荷葉提取物降脂機理的研究

程澤華+高鵬程+甄鵬晨

近年來，由高脂造成的多種疾病困擾很多人，人們開始尋求可以緩解高脂膳食。荷葉出現在很多具有減肥降脂功能的中藥單復方制劑中，藥食同源，那么荷葉能否降脂呢？

材料與方法

試驗原料及處理。荷葉原料，粉碎機粉碎，過80目篩子。

實驗方法。

（1）膽酸鹽標準曲線

配制0.3 mmol/L的膽酸鈉、牛磺膽酸鈉和甘氨膽酸鈉溶液，做母液備用，取上述各溶液 0、0.1、0.5、1.0、1.5 、2.0和2.5 mL 到 10 mL 的容量瓶中，加入磷酸緩沖溶液至2.5 mL，再加入60%的硫酸溶液至10 mL，在水浴鍋中水浴 20 min后冰浴 5 min，在 387 nm 處測定吸光度。以膽酸鹽的濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標，繪制膽酸鹽的標準曲線。

（2）荷葉中的黃酮、生物堿與膽酸鹽結合能力的比較

①體外模擬內環境及與膽酸鹽的結合的方法

取一定量的樣品，加入1 mL 0.01 mol/L的鹽酸溶液，在培養箱中消化1h，用氫氧化鈉溶液調節pH到6.3，然后加入 4 mL 10 mg/mL的胰酶，在培養箱中消化 1h。在各個樣品中分別加入4 mL 膽酸鹽溶液，用培養箱振蕩1h。轉入離心管中，離心20 min。取上清液膽酸鹽進行分析。

②PVPP去除荷葉黃酮后與膽酸鹽的結合能力

分別稱取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 g的PVPP，加入20 mL 荷葉浸提液，培養箱中振蕩 30 min，轉入離心管中，離心 20 min。取上清液進行體外內環境模擬與膽酸鹽的結合。

③石油醚去除荷葉生物堿后與膽酸鹽的結合能力

在荷葉浸提液中加入等量的石油醚，萃取1 h，收集萃取后的荷葉浸提液，重復三次得到一次、兩次和三次處理液。取 1 mL上述處理液進行模擬與膽酸鹽的結合。

結果與分析

三種膽酸鹽的標準曲線回歸方程

膽酸鈉：y=11.80x+0.004 R2=0.998

牛磺膽酸鈉：y=17.66x+0.007 R2=0.997

甘氨膽酸鈉：y=15.62x+0.012 R2=0.997

荷葉中黃酮及生物堿與膽酸鹽結合能力比較的結果與分析。

（1）荷葉粉末、荷葉水浸提液與膽酸鹽的結合能力比較

荷葉粉末和荷葉水浸提液均能結合三種膽酸鈉，但是荷葉水浸提液的結合能力強，荷葉具有一定降脂作用。

（2）PPVP去除荷葉黃酮后與膽酸鹽結合能力的影響

荷葉浸提液中黃酮含量越高，其結合膽酸鹽的能力越強，黃酮會影響膽酸鹽在體內的代謝，從而起到降脂的作用。

（3）石油醚去除荷葉生物堿后與膽酸鹽的結合能力

荷葉堿對荷葉浸提液結合膽酸鹽的能力具有一定的良性影響，但是沒有黃酮顯著。

荷葉提取物對脂肪酸合酶抑制率的研究。

（1）脂肪酶活性的測定

加入荷葉提取物的樣品耗堿量明顯減少，這證明了荷葉提取物對于脂肪酸合酶的活性是具備抑制作用的。

（2）荷葉黃酮與荷葉堿對脂肪酸合酶活性的影響

①PPVP去除荷葉黃酮后對脂肪酸合酶活性的影響

氫氧化鈉的消耗量隨著荷葉黃酮的量減少而增加，荷葉黃酮抑制脂肪酸合酶的活性，荷葉黃酮的量越多，對脂肪酸合酶活性的抑制能力越強。

②石油醚去除荷葉堿后對脂肪酸合酶活性的影響

經過石油醚萃取的樣品的耗堿量低，可得荷葉生物堿影響脂肪酸合酶的活性。

研究表明荷葉黃酮是荷葉提取物具備降脂作用的主要因素，其機理為加強人體結合膽酸鹽的能力和抑制FAS的活性，荷葉生物堿對荷葉提取物的降脂作用也具備影響，但影響并不顯著。