寒蔥快繁體系的條件優化

陳 笑,周 策,孫雪慧,魏 健

(長春師范大學生命科學學院，吉林長春130032)

寒蔥快繁體系的條件優化

陳 笑,周 策,孫雪慧,魏 健

(長春師范大學生命科學學院，吉林長春130032)

為了更加準確地獲得寒蔥優良快繁體系的組培條件，培育出更多的寒蔥幼苗，實現寒蔥的準確快繁，提升質量和產量,本實驗以寒蔥的莖塊為試材，利用植物組織培養技術，研究不同激素濃度對寒蔥培育的影響，為寒蔥快繁體系的優化奠定理論基礎。

寒蔥；快速繁殖；激素濃度

寒蔥學名茗蔥，屬百合科，為多年生草本植物。它的根須較多，形狀近圓柱或圓錐形。花序呈直立狀，傘形花序,球狀[1]，數目多且分布較均勻；小花柄大多等長；花呈白色或淡紫色，外花被比較狹長且較短，內花被比較寬且較長[1-3]。寒蔥質軟且平滑，不耐高溫，但具有較強的抗寒能力，所以大多數寒蔥都生長在林下、陰濕的山坡、林間的草甸或溝邊[2]。寒蔥因生長在大寒蔥頂和小寒蔥頂，故得此名，主要分布于吉林省境內的東豐縣境內。寒蔥也抽薹開花，花薹和韭菜相似，生吃的味道也與韭菜相似，但多了幾分甘甜和蔥味。寒蔥還有許多優良的品質，如耐寒性[4]、抗病性、豐產性和耐貯存等。本實驗以寒蔥的莖塊為試材[5]，利用植物組織培養技術，研究不同激素濃度對寒蔥培育的影響，從而為寒蔥快繁體系的優化奠定相關的理論依據與技術支持。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗材料

選擇生長在東豐縣寒蔥頂寒蔥的莖塊作為本次實驗的外植體。

1.1.2 試劑

MS粉、蔗糖、瓊脂、升汞、肌醇、6-芐氨基腺嘌呤(6-BA)、蔡乙酸(NAA)等均購自長春百金生物科技有限公司，為分析純。

1.1.3 器材

超凈工作臺(北京東聯)、電子天平(Scout SE，江蘇奧豪斯)、微型離心機(Mini-7k，杭州奧盛)、超高速冷凍離心機(5424R，美國Thermo)、電熱恒溫培養箱(上海一恒)、培養皿、刻度搪瓷杯、細菌過濾器、天平、牛角匙、pH試紙、漏斗、量筒、漏斗架、玻璃珠、三角瓶、手術刀、玻璃棒、鑷子、試管、吸管、防水紙、標簽、棉花等。

1.2 實驗方法

1.2.1 培養基配制

以MS培養基作為基本培養基，配置方法如下：

MS培養基：MS粉4.33 g，肌醇5 mL，蔗糖10 g，有機物質(VB10.04 g，VB60.05 g，甘氨酸0.2 g，煙酸0.05 g，定容至500 mL)5 mL，加入適量去離子水，用HCl或NaOH調整pH在5.8～6.0之間，再加入7.5 g瓊脂粉，去離子水定容至1 L，高溫滅菌。

分化培養基：以MS培養基作為基礎培養基，依次加入不同濃度的6-BA，觀察愈傷組織和叢生芽的生長的情況。

生根培養基：以MS培養基作為基礎培養基，依次加入不同濃度的NAA，觀察寒蔥根生長情況。

1.2.2 外植體的消毒

去除寒蔥的葉片，剪取具有腋芽部位的莖塊。用含洗潔精的水溶液沖洗4～5次，后用自來水清洗15分鐘左右，清洗干凈后，把試驗所用的莖塊片段放入70%的酒精中，浸泡30秒后放入配好的升汞溶液滅菌5～10分鐘后，使用無菌水反復將莖塊片段沖洗4～5次。最后，將其放置在無菌培養基中,切去莖塊最末端處1～2mm左右,再次使用無菌水沖洗5～6次，每次清洗的時間不少于2分鐘。

1.2.3 外植體的接種與培養

用滅菌后的鑷子把莖塊接種在經過誘導分化后的培養基中，所有用到的器材都必須嚴格進行滅菌。莖塊的接種需要在誘導分化后的培養基上的腋芽長至3～4cm左右高并成為新的植株時進行，15天后進行生根培養。初代培養基上培養4～5天時，在超凈工作臺中將莖塊取出，用無菌水清洗，確保莖塊上不留下任何培養基的殘液。再將其接種到已經新加入培養基的器皿中，誘導愈傷的組織在同樣的條件下進行再次培養。培養過程需要半個月左右，之后小的愈傷組織會慢慢成長。愈傷的組織可培育出眾多的可繁殖性接種的材料，用于后續的生根培養。

2 實驗結果

2.1 不同濃度6-BA對寒蔥的愈傷組織誘導產生的影響

表1 不同濃度6-BA對寒蔥愈傷組織誘導產生的影響

由表1可以看出，6-BA的濃度較低或者較高的時候它都將會左右到寒蔥愈傷組織細胞的增殖，當6-BA濃度在2.2mg/L時寒蔥的萌發率較高，也就是說細胞增殖也最快。

2.2 不同濃度6-BA對寒蔥芽增殖產生的影響

表2 不同濃度6-BA對寒蔥芽增殖產生的影響

由表2可以看出，隨6-BA濃度的升高，寒蔥芽增殖的數量也在不斷增多，但在生長調節劑濃度過高時，寒蔥就會出現發黃點，因此在芽增殖階段6-BA最適合的濃度是2.2mg/L。

2.3 不同濃度NAA對寒蔥生根的影響

表3 不同濃度NAA對寒蔥生根培養產生的影響

由表3可以看出，生長調節劑NAA濃度較低或較高時，都會遏制根部的成長，本試驗結果顯示最合適根生長的NAA濃度為0.5 mg/L。

3 結論

寒蔥為多年生的草本植物，而寒蔥的快速繁殖技術在當地的農村中進行宣傳推廣和入土栽培都有較強的可行性[6-9]，當地農民還可以利用林改之后的天然林進行林下復合式的寒蔥經營。以短養長，進而取得最佳的經濟效益。由于近些年來無節制的開采，使目前彌足珍貴的寒蔥正面臨絕種的威脅。對寒蔥快繁體系進行條件優化研究，不僅可以保護瀕危物種寒蔥的資源，而且對野生經濟植物的家化培育具有一定的促進作用和指導意義。

[1]戴旭,尹云.寒蔥人工栽培可行性分析[J].吉林農業,2011(8)：125.

[2]李寶山,祖麗娜.寒蔥的栽培與利用[J].中國林副熱產,2010(2):75-76.

[3]周繇,朱俊義,于俊林.中國長白山食用植物彩色圖志[M].北京:科學出版社,2012.

[4]姬艷玲,武留剛.寒蔥栽培技術要點[J].河南農業,2013(5):39.

[5]劉桂萍,王建軍.淺談旱地毛蔥高產栽培技術[J].農民致富之友,2015(3):40.

[6]侯穎,孫鳳發,程世明.寒蔥栽培技術[J].人參研究,2007(4):39.

[7]李建欣,田朝暉,葛桂民，等.鄭研寒蔥反季節高效栽培技術[J].種業導刊,2013(12):21-23.

[8]張德純,祁占東,王海軍,等.茖蔥資源保護和開發利用[J].中國蔬菜,2007(12):42-43.

[9]尹永芹.茖蔥的化學成分研究[D].哈爾濱：黑龍江中醫藥大學,2014.

Optimization of Rapid Propagation System ofAlliumVictorialis

CHEN Xiao,ZHOU Ce,SUN Xue-hui,WEI Jian

(College of Life Sciences,Changchun Normal University, Changchun Jilin 130032,China)

This experiment is to accurately abtain the excellent conditions of rapid propagation system forAlliumvictorialis, which can be produced more seedlings ofAlliumvictorialisand enhance their quality and production. In this experiment, stalks block was the experimental materials, and the plant tissue culture techniques was used to study the impact of different ratio of hormone concentration onAlliumvictorialis, and laid a theoretical foundation for the optimization of rapid propagation system ofAlliumvictorialis.

Alliumvictorialis;rapid propagation system；hormone concentration

2016-10-27

長春師范大學研究生創新計劃資助項目“寒蔥快繁體系的建立”(cscxy2015006)；長春市科技局項目“瀕危寒蔥快繁體系的建立及基地栽培模式示范”(2014198)。

陳 笑(1990- )，女，碩士研究生，從事植物生物技術研究。

魏 健(1980- )，男，副教授，博士，從事生物技術研究。

S567.23+9

A

2095-7602(2017)08-0077-03