李秋波,楊杰,馮曉科,周磊,程建國,康紀平
(四川養(yǎng)麝研究所,四川 都江堰 611830)
健康比格犬血液部分電解質(zhì)及pH值測定
李秋波,楊杰,馮曉科,周磊,程建國,康紀平*
(四川養(yǎng)麝研究所,四川 都江堰 611830)
為了確立本單位繁育飼養(yǎng)基地健康比格犬血液中主要電解質(zhì)及pH值指標的參考值范圍,為犬只生產(chǎn)管理、質(zhì)量控制和藥物研發(fā)、醫(yī)學(xué)研究等提供參考數(shù)據(jù),本試驗隨機選擇臨床健康比格犬137只(雄42只,雌95 只),分別測定其血清中的 K(鉀)、Na(鈉)、Cl(氯)、iCa(實測鈣)、nCa(標準離子鈣)、TCa(總鈣)含量及pH 值。 結(jié)果如下:血清 K 含量 5.27±4.24mmol/L,Na含量 144.65±17.51 mmol/L,Cl含量 108.04±6.09mmol/L,iCa含量 1.09±0.11mmol/L,nCa含量 1.26±0.05mmol/L,TCa含量 2.27±0.19mmol/L,pH 值為 7.65±0.25;雌性與雄性間的 K、Na 含量及 pH 值指標無顯著差異(P>0.05),但 Cl、iCa、nCa、TCa 含量有顯著差異(P<0.05)。
比格犬;電解質(zhì);均值及標準差
比格犬是標準的實驗動物,廣泛用于實驗外科學(xué)、病理學(xué)、生理學(xué)等醫(yī)學(xué)研究、教學(xué)實踐,新藥臨床前的各種藥理代謝試驗以及毒性試驗。健康犬只血液中電解質(zhì)含量及酸堿度(pH值)是有一定范圍的,并具有特定的生理學(xué)作用。環(huán)境和生理因素引起動物血液中的電解質(zhì)含量或血液酸堿度(pH值)變化(過高或過低)都可使動物生理機能紊亂,從而發(fā)生疾病。因此,對犬只血液中電解質(zhì)及酸堿度值的監(jiān)測具有重要的臨床意義。2016年,筆者對137只4~24月齡健康比格犬血液中的鉀、鈉、氯、鈣四種電解質(zhì)及pH值指標進行了測定,旨在為犬只生產(chǎn)管理、質(zhì)量控制和醫(yī)學(xué)研究等提供參考數(shù)據(jù)。
1.1 試驗犬只 隨機選擇臨床健康的比格犬137只(雄 42只,雌 95只),4~22月齡,體重 5.0~12kg。犬只按國家相關(guān)規(guī)范進行飼養(yǎng)管理。總共使用了三批次犬,其實驗動物生產(chǎn)許可證號為SCXK(川)2014-01,三批實驗動物質(zhì)量合格證號分別為0000827、0000828、0000829。
1.2 儀器與試劑 電解質(zhì)分析儀(IMS-972),配套的參比液、活化液及清洗液(批號均為201603001)等試劑。
1.3 血樣采集 犬只禁食12h,在清醒不麻醉狀態(tài)下于前肢內(nèi)側(cè)隱靜脈采血5mL注入真空空白采血管中,室溫靜置 20~30 min,離心(4 000 r/min,15 min),吸出血清注入樣品管備用、待檢。
1.4 測定方法 開機:打開分析儀電源開關(guān),置于ON位置,儀器的液流分配閥開始轉(zhuǎn)動完成系統(tǒng)沖洗。活化:儀器在系統(tǒng)清洗完成后會自動抽取A標進行活化,活化時間默認為30min,在此期間如果需要退出來做樣品,請按“YES”或“NO”鍵。標定:儀器通過標定,可以求出各個電極的響應(yīng)斜率,數(shù)據(jù)儲存在機器內(nèi)。另外我們可以通過兩次標定(標A、標B,再標A、標B)對各電極的毫伏值做出比較,從而判斷各電極的穩(wěn)定性,標定完畢后,儀器將自動吸入A漂移校正液進行自檢,顯示出A標的濃度值。分析樣品:將儀器進樣吸管插入盛有2.5mL待檢血清樣品的試管內(nèi),按“YES”鍵進入樣品分析,然后儀器會自動把已進入吸樣針中的血清樣品吸入各電極內(nèi)進行測量,大約20s后,儀器屏幕上會顯示鉀、鈉、氯、鈣離子的濃度和pH值。維護保養(yǎng):用清洗液沖洗管道,然后關(guān)機完成檢測。
1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計 用SPSS統(tǒng)計軟件計算各測量值的平均值與標準差,并進行雌雄犬間的顯著性t檢驗。
2.1 實驗測量值及指標分析結(jié)果 詳見表1。

表1 比格犬電解質(zhì)指標分析表mmol/L
2.2 分析
2.2.1 血清中成分很復(fù)雜,含有大量的蛋白質(zhì)和檸檬酸鹽等,這些組分可與Ca離子結(jié)合成絡(luò)合鈣。絡(luò)合鈣不具備生理活性,調(diào)節(jié)人體鈣平衡的標準是離子鈣而不是總鈣。近幾年由于離子選擇性電極的出現(xiàn),測定離子鈣簡便準確,本試驗采用的就是離子電極法。總鈣、離子鈣、絡(luò)合鈣關(guān)系如下:TCa(總鈣)=nCa(離子鈣)+絡(luò)合鈣。動物體血清pH值為7.4時的離子鈣值為nCa(標準離子鈣),此時TCa≈2nCa。血清分離后,隨著時間延長和離心的作用,血清中二氧化碳逸出,pH值升高,離子鈣濃度降低,儀器中屏幕顯示出的pH值為實測pH值,然后利用公式計算出標準離子鈣值nCa,因?qū)崪y離子鈣無臨床意義,故臨床診斷的主要依據(jù)為nCa。打印結(jié)果中同時標有iCa、nCa和TCa,其中iCa、TCa在測定時僅供參考。由于二氧化碳逸出無規(guī)律可循,所以pH值在血清測量中一般只作參考,其主要作用是用于校正Ca離子。
2.2.2 137 份血清樣品中,K、Na、Cl、nCa 及 pH 值的測量值平均值均在正常參考范圍內(nèi),各組數(shù)據(jù)的標準差SD值變異不大,數(shù)據(jù)正態(tài)分布較為集中,表明數(shù)據(jù)的有效性是可靠的。
2.2.3 雌性犬與雄性犬間相比,K、Na及pH值的測量值無顯著差異(P>0.05),但 Cl、nCa的測量值有顯著差異(P<0.05)。
2.2.4 鈉和氯是細胞外液中主要的陽離子和陰離子,其主要生理功能是維持細胞外液中的滲透壓,維持體液容量,參與調(diào)節(jié)酸堿平衡,維持神經(jīng)、肌肉的應(yīng)激性等。
Ca2+參與凝血作用及一些酶的激活,并可降低神經(jīng)、肌肉的興奮性,正常傳導(dǎo)神經(jīng)沖動,維持心肌節(jié)律及細胞膜的通透性等。血氣分析與酸堿指標測定在人醫(yī)學(xué)和獸醫(yī)學(xué)臨床上都是不可缺少的重要技術(shù),在指導(dǎo)呼吸衰竭和酸堿平衡失常的診斷治療方面起著關(guān)鍵性作用。血液氧分壓、二氧化碳分壓和pH值是血氣分析和酸堿指標測定的三個主要項目,具有十分重要的臨床意義。
[1]李秋波,楊杰,康紀平,等.6~8月齡健康比格犬血液微量元素測定[J].實驗動物科學(xué),2014,31(2):51-53.
[2]康紀平,李秋波,馮曉科,等.比格犬部分生理指標測定[J].實驗動物科學(xué),2011,28(1):66-68.
[3]李秋波,康紀平,馮曉科,等.比格犬正常血液學(xué)指標及血清生化指標測定[J].四川動物,2011,30(2):265-267.
[4]王書林,王洪斌,王哲,等.獸醫(yī)臨床診斷學(xué)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2001:227-248.
[5]韓正康,劉敏雄,毛鑫智,等.家畜生理學(xué)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,1980:11-13.
[6]林曦,馬學(xué)恩,陳玉漢,等.家畜病理學(xué)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2001:30-33.
[7]施新猷.醫(yī)用實驗動物學(xué)[M].西安:陜西科學(xué)技術(shù)出版社,1989:492.
Detection on Blood Main Electrolyte and pH of Healthy Beagle Dogs
Li Qiubo,Yang Jie,F(xiàn)eng Xiaoke,et al.
(Sichuan Institute of Musk Deer Breeding,Sichuan Dujiangyan 611830,China)
To establish the normal reference data of main blood electrolyte and pH of healthy beagle dogs in Sichuan institute of musk deer breeding and provide basic data for production management,quality control,drug discovery and medical research,blood samples of 137 healthy beagles(42 males and 95 females)were collected from forelimb medial saphenous vein,the blood electrolyte indices(K,Na,Cl,iCa,nCa,TCa)and pH were detected by IMS-972 electrolyte analyzer.The results as follows,K:5.27±4.24 mmol/L,Na:144.65±17.51 mmol/L,Cl:108.04 ±6.09 mmol/L,iCa:1.09±0.11 mmol/L,nCa:1.26±0.05 mmol/L,TCa:2.27±0.19mmol/L,pH:7.65±0.25.The conclusion indicated that there was no significant difference(P>0.05)on K,Na and pH in blood between male and female,but the indices of Cl,iCa and nCa had significant difference(P<0.05).
Beagle dogs;Electrolyte;Mean and standard deviation
Q502
B
1001-8964(2017)08-0019-03
2017-05-19
李秋波(1962-),女,副研究員,研究方向:實驗動物生產(chǎn)管理和質(zhì)量控制。
*通訊作者:康紀平