洋蟲(chóng)改善肺癌荷瘤小鼠體內(nèi)炎性微環(huán)境的研究

王海龍，陳立軍，劉名龍，胡香萍，梁 晶，于津生， 竇新立

（天津市濱海新區(qū)大港醫(yī)院腫瘤科，天津 300270）

洋蟲(chóng)改善肺癌荷瘤小鼠體內(nèi)炎性微環(huán)境的研究

王海龍，陳立軍，劉名龍，胡香萍，梁 晶，于津生， 竇新立

（天津市濱海新區(qū)大港醫(yī)院腫瘤科，天津 300270）

目的 探討洋蟲(chóng)對(duì)肺癌荷瘤小鼠體內(nèi)炎性微環(huán)境中IL-6、IL-8和TNF-α的調(diào)控情況。方法 選用LLC小黑鼠60只，隨機(jī)分成5組：正常組、腫瘤組、治療1組、治療2組、預(yù)防組，每組12只。正常組不做處理，正常喂養(yǎng)，共14 d；腫瘤組：?jiǎn)渭兘臃NLewis肺癌，正常喂養(yǎng)，共14 d；治療1組：接種Lewis肺癌細(xì)胞后，待腫瘤大小長(zhǎng)到0.5～1.0 cm后給予常規(guī)處理的洋蟲(chóng)（45 mg/kg），共14 d；治療2組：接種Lewis肺癌細(xì)胞后，待腫瘤大小長(zhǎng)到0.5～1.0 cm后給予真空冷凍干燥法處理的洋蟲(chóng)（45 mg/kg），共14 d；預(yù)防組：接種Lewis肺癌細(xì)胞當(dāng)天給予常規(guī)處理的洋蟲(chóng)（45 mg/kg），接種腫瘤后繼續(xù)洋蟲(chóng)喂養(yǎng)至處死，共14 d。接種腫瘤后第7、14天各組各處死6只C57小鼠，取其血清，ELISA法檢測(cè)IL-6、IL-8和TNF-α。結(jié)果 腫瘤組的腫瘤相關(guān)炎性因子IL-6、IL-8和TNF-α明顯高于正常組，治療后的腫瘤相關(guān)炎性因子IL-6、IL-8和TNF-α明顯低于治療前（P＜0.05），治療1組和治療2組的腫瘤相關(guān)炎性因子表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 肺癌荷瘤小鼠體內(nèi)促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)的炎性因子明顯升高，中藥洋蟲(chóng)可以降低肺癌荷瘤小鼠體內(nèi)炎性因子的表達(dá)。

洋蟲(chóng)；肺癌；微環(huán)境；炎性因子

洋蟲(chóng)（martianus dermestoides chevrolat）為擬步蟲(chóng)科昆蟲(chóng)。近年的研究[1-2]發(fā)現(xiàn)洋蟲(chóng)具有抗炎、提高機(jī)體免疫功能和抗癌的作用。肺癌是一種與炎癥密切相關(guān)的惡性腫瘤。炎癥與癌癥的關(guān)系已經(jīng)明確，且被稱(chēng)為“癌癥的第七大特征”，炎癥微環(huán)境與腫瘤進(jìn)展及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。本文通過(guò)動(dòng)物模型來(lái)研究中藥洋蟲(chóng)對(duì)肺癌荷瘤小鼠機(jī)體微環(huán)境中炎性因子的調(diào)節(jié)作用。報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 雄性C57小黑鼠60只，體質(zhì)量（16±2）g，4～6周齡，購(gòu)自中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，許可證號(hào)SCXK-（軍）2007-004。LLC小鼠肺癌細(xì)胞系（Lewis細(xì)胞系）購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞資源中心。

1.2 方法 將LLC小鼠肺癌細(xì)胞系接種于C57小鼠，建立皮下移植瘤模型。待腫瘤直徑達(dá)到0.5～1 cm后，隨機(jī)分成5組：正常組、腫瘤組、治療1組、治療2組、預(yù)防組，每組12只。正常組不做處理，正常喂養(yǎng)，共14 d；腫瘤組：?jiǎn)渭兘臃NLewis肺癌，正常喂養(yǎng)，共14 d；治療1組：接種Lewis肺癌細(xì)胞后，待腫瘤大小長(zhǎng)到0.5～1.0 cm后給予常規(guī)處理的洋蟲(chóng)（45 mg/kg），共14 d；治療2組：接種Lewis肺癌細(xì)胞后，待腫瘤大小長(zhǎng)到0.5～1.0 cm后給予真空冷凍干燥法處理的洋蟲(chóng)（45 mg/kg），共14 d；預(yù)防組：接種Lewis肺癌細(xì)胞當(dāng)天給予常規(guī)處理的洋蟲(chóng)（45 mg/kg），接種后繼續(xù)洋蟲(chóng)喂養(yǎng)至處死，共14 d。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo) 接種腫瘤后第7、14天各組各處死6只C57小鼠，取其血清，ELISA法檢測(cè)IL-6、IL-8 、TNF-a。

2 結(jié)果

治療前后各組炎性因子變化比較 ,見(jiàn)表1。

3 討論

洋蟲(chóng)又名九龍蟲(chóng)，辛、甘，溫，歸肺、胃、大腸經(jīng)，具有溫中理氣、活血止痛、祛風(fēng)除濕等功效，有文獻(xiàn)將其歸類(lèi)于活血祛瘀藥。《本草綱目拾遺》卷十蟲(chóng)部記載洋蟲(chóng)功效為：“行血分，暖胃脾，和五臟，健筋骨，去濕搜風(fēng)，壯陽(yáng)道，治怯弱。” 《藥性考》上記載洋蟲(chóng)：“活吞數(shù)枚，止血，(治)勞怯” 。

隨著基礎(chǔ)研究的深入，洋蟲(chóng)的藥用價(jià)值主要有：1）增強(qiáng)機(jī)體免疫功能和抗炎作用。洋蟲(chóng)醚提取物可以顯著恢復(fù)環(huán)磷酰胺對(duì)小鼠血清溶血素生成的抑制作用；洋蟲(chóng)醚提取物可提高正常小鼠的遲發(fā)性超敏反應(yīng)；洋蟲(chóng)的醚提液腹腔注射能明顯抑制巴豆油引起的小白鼠耳廓炎癥（P＜0.01），而且劑量越高效果越好[3-5]。2）抗癌作用。洋蟲(chóng)可拮抗環(huán)磷酰胺對(duì)小鼠造血器官和免疫器官的損傷作用，并對(duì)環(huán)磷酰胺的治療效果有一定的減毒增效作用[6]；洋蟲(chóng)提取液能清除致癌物質(zhì)亞硝酸鈉、阻斷體外二甲基亞硝胺合成和明顯降低血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量[7]。3）抗衰老作用。洋蟲(chóng)能明顯防止肝細(xì)胞中丙二醛含量的升高和超氧化物歧化酶活性的降低[8]。同時(shí)也有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[9]表明洋蟲(chóng)可以延緩雌性大鼠生殖系統(tǒng)等衰老，提高卵巢指數(shù)和子宮指數(shù)，增加卵巢中初級(jí)卵泡、次級(jí)卵泡、成熟卵泡數(shù)量。4）改善血液循環(huán)，洋蟲(chóng)水提液能顯著降低大鼠全血粘度，揭示了洋蟲(chóng)自身活血化瘀的作用機(jī)理[10]。

表1 5組治療前后炎性因子變化比較(x±s，n = 12) %

炎癥與肺癌的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)[11-13]。腫瘤微環(huán)境是腫瘤賴(lài)以發(fā)生發(fā)展的土壤和基礎(chǔ)，腫瘤微環(huán)境中有對(duì)腫瘤具有促進(jìn)作用的炎性因子IL-6、IL-8和TNF-α。中藥具有扶正祛邪，通過(guò)多種作用機(jī)制抑制肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的作用[14-16]。已有研究[17-18]發(fā)現(xiàn)洋蟲(chóng)可以降低炎性因子IL-6和TNF-α，與筆者研究結(jié)果相符。本研究發(fā)現(xiàn)肺癌組的小鼠體內(nèi)炎性因子IL-6、IL-8和TNF-α的表達(dá)要明顯高于正常小鼠組；洋蟲(chóng)治療組的炎性因子表達(dá)水平明顯低于腫瘤組，說(shuō)明洋蟲(chóng)可以降低腫瘤微環(huán)境中炎性因子的表達(dá)，其具體機(jī)制有待于大樣本的深入研究。

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Study on Martianus dermestoides Chevrolat improving the infammatory microenvironment of mice bearing lung cancer

WANG Hailong, CHEN Lijun, LIU Minglong, HU Xiangping, LIANG Jing, YU Jinsheng, DOU Xinli
( Department of Oncology, Dagang Hospital of Binhai New Area, Tianjin 300270, China)

Objective To investigate the changes of inflammatory microenvironment in which IL-6, IL-8 and TNF-α for mice fed with Martianus dermestoides Chevrolat. Methods 60 male LLC mice were randomly divided into fve groups: normal group, tumor group, treatment 1 group, treatment 2 group and prevention group. Each group were 12 rats. The mice was treated with Lewis lung cancer except normal group being not treated. When tumor diameter reach 0.5-1.0cm, treatment 1 group and treatment 2 group were fed with Martianus dermestoides Chevrolat. The pretreatment group was fed with Martianus dermestoides Chevrolat when treated with Lewis lung cancer. we detected the serum IL-6, IL-8 and TNF-α using ELISA method. Results Tumor associated infammatory factors IL-6, IL-8, and TNF-α in the tumor group was signifcantly higher than the normal group, and signifcantly lower after treatment, the difference was statistically significant (P＜0.05). Conclusion Inflammatory factors promote lung cancer growth signifcantly. Martianus dermestoides Chevrolat can regulate infammatory microenvironment.

Martianus dermestoides Chevrolat; lung cancer; microenvironment; infammatory factor

R282.74

A

2095-6258(2017)04-0533-03

2019-11-04）

10.13463/j.cnki.cczyy.2017.04.006

天津市衛(wèi)生計(jì)生委中醫(yī)中西醫(yī)結(jié)合課題“中藥洋蟲(chóng)調(diào)控肺癌小鼠腫瘤微環(huán)境的研究”（13176）。

王海龍（1976-），男，博士，副主任醫(yī)師，主要從事中西醫(yī)結(jié)合腫瘤綜合治療研究。