APOA5基因多態性與血脂水平及冠心病易感性的研究

張京苗，劉小銳，黃宇玲*

（1.華北理工大學研究生學院，河北 唐山 063009；2.河北大學附屬醫院胃腸外科，河北 保定 071028；3.華北理工大學附屬醫院心內科，河北 唐山 063000）

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APOA5基因多態性與血脂水平及冠心病易感性的研究

張京苗1，劉小銳2，黃宇玲3*

（1.華北理工大學研究生學院，河北 唐山 063009；2.河北大學附屬醫院胃腸外科，河北 保定 071028；3.華北理工大學附屬醫院心內科，河北 唐山 063000）

目的探究冠心病易感性與載脂蛋白A5（APOA5）基因-1131T＞C以及c.553G＞T多態性位點基因型間的關聯性。方法研究對象包括165例滿足冠心病患者（冠心病組）和165例健康人（對照組）。測定兩組受試者APOA5基因-1131T＞C以及c.553G＞T多態性位點的基因型并計算相應的等位基因型頻率；分析APOA5基因c.553T多態性基因型頻率與冠心病患者冠狀動脈病變程度的關聯。結果冠心病組中APOA5基因-1131多態性位點CC基因型的空腹血糖濃度水平高于TC基因型。APOA5基因-1131多態性位點CC基因型的血清中總膽固醇水平高于TT基因型；TC、CC基因型的甘油三酯水平高于TT基因型。冠心病組受試者APOA5基因c.553位點的T等位基因頻率（8.59%）高于正常對照組；APOA5基因c.553多態性位點（GT +TT）基因型的甘油三酯水平高于GG基因型。結論APOA5基因-1131多態性位點的C等位基因以及c.553多態性位點的T等位基因與我國漢族人群冠心病患者血清中甘油三脂濃度水平增加具有一定關聯性。

APOA5；基因多態性；血脂水平；冠心病；易感性

載脂蛋白A5（apolipoprotein A5，APOA5）基因在體內脂類的轉運過程中扮演著重要角色。載脂蛋白以及脂蛋白功能出現障礙將會直接導致血脂的異常[1]，血清中甘油三酯的濃度與載脂蛋白A5基因之間的關系為負相關[2]。APOA5基因的-1131T/C以及c.553G＞T多態性位點可能與血清中甘油三酯的濃度水平存在關聯性[3]。本研究通過比較我國漢族人群中冠心病患者與正常對照人群之間APOA5基因-1131T/ C以及c.553G＞T多態性位點的基因型頻率，分析我國漢族人群冠心病易感性與APOA5基因-1131T/C以及c.553G＞T多態性間的關聯性。

1 材料與方法

1.1 研究對象

本文研究對象包括165例滿足世界衛生組織制定的冠心病的定義以及診斷標準的冠心病患者（冠心病組），以及165例健康人（對照組）。

1.2 冠心病的主要相關因素與指標調查

冠心病的主要相關因素與指標包括糖尿病、高血壓、血清總膽固醇水平、甘油三酯水平、高密度脂蛋白膽固醇以及低密度脂蛋白膽固醇以及吸煙及飲酒情況等。

1.3 APOA5基因-1131T＞C和c.553G＞T多態性位點的檢測

①-11 3 1 T＞C 的P C R引物序列：正向序列：5’-GATTGATTCAAGATGCATTTAGGAC-3’；反向序列：5’-CCCCAGGAACTGGAGCGAAATT-3’。②c.5 5 3 G＞T的P C R引物序列：正向序列：5’-AGACACCAAGGCCCAGTTGCTGGG-3’；反向序列：5’-ATGCCGCTCACCAGGCTCTCGGCG-3’。③PCR反應在PCR熱循環以上進行，反應體系保持于37℃的水浴過夜后將產物進行經瓊脂糖（濃度為3%）凝膠電泳，電壓為90V，時間為60min，電泳結束后采用紫外光凝膠成像系統進行鑒定。

1.4 統計分析

兩組受試者中等位基因頻率是否滿足群體代表性通過Hardy-Weinberg平衡來檢驗；數據采用SPSS 20.0統計分析軟件處理，采用方差分析計量數據，P＜0.05代表差異有意義。

2 結 果

2.1 冠心病組中APOA5基因c.553G＞T多態性位點各基因型中的血糖及血脂水平情況

冠心病組中APOA5基因c.553多態性位點GG基因型的空腹血糖濃度水平與（GT +TT）基因型不存在顯著差異（P＞0.05）。APOA5基因c.553多態性位點（GT +TT）基因型的甘油三酯水平高于GG基因型（P＜0.05）；GG基因型與（GT +TT）基因型在血清中總膽固醇水平、高密度脂蛋白膽固醇以及低密度脂蛋白膽固醇水平上不存在顯著差異（P＞0.05），見表1。

表1 GG基因型與（GT +TT）基因型中血糖及血脂水平比較

2.2 APOA5基因c.553T多態性基因型頻率與冠心病患者冠狀動脈病變程度的關聯

冠心病患者GG基因型中發生單支病變、雙支病變以及三支病變的患者分別為68例、31例以及36例，（GT +TT）基因型中發生單支病變、雙支病變以及三支病變的患者分別為10例、8例以及9例，兩組基因型之前不存顯著差異（P＞0.05），見表2。

表2 基因型頻率與冠心病患者冠狀動脈病變程度的關聯

3 討 論

APOA5基因位于染色體11q23位置，包含四個外顯子以及三個內含子，全長約為1889bp，編碼氨基酸366個[4]。冠心病組受試者APOA5基因-1131位點的C等位基因頻率（36.06%）高于正常對照組（26.06%）。-1131位點位于APOA5基因的啟動區，故而其對APOA5基因表達的影響可能是通過影響轉錄因子的結合而產生進而對血漿中甘油三酯濃度水平造成影響而產生的[5]。-1131 T＞C多態性位點處在APOA5基因轉錄起始位點上游600bp左右的位置，增強子等順勢作用元件可能處于該區域，-1131 T＞C多態性可能通過影響啟動子區的蛋白因子以及增強子等順勢作用元件之間的相互作用進而對啟動子的起始轉錄產生影響，最終導致改變APOA5基因的表達水平發生變化，根據本研究結果可以推斷-1131位點的CC基因型可能增加冠心病的患病風險。

冠心病組受試者APOA5基因c.553位點的T等位基因頻率（8.59%）高于正常對照組（3.33%）。c.553位于APOA5基因的編碼區，該位點基因型的變化可能導致使其編碼氨基酸發生變化，進而對APOA5基因編碼的蛋白結構與功能產生影響。APOA5基因-1131多態性位點的C等位基因以及c.553多態性位點的T等位基因與冠心病患者血清中甘油三脂濃度水平增加具有一定關聯性。此外，本研究中未發現血管病變支數與c.553T多態性位點的T等位基因之間的關聯性。

[1] 曲凌光,尚佳,魏述軍,等.回族和漢族冠心病患者發病影響因素及冠狀動脈病變特點對比研究[J].中國全科醫學,2013,16 (2):505-507.

[2] 徐莉,何濤.山東地區漢族人載脂蛋白A5 SNP3基因多態性與冠心病的關系[J].山東醫藥,2008,48( 46):1-3.

[3] 李向平,趙水平,轟賽.載脂蛋白A5-1131T＞C基因多態性與冠心病的關系[J].中國循環雜志,2007,22(1):4-8.

[4] Wong WM, Hawe E, Li LK, et al.Apolipoprotein AIV gene variant S347 is associated with increased risk of coronary heart disease and lower plasm a apolipoprotein AIV levels [J].Circ Res, 2003,92(9):969-975.

[5] Liu H, Zhang S, Lin J.et al.Association between DNA variant sites in the apolipoprotein A5 gene and coronary heart disease in Chinese [J].Metabolism,2005,54(5):568-572.

本文編輯：李新剛

Association between Polymorphism of APOA5 Gene and Serum Lipids and Coronary Heart Disease

ZHANG Jing-miao1, LIU Xiao-rui2, HUANG Yu-ling3
(1.Faculty of Graduate Studies, North China University of Science and Technology, Hebei Tangshan 063009, China; 2.Department of Gastrointestinal surgery, Affiliated Hospital of Hebei University, Hebei Baoding 063000, China; 3.Internal Medicine-Cardiovascular Department, Affiliated Hospital of North China University of science and technology, Hebei Tangshan 063000, China)

ObjectiveTo investigate the association between susceptibility to coronary artery disease (CHD) and apolipoprotein A5 (APOA5) gene,-1131T＞C and c.553G＞T polymorphism loci.MethodsThe subjects included 165 patients with coronary artery disease (CHD group) and 165 healthy subjects (control group).Genotype of APOA5 gene,-1131T＞C and c.553G＞T polymorphism loci were measured in two groups of subjects and the corresponding allele frequencies were calculated.To analyze the association between the genotype frequency of APOA5 gene and the severity of coronary artery disease in patients with coronary heart disease (CHD) c.553T.ResultsThe fasting glucose concentration of APOA5 genotype,-1131 polymorphism and CC genotype in CHD group was higher than that in TC genotype.The total cholesterol level in the CC genotype of the-1131 genotype of APOA5 gene was higher than that in the TT genotype.The triglyceride levels of TC and CC genotypes were higher than those of TT genotype.The T allele frequency of APOA5 gene c.553 in CHD group was higher than that in normal control group (8.59%).The triglyceride level of the c.553 polymorphism (GT, +TT) genotype of the APOA5 gene is higher than that of the GG genotype.ConclusionThe C allele of the-1131 polymorphism of APOA5 gene and the T allele of the c.553 polymorphism site are related to the increase of serum glycerol three lipid concentration in patients with coronary heart disease (CHD) in Han population in china.

APOA5; gene polymorphism; Blood lipid levels; Coronary heart disease; Susceptibility

R541.4

A

ISSN.2095-8242.2017.026.4951.02

黃宇玲，E-mail：huangyulingts@126.com