內致炎細胞因子的表達，及不同程度的UC患者體內IL因子的表達，并進行分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究選取我院2014年1月～2016年12月收治的50例潰瘍性結腸炎患者，其中男28例，女22例；年齡21～69歲，平均（32.2±6.7）歲；病程2個月～10年，平均（4.1±2.8）年；輕度潰瘍性結腸炎28例，中度潰瘍性結腸炎22例；病變僅局限于直腸11例，病變累及直腸和乙狀結腸20例，病變累及整個結腸19例。納入標準：（1）經組織病理學檢查均符合潰瘍性結腸炎的相關診斷標準，均經消化道鋇餐、電子胃鏡及結腸鏡、病理檢查等確診為潰瘍性結腸炎；（2）停用一切影響UC的藥物≥1周（包括激素、SASP、中藥等）；（3）輕、中型UC，初發型、慢性復發型及慢性持續型；（4）處活動期，即疾病活動指數（DAI）≥3（采用改良型Mayo評分評價潰瘍性結腸炎活動指數）。排除標準：（1）有嚴重心、肝、腎等重要臟器和血液、內分泌系統疾病；（2）有活動性胃、十二指腸潰瘍；（3）消化道腫瘤；（4）有腸道切除手術；（5）孕婦、哺乳期婦女；（6）有水楊酸制劑及磺胺類藥物過敏或過敏體質；（7）精神病。另選擇我院同期健康體檢者50例作為對照組，其中男60例，女40例；年齡22～68歲，平均（33.8±6.5）歲；兩組患者的年齡、性別等一般資料比較無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 治療方法

患者給予柳氮磺吡啶（上海三維制藥有限公司，H31020450）治療，4次/d，1g/次，餐后口服，連續服用4周，4周后改為2g/d，再繼續服用4周。在服藥觀察期間內應禁止服用糖皮質激素、抗生素、免疫抑制劑以及非甾體抗炎藥等。而且1d之內的用藥間隔不宜超過8h，以免引起消化道不耐受等現象。

1.3 實驗方法

采用夾心酶聯免疫吸附法定量檢測血液炎性指標：參照Butzner等的CMDI、Dieleman評分標準進行結腸黏膜組織學損傷評分。RT-PCR法測定腸黏膜組織IL-17mRNA、IL-21mRNA、IL-22mRNA和IL-23mRNA水平：Western blot測定腸黏膜組織IL-17、IL-21、IL-22和IL-23蛋白表達水平：觀察組所有患者均行潰瘍性結腸炎疾病活動指數評估，見表1。

1.4 觀察指標

觀察兩組患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子，并對50例UC患者治療前后及不同程度的UC患者體內IL因子的表達進行分析。采血（采血前禁食24h），靜置2h后，3000r/min離心10min，取上清，置于-20℃冰箱保存備用。IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子含量測定，嚴格按ELISA試劑盒說明操作。

1.5 統計學處理

將兩組患者臨床療效、炎癥因子水平變化和不良反應發生情況導人到數學分析軟件SPSSl2.0中進行統計學分析處理，計量資料以（）表示，采用t檢驗，計數資料以百分比表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 潰瘍性結腸炎與健康人新型IL因子表達水平比較

觀察組患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子均明顯高于健康對照組，且差異有統計學意義（P<0.05），見表2。

2.2 不同程度UC患者外周血清IL因子表達水平比較

重度、中度UC患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子均明顯高于輕度UC患者，且差異有統計學意義（P<0.05）；重度UC患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子均明顯高于中度UC患者，且差異有統計學意義（t=35.38，7.64，33.28，23.19，P<0.05），見表3。

2.3 50例潰瘍性結腸炎治療前后外周血清IL因子表達水平比較

50例潰瘍性結腸炎治療后外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子表達水平明顯低于治療前，且差異有統計學意義（P<0.05），見表4。

3 討論

潰瘍性結腸炎是一種臨床常見疾病，病情發作反復，治療后復發情況頻繁[4]。目前對于其發病機制尚未明確.可能與感染、遺傳和免疫等方面有關，其中炎癥介質可能引發一系列免疫反應[5]。白細胞介素是細胞中最常見的炎癥介質，在免疫過程中起著至關重要的作用[6]。本研究中發現觀察組患者血清炎性因子均明顯高于健康對照組，且差異有統計學意義（P<0.05）；重度UC患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子均明顯高于輕中度UC患者，且差異有統計學意義（P<0.05）；50例潰瘍性結腸炎治療后外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子表達水平明顯低于治療前，且差異有統計學意義（P<0.05）。IL-17主要由T細胞產生，屬于抗炎因子在體液免疫中起著重要作用：IL-21由活化的CD4+T細胞分泌，參與調節B細胞增殖，協同IL-15促進骨髓前體細胞增殖和NK細胞增殖、分化和細胞毒活性[7]。IL-22是一個相對發現較晚的細胞因子，目前已被發現能誘導人角質形成細胞和成纖維樣滑膜細胞（FLS）的增殖，從而導致自身免疫性疾病[8-12]。IL-23是IL-12細胞因子家族中新的一員，主要由活化的巨噬細胞及樹突狀細胞產生。由于IL-23在感染、炎癥、自身免疫性疾病及腫瘤免疫中發揮重要的作用[13]。IL-8由巨噬細胞和單核細胞產生，屬于促炎因子，在細胞免疫中發揮作用。細胞中促炎因子和抗炎因子的平衡相當重要，他們之間的平衡調節對于潰瘍性結腸炎的發作具有一定影響[14-16]。目前對于潰瘍性結腸炎臨床上一般采用氨基水楊酸類藥物治療，其緩解作用顯著，但是存在太多的不良反應。因此為潰瘍性結腸炎患者提供一種新的治療方案是目前臨床上探討的主要問題。前期研究發現具有清熱瀉火及收斂活血的中藥能有效促進潰瘍愈合，對于潰瘍性結腸炎的療效顯著。柳氮磺胺吡啶在腸微生物作用下，其分解為5-氨基水楊酸和磺胺吡啶。5-氨基水楊酸有抗炎和免疫抑制作用，抑制急性發作，并延長緩解期，從而起到治療的目的。

[參考文獻]

[1] 康靜靜，姚華偉，梁宏德，等.細胞因子在炎癥性腸病中的作用[J].中國細胞生物學學報，2011，33（2）：204-209.

[2] 張曉杰，王瑩.兒童潰瘍性結腸炎血清 IL-1、IL-6、IL-10 及TNF-α水平變化[J].中國婦幼保健，2015，30（20）：3413-3415.

[3] 童霞，駱成俊，許曉梅，等.美沙拉嗪聯合雙歧三聯活菌對潰瘍性結腸炎患者TNF-α、IL-8及IL-10水平的影響[J].現代生物醫學進展，2015，15（23）：4534-4536.

[4] 易蕊，常娟，劉曉艷，等.TNF-α、IL-6及IL-8在不同程度潰瘍性結腸炎患者血清中的表達及意義[J].現代生物醫學進展，2015，15（14）：2641-2644.

[5] 王巖，楊立，劉威羽.益生菌對活動期潰瘍性結腸炎大鼠結腸黏膜組織及IFN-γ、IL-12 表達的影響[J].貴陽醫學院學報，2015，40（11）：1190-1193.

[6] 唐巧珍，劉玉蘭.潰瘍性結腸炎和腸易激綜合征結腸黏膜HBD-2、NF-kB、IL-6和IL-23的表達[J].中國現代醫生，2013，51（22）：42-44.

[7] 馮錦山，王士群，陳平湖，等.潰瘍性結腸炎患者血清IL-10、IL-13和IL-17水平與濕熱證關系研究[J].時珍國醫國藥，2013，24（5）：1261-1262.

[8] 王海弘.潰瘍性結腸炎患者血清IL-23、C-反應蛋白含量及臨床意義[J].湖北民族學院學報（醫學版），2013，30（3）：20-22.

[9] 譚海成.IL-23對潰瘍性結腸炎患者外周血單個核細胞分泌IL-17、IFN-γ的影響及意義[J].成都醫學院學報，2013，8（4）：455-457.

[10] 徐毅暉，楊元生，陳墾，等.IL-21/STAT3通路在潰瘍性結腸炎小鼠發病中的表達及其意義[J].國際醫藥衛生導報，2012，18（22）：3235-3238.

[11] 王萬卷，陳麗，王曉鵬，等.尋常型銀屑病皮損中腫瘤壞死因子-a、基質金屬蛋白酶-9及其抑制劑-I的表達[J].西安交通大學學報（醫學版），2007，28（3）：322-324.

[12] Melgar S，Yeung MM，Bas A，et a1Over-expression of intedeukin 10 in InUcosal T cells of patients with active ulcerative colitis[J].Clin Exp immunol，2003，134：127-137.

[13] 龐艷華，鄭長青，王鐵淳，等.IL-4和IL-13在潰瘍性結腸炎中的表達陰[J].胃腸病學和肝病學雜志，2005，14（4）：410-412.

[14] 王覓柱，鄔彩虹，陳吉.潰瘍性結腸炎患者血清IL-13、TNF-a和IL-10的表達及其意義[J].國際消化病雜志，2009，29（5）：362-364.

[15] Leach ST，Messina I，Lemberg DA，et a1.Local and systemic Interleukin-18 and interleukin-18-binding protein in children with inflammatory bowel disease[J].Inflamm Bowel Dis，2008，14：68-74.

[16] 于燕林.潰瘍性結腸炎患者血清TNF-a和IL-10的臨床觀察[J].中國當代醫藥.2010，17（24）：79-80.

（收稿日期：2017-05-25）