貽貝粘蛋白纖維素敷料用于慢性潰瘍臨床觀察

殷雨林，鄧建華，王小磊

（江陰貝瑞森生化技術有限公司，江蘇 江陰 214437）

貽貝粘蛋白纖維素敷料用于慢性潰瘍臨床觀察

殷雨林，鄧建華，王小磊

（江陰貝瑞森生化技術有限公司，江蘇 江陰 214437）

貽貝粘蛋白纖維素敷料是貽貝粘蛋白與纖維素通過共價交聯形成的一種新型敷料，可用于促進創面的愈合。通過30例慢性難愈性創面或潰瘍患者試用，貽貝粘蛋白纖維素敷料能有效促進潰瘍、慢性難愈性創面的愈合，并且安全性好。

貽貝粘蛋白纖維素敷料創面愈合

0 引言

纖維素是一種天然的生物高聚物，由β-D-吡喃葡萄糖通過β-1，4-糖苷鍵連接而成的一種無分支的大分子直鏈聚合物[1]，具有生物活性、生物可降解性、生物適應性，具有高結晶度、高純度、高持水性、超細納米纖維網絡、高抗張強度和彈性模量等許多獨特的物理、化學和機械性能[2-3]。此外納米纖維素持水性高，其內部有很多“孔道”，有良好的透氣、透水性能，能吸收60-700倍于其干重的水分[4]。基于上述纖維素的優異性能，其在生物醫用材料領域具有廣泛的應用前景。但是，纖維素本身沒有抗菌活性，不能防止傷口的感染，對傷口愈合的促進效果不夠理想。因此，賦予纖維素原料較強抗菌性能和促愈性能對其在生物醫用材料領域的應用至關重要。

貽貝粘蛋白是一種大分子蛋白質，分子中含有大量的正電荷，可吸引帶負電細胞的爬行和生長，并且正電荷具有抑菌的屬性[5-6]。將貽貝粘蛋白與纖維素結合形成新型的醫用產品，既可發揮纖維素的優勢，又可使新型敷料具有抑菌和促進創面愈合的作用。因此研制了貽貝粘蛋白纖維素敷料，并經臨床觀察有很好的促愈合效果，現報告如下。

1 貽貝粘蛋白纖維素敷料制備

取20克卡波姆凝膠在80℃熱水中充分溶脹30分鐘形成凝膠基質，邊攪拌邊向其中加入細菌纖維素纖維40g，持續攪拌4小時后室溫放置自然冷卻。攪拌條件下向其中加入3.0mg/ml貽貝粘蛋白10ml，持續攪拌30分鐘至混合均勻，得到貽貝粘蛋白纖維素敷料。

2 貽貝粘蛋白纖維素敷料質量控制

（1）性狀貽貝粘蛋白纖維素為凝膠狀液體，透明、無雜質。

（2）蛋白含量檢測采用考馬斯亮藍法檢測貽貝粘蛋白含量在0.2-0.4mg/mL之間。

（3）穩定性本品室溫6個月及45℃放置3個月觀察性狀，檢測蛋白含量均符合性狀及蛋白含量規定。

3 貽貝粘蛋白纖維素敷料臨床療效觀察

3.1 病例選擇

選擇慢性難愈性創面或潰瘍患者30人，年齡18-65歲，性別不限，受試者創面總面積小于20%總體表面積（TBSA），應用試驗或對照產品的創面面積小于2%TBSA。隨機將患者分成對照組或試驗組，每組各15人。隔天換藥一次，觀察21天后創面的愈合情況。

3.2 治療方法

隨機將患者分成對照組或試驗組，每組各15人。清潔創面后用生理鹽水將清創藥物沖洗2-3遍后將貽貝粘蛋白纖維素敷料或對照產品均勻噴于創面處，先上覆凡士林油紗，后上覆干燥無菌紗布，以膠帶或繃帶固定。隔天換藥一次，觀察21天后創面的愈合情況。

3.3 療效評價標準

以治療21天時創面愈合情況作為主要評價指標評價產品性能。創面愈合標準為創面無滲出，基底完全被新生上皮所覆蓋。

按下列公式計算:創面愈合率（%） =1?測定日創面面積與受傷日創面面積的百分比。

3.4 安全性評價

在治療前和治療第21d，進行血常規（白細胞、中性粒細胞百分比、淋巴細胞百分比、紅細胞、血紅蛋白、血小板），尿常規（紅細胞、白細胞、蛋白質），肝功能（總膽紅素、直接膽紅素、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、白蛋白），腎功能（尿素氮、肌酐）檢測。應分別描述試驗組和對照組各項實驗室指標試驗前正常，試驗后異常（異常有臨床意義、異常無臨床意義）的例數及占各組例數的百分比。

記錄試驗中所發生的不良事件，并判斷是否與試驗產品相關，同時計算不良事件發生率，不良事件發生率計算公式如下：

不良事件發生率=（不良事件發生的次數）/（試驗例數）×100%

研究中試驗組和對照組各出現一例入組時各項檢查均正常，試驗后檢測參數異常情況，經研究者判定與使用產品無關。

3.5 治療效果對比

試驗組和對照組的各15例受試者中平均年齡分別為46.20和48.39，平均體重分別為70.61和69.30公斤，平均身高分別為170.22和170.60cm，試驗組和對照組均為男性13例，女性2例。從基線數據可以看出，兩個受試組人員基礎數據較均衡。

貽貝粘蛋白纖維素敷料和對照產品治療深度、慢性難愈性創面效果見表1:受試者基線受傷日創面面積，試驗組為9.88±6.26(%)，對照組為9.84±6.34(%)，在檢驗水準α為0.05的情況下，對兩組基線受傷日創面面積進行比較，差異無統計學意義（P=0.2360），故可以認為試驗組在基線受傷日創面面積上與對照組無統計學差異。

受試者基線試驗觀察創面面積，試驗組為1.98±0.28(%)，對照組為1.82±0.27(%)，在檢驗水準α為0.05的情況下，對兩組基線試驗觀察創面面積進行比較，差異無統計學意義（P=0.0920），故可以認為試驗組在基線試驗觀察創面面積上與對照組無統計學差異。

使用后21天創面愈合率試驗組為89.05±5.43(%)，對照組為86.67±8.66(%)，在檢驗水準α為0.05的情況下，對兩組使用后指定時間創面愈合率進行比較，差異有統計學意義（P=0.0280），可認為試驗組在使用后指定時間創面愈合率上與對照組存在差異。

表1 貽貝粘蛋白纖維素敷料與對照產品治療效果對比

4 討論

難愈性創面或潰瘍是由一系列創傷和疾病所致，與創傷部位和宿主有關的創面，在期望的時間內不能正常愈合，一般將持續一個月不愈合創面定義為慢性創面。主要包括創傷性潰瘍、下肢靜脈性潰瘍、壓迫性潰瘍以及糖尿病潰瘍等。慢性創面中，成纖維細胞、表皮細胞、血管內皮細胞等組織修復細胞會出現核固縮與核染色質邊緣化等典型表現。成纖維細胞是肌體修復的主要細胞，它的增殖障礙將使細胞外基質特別是膠原的合成發生障礙，其結果是創面愈合延遲。

以纖維素作為生物高聚物增強相，具有其他增強相無可比擬的特點，是制備復合凝膠的優良選擇材料。將纖維素用于納米復合凝膠符合可持續發展觀點，同時也與纖維素資源高值化利用的發展趨勢相符。

貽貝粘蛋白是貽貝足絲中分泌的一種蛋白質，貽貝依靠它粘附于各類物體的表面，形成抗水的結合，耐受風浪的沖擊[7]。貽貝粘蛋白是堿性蛋白質，等電點pI 9.5，在生理酸堿度pH 7.4下帶有很高載量的正電荷[8-9]。人體細胞，如：表皮原代細胞、成纖維細胞、血管內皮細胞、神經細胞等帶負電。貽貝粘蛋白通過靜電相互作用，吸引各種細胞的貼壁和爬行替代，從而促進燒傷創面的愈合。具有生物相容性好、無細胞毒性、無免疫原性、無化學刺激、透氣等特點[10]。貽貝粘蛋白在愈合過程中呈現了一種微觀生物支架的作用——貽貝粘蛋白通過靜電相互作用、疏水相互作用、DOPA（多巴）氧化交聯等三種作用力與細胞和組織緊密結合，形成微觀的納米級生物支架，通過靜電相互作用吸引細胞向生物支架貼壁和爬行替代，促進創面的愈合[11-12]。貽貝粘蛋白納米纖維素敷料不僅解決納米纖維素的抗菌性、創傷快速愈合的問題，同時克服現有貽貝粘蛋白產品存在的引流、吸濕效果差的問題。將用于燒傷、陳舊性創口、慢性潰瘍、術后創口恢復等臨床過程中，加速創面難愈合，不易產生疤痕。

隨著對難愈創面發生機制和創面愈合過程的深入了解，以及各種有效的生長因子投送技術、醫用新材料和創面治療新技術如負壓創面治療技術的應用和成熟，針對性治療有望變為現實。

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The Clinical Observation of Mussel Adhesive Protein Cellulose Dressing for Chronic Ulcer

YIN Yu-lin, DENG Jian-hua, WANG Xiao-lei

(Jiangyin USUN Biochemical Technology Co.,Ltd, Jiangsu Jiangyin,214437,China)

Mussel adhesive protein cellulose dressing is a new type of dressing, which is formed through MAP and cellulose covalent cross-linking and can be used to promote wound healing. Through the trial in total of 30 patients with chronic painless wound or ulcer, mussel adhesive protein cellulose dressing can effectively and safely promote the healing of ulcer and chronic painless wound.

Mussel adhesive protein; Cellulose dressing; Woundhealing

10.19335/j.cnki.2096-1219.2017.08.37