柴胡疏肝散藥理作用及機制研究進展

張喆 趙靜潔 王永志 李麗

摘要：柴胡疏肝散具有疏肝行氣、活血止痛的功效，臨床上主要用于治療肝郁氣滯證，其應用非常廣泛。本文綜述近年來柴胡疏肝散對神經生化、內分泌、免疫功能的影響和抗氧化方面的藥理作用及機制研究文獻，為臨床用藥及新藥研發提供參考。

關鍵詞：柴胡疏肝散；動物模型；藥理；作用機制；綜述

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2017.09.035

中圖分類號：R285.5 文獻標識碼：A 文章編號：1005-5304（2017）09-0128-04

Research Progress in Pharmacological Effects and Mechanism of Chaihu Shugan Powder ZHANG Zhe， ZHAO Jing-jie， WANG Yong-zhi， LI Li （Beijing Friendship Hospital Affiliated to Capital Medical University， Beijing 100050， China）

Abstract： Chaihu Shugan Powder has the function of soothing liver and promoting qi flow， activating blood and relieving pain. In clinic， it is mainly used for the syndrome of liver qi stagnation， with wide application. This article reviewed the literature about effects of Chaihu Shugan Powder on neurobiochemistry， endocrine regulation， immunity and antioxidant pharmacological effects and mechanism， with a purpose to provide references for clinical medication and new medicine research.

Key words： Chaihu Shugan Powder； animal models； pharmacology； mechanism； review

柴胡疏肝散出自明代張介賓《景岳全書·古方八陣·散陣》卷二十五脅痛篇，方由柴胡、芍藥、枳殼、川芎、香附、甘草6味藥組成，具疏肝行氣、活血止痛的功效，主治肝氣郁結、脅肋疼痛、寒熱往來，臨床主要用于治療肝郁氣滯證。近年來，該方被廣泛用于治療多種病癥，如心腦血管疾病、胃腸疾病、肝膽疾病、頭疼、頑固性失眠、抑郁癥、糖尿病、斑禿、婦科疾病、男科疾病等。本文對柴胡疏肝散動物模型實驗研究的藥理機制進行綜述，以明確其研究現狀，為臨床用藥及新藥研發提供參考。

1 對神經生化的影響

1.1 神經遞質及受體

神經遞質依據其化學本質不同可分為4類：膽堿類、胺類、氨基酸類、肽類。柴胡疏肝散對神經遞質影響的研究主要集中在單胺類神經遞質：5-羥色胺（5-HT）、去甲腎上腺素（NE）、多巴胺（DA）。

研究表明，柴胡疏肝散對圍絕經期綜合征肝郁證

基金項目：國家自然科學基金（81450029）；北京市中醫藥科技項目（JJ2014-41）；北京市215高層次衛生人才培養計劃（2014-3-001）

通訊作者：李麗，E-mail：liliqin_1999@yahoo.com

動物模型灌胃治療，ELISA檢測表明，與模型組比較，治療組海馬5-HT、NE含量明顯升高。提示柴胡疏肝散治療圍絕經期綜合征肝郁證的藥理作用在于其可干預神經遞質5-HT、NE的釋放[1]。禤璇、王永志等[2-3]分別對阿爾茨海默病模型大鼠和抑郁模型大鼠灌胃柴胡疏肝散治療，結果表明，與模型組比較，柴胡疏肝散組大鼠海馬組織5-HT、NE和DA水平明顯升高。提示柴胡疏肝散能顯著改善模型動物的記憶、學習能力與抑郁狀態，其機制可能與其明顯提高大鼠海馬內的單胺類神經遞質5-HT、NE和DA水平有關。

此外，柴胡疏肝散對5-HT1A受體也有作用。劉英等[4]對抑郁動物模型進行柴胡疏肝散灌胃治療，高效液相色譜法測定結果表明，與模型組比較，治療組5-HT含量增加。Western blot檢測結果表明，與模型組比較，治療組5-HT1A受體表達水平明顯升高。提示柴胡疏肝散抗抑郁作用可能不僅與海馬5-HT水平相關，還與5-HT1A受體表達有關。

1.2 神經營養因子

神經營養因子是靶細胞產生的天然蛋白質，分為神經營養素族、神經細胞激動素族和轉化生長因子B族等，是神經細胞生長、分化的依賴因子，也是神經元受損害或病變時保護其存活和促進其再生的必需因子。

腦源性神經營養因子（BDNF）屬神經營養素族，對海馬和其他大腦區域有重要的營養作用，還能防止神經元的變性和壞死。鄧穎等[5]用柴胡疏肝散干預抑郁模型大鼠，免疫組化及實時熒光定量PCR檢測表明，與模型組比較，柴胡疏肝散組海馬、額葉皮質、杏仁核區BDNF及其受體酪氨酸激酶受體B（TrkB）mRNA表達明顯增強。提示柴胡疏肝散改善抑郁狀態的機制可能與增加海馬、額葉、杏仁核區BDNF及其受體TrkB mRNA表達有關。Su Z H等[6]對抑郁模型大鼠進行柴胡疏肝散灌胃治療，Western blot檢測表明，柴胡疏肝散可促進BDNF的表達。

1.3 基因及相關蛋白表達

1.3.1 磷酸二酯酶-4及其亞型 杜雅薇[7]用柴胡疏肝散給肝氣郁結證模型大鼠灌胃治療，qRT-PCR檢測表明，柴胡疏肝散組大鼠海馬磷酸二酯酶-4的亞型PDE4A、PDE4B及PDE4D的mRNA表達較模型組升高。提示柴胡疏肝散抗肝郁作用的機制可能是通過上調肝郁大鼠海馬PDE4及其亞型的mRNA表達，從而保護受損神經元、改善大腦功能、緩解肝郁癥狀。

1.3.2 自噬微管相關蛋白輕鏈3、自噬基因Beclin-1 徐愛軍等[8]給抑郁癥模型大鼠灌胃柴胡疏肝散后，Western blot檢測發現，柴胡疏肝散治療組自噬微管相關蛋白輕鏈3（LC-3）、LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ比值和自噬基因Beclin-1蛋白表達水平較模型組降低。提示柴胡疏肝散具有抗抑郁作用，可能與降低自噬有關。

1.3.3 Bcl-2、Bax蛋白 樊蔚虹等[9]用柴胡疏肝散干預卒中后抑郁癥大鼠模型，免疫組化檢測表明，與模型組比較，柴胡疏肝散組可明顯下調海馬組織Bax蛋白表達，上調海馬組織Bcl-2蛋白表達。提示柴胡疏肝散可通過下調Bax、上調Bcl-2蛋白的表達而抑制神經細胞凋亡，從而發揮治療作用。

1.3.4 細胞外信號調節激酶 絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）是細胞內的一類絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，是真核細胞轉導細胞外信號到細胞內引起細胞反應的一類重要信號系統。所有真核細胞都有多條MAPK通路，參與調節各種細胞活動的全過程，包括基因表達、細胞有絲分裂、新陳代謝、運動、存活、凋亡和分化。細胞外信號調節激酶（ERKs）為5種MAPKs家族成員之一。李生強[10]通過實時定量PCR檢測表明，與圍絕經期綜合征肝郁證模型組比較，柴胡疏肝散治療組大鼠海馬組織ERK1的表達差異無統計學意義，而ERK2表達明顯增加。Wang S E[11]采用熒光實時定量PCR檢測抑郁大鼠模型組和柴胡疏肝散治療組大鼠海馬組織ERK1/2 mRNA表達水平，結果表明，與模型組比較，柴胡疏肝散治療組ERK1/2明顯增加。此外，采用柴胡疏肝散對抑郁模型大鼠灌胃治療，RT-PCR和Western blot檢測結果表明，柴胡疏肝散可促進抑郁模型大鼠ERK5 mRNA和ERK5的表達[12]。

2 對內分泌的影響

大量研究表明，柴胡疏肝散可對內分泌進行調節，包括對下丘腦-垂體-腎上腺（HPA）軸、下丘腦-垂體-甲狀腺素（HPT）軸、下丘腦-垂體-卵巢（HPO）軸和胃腸道相關激素的影響。

2.1 下丘腦-垂體-腎上腺軸

HPA軸是神經內分泌免疫調節的樞紐，在維持機體內環境穩態、調節機體應激反應過程中起著非常重要的作用。主要在下丘腦、垂體、腎上腺水平分泌3種激素，分別為促腎上腺皮質激素釋放激素（CRH）、促腎上腺皮質激素（ACTH）和腎上腺皮質激素（GC）。3種激素在生理結構的基礎上構成1個反饋環路，作用于機體對應激的適應性調節。

樊蔚虹、杜雅薇等[13-14]分別對慢性不可預見性刺激誘導的慢性應激模型大鼠和肝郁證候模型大鼠予柴胡疏肝散灌胃，檢測結果表明，與模型組大鼠比較，柴胡疏肝散組大鼠血漿ACTH、血清皮質醇（CORT）濃度明顯降低。提示柴胡疏肝散能改善HPA軸功能，其機制可能與調節大鼠血液中ACTH和CORT水平有關。李云輝、李生強等[15-16]分別用慢性輕度不可預見性應激加孤養復制抑郁大鼠模型，自然衰老和慢性束縛法制備圍絕經期綜合征肝郁證大鼠模型，并灌服柴胡疏肝散。分別采用放射免疫法檢測血漿CRH、ACTH和ELISA檢測血清ACTH、CORT、CRH含量。結果表明，與抑郁模型組比較，柴胡疏肝散組血漿CRH和ACTH濃度明顯降低，血清CRH、CORT含量明顯降低，ACTH含量也有下降趨勢。提示柴胡疏肝散可調節慢性應激引起的HPA軸功能亢進，從而調節圍絕經期綜合征肝郁證大鼠HPA軸功能。

2.2 下丘腦-垂體-甲狀腺素軸

HPT軸分別在下丘腦、垂體、甲狀腺3個水平產生激素：促甲狀腺激素釋放激素（TRH）、促甲狀腺激素（TSH）和甲狀腺激素（TH）。TH血清三碘甲腺原氨酸（T3）、四碘甲腺原氨酸（T4）具有促進物質與能量代謝的作用，下丘腦釋放TRH，調節腺垂體分泌TSH，TSH進一步引起TH的釋放。血液TH濃度變化通過負反饋調節下丘腦TRH和垂體TSH的分泌，構成HPT軸的自發性控制環路。

王玉杰等[17]采用柴胡疏肝散干預肝郁脾虛證模型大鼠，檢測結果表明，與肝郁脾虛證模型組比較，柴胡疏肝散組血清T3、T4均明顯升高，血清TRH、TSH有所升高，但差異無統計學意義。提示柴胡疏肝散主要作用于甲狀腺，而對肝郁脾虛證模型大鼠存在的HPT軸功能低下有改善作用。

2.3 下丘腦-垂體-卵巢軸

HPO軸主要控制發育、月經和性功能，還參與機體內環境和物質代謝的調節。由下丘腦分泌的促性腺激素釋放激素（GnRH），垂體分泌的卵泡刺激素（FSH）、黃體生成素（LH）和催乳素（PRL），卵巢分泌的雌激素、孕激素、雄激素反饋調節。

王琦等[18]對乳腺增生模型大鼠予柴胡疏肝散灌胃治療，采用ELISA測定血清PRL、雌二醇，免疫組化檢測乳腺組織中雌激素受體及孕激素受體的表達。結果表明，與模型組比較，柴胡疏肝散組PRL、雌二醇均明顯降低，雌激素受體表達明顯減弱，孕激素受體明顯增加。提示柴胡疏肝散對乳腺增生模型大鼠有一定的保護作用，其機制與改善血清相關激素水平及激素受體的表達有關。

2.4 胃腸道相關激素

敖海清、李雪萍等[19-20]分別對慢性多相性應激和便秘大鼠模型予柴胡疏肝散灌胃治療，放免法和ELISA檢測表明，與模型組比較，柴胡疏肝散組大鼠血液中胃泌素（GAS）和胃動素（MOT）明顯回升。提示柴胡疏肝散通過調節GAS及MOT來抑制慢性應激對大鼠胃腸功能的不良影響，提升胃腸激素水平，從而增強胃腸蠕動。

此外，凌江紅等[21]對功能性消化不良大鼠模型予柴胡疏肝散水煎劑灌胃，免疫組化檢測結果表明，與模型組比較，柴胡疏肝散組胃竇生長抑素（SS）表達明顯下降。提示柴胡疏肝散能通過下調胃竇SS表達，發揮對功能性消化不良的治療作用。

3 對免疫功能的影響

中藥可調節機體免疫系統：促進正常機體的免疫器官或免疫功能低下動物的免疫器官發育，提高機體的免疫力；調節細胞免疫與體液免疫；促進細胞因子的產生；通過誘導干擾素生成從而增強自然殺傷細胞和殺傷細胞活力，增強機體的非特異性抗感染能力；通過經典或非經典途徑激活補體系統，提高血清中補體的含量和活性；參與調節神經-內分泌-免疫網絡[22]。

賀立娟、盧文生等[23-24]分別對肝郁證和腸易激綜合征大鼠模型灌胃治療，檢測結果表明，柴胡疏肝散不僅能上調血漿白細胞介素（IL）-6、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平，明顯增強其免疫功能；還可通過下調IL-6、TNF-α的含量改善大鼠癥狀，從而達到治療目的。與模型組比較，柴胡疏肝散組血漿中IL-6、TNF-α含量有升有降，可能與治療不同病癥的作用機理不同有關。尚立芝等[25]用柴胡疏肝散干預肝纖維化模型大鼠，放射免疫法檢測結果表明，與模型組比較，柴胡疏肝散組肝組織IL-1和TNF-α含量顯著降低，提示柴胡疏肝散有抗肝纖維化作用，其機制可能與抑制IL-1和TNF-α釋放有關。金玲等[26]對非酒精性脂肪性肝炎大鼠予柴胡疏肝散灌胃治療，ELISA檢測表明，與模型組比較，柴胡疏肝散組大鼠肝組織IL-1、IL-6及TNF-α水平有所下降。提示其作用機制可能與抑制肝組織炎癥因子IL-1、IL-6及TNF-α的表達有關。

4 抗氧化

目前認為中藥成分對機體氧化損傷的保護作用主要包括直接清除活性氧自由基、增強抗氧化酶活性、抗脂質過氧化、維持細胞膜穩定性、減少DNA損傷、對氧化酶活力及表達的影響等[27]。

任鵬、Li S Q等[28-29]對不可預見性溫和應激模型和束縛氧化應激模型小鼠予柴胡疏肝散灌胃治療，結果表明，與模型組比較，給藥組小鼠肝組織超氧化物歧化酶（SOD）和過氧化氫酶（CAT）活性明顯增加；全血中谷胱甘肽（GSH）含量增加，肝組織丙二醛、SOD、CAT水平降低。提示柴胡疏肝散具抑制脂質過氧化、緩解氧化應激損傷、調控機體抗氧化水平作用。

張曉芹、孫麗霞等[30-31]采用柴胡疏肝散分別干預慢性胰腺炎模型小鼠和免疫性肝損傷模型大鼠。結果表明，柴胡疏肝散可提高慢性胰腺炎模型小鼠和免疫性肝損傷大鼠血清SOD活性，降低MDA含量。提示柴胡疏肝散能提高機體抗氧化酶活性及抗自由基損傷，抑制脂質過氧化。

5 展望

柴胡疏肝散作為經典方劑，在臨床上應用甚廣，療效確切，其有效成分、作用機制等是基礎研究的熱點。大量研究表明，柴胡疏肝散與神經、內分泌、免疫、抗氧化等藥理機制密切相關且在治療疾病中發揮重要作用，僅從單一方面進行研究往往不能較全面地闡明其藥效作用。與柴胡疏肝散關聯的神經、內分泌、免疫3大系統不僅各自具有復雜的生物分子網絡、自身調節和自我反饋功能，而且彼此之間借助于神經遞質、細胞因子和內分泌激素而聯結成更復雜、更龐大的網絡，在更高層次上相互作用、制約。而柴胡疏肝散顯示出明顯的多靶點效應，因此是從多環節、多部位發揮作用的，但目前各藥理機制之間的相互影響、相互作用尚未明確。后續研究應從多系統、多層次、多靶點著手，盡量揭示各作用機制間可能存在的關聯性，從而有利于甄別關鍵機制，為更精簡、高效的中藥復方制劑研發提供參考。

參考文獻：

[1] 陳淑嬌，李燦東，廖凌虹，等.柴胡疏肝散對圍絕經期綜合征肝郁證大鼠海馬雌激素受體和神經遞質的影響[J].中華中醫藥雜志，2013，28（5）：1232-1236.

[2] 禤璇，戎志斌，劉純，等.柴胡疏肝散對肝郁型老年性癡呆大鼠模型行為學及海馬單胺神經遞質的影響[J].深圳中西醫結合雜志，2013，23（3）：129-134.

[3] 王永志，杜儀，韓玉，等.柴胡疏肝散對抑郁癥大鼠海馬神經遞質含量的影響[J].北京中醫藥，2014，33（1）：50-53.

[4] 劉英，徐愛軍，田艷霞，等.柴胡疏肝散對抑郁癥大鼠海馬5-HT及5-HT1A表達的影響[J].河北北方學院學報：自然科學版，2013，29（5）：65-67，70.

[5] 鄧穎，張春虎，張海男，等.柴胡疏肝散及其拆方對抑郁模型大鼠行為及海馬、杏仁核、額葉BDNF及其受體TrkB的影響[J].中國中西醫結合雜志，2011，31（10）：1373-1378.

[6] SU Z H， JIA H M， ZHANG H W， et al. Hippocampus and serum metabolomic studies to explore the regulation of Chaihu-Shu-Gan- San on metabolic network disturbances of rats exposed to chronic variable stress[J]. Mol Biosyst，2014，10（3）：549-561.

[7] 杜雅薇.柴胡疏肝散對肝郁證模型大鼠腦海馬磷酸二酯酶-4及其亞型表達的影響[J].中華中醫藥學刊，2014，32（1）：178-180.

[8] 徐愛軍，劉昊，田艷霞，等.柴胡疏肝散對抑郁癥大鼠行為學和海馬神經元凋亡及自噬的影響[J].吉林大學學報：醫學版，2014，40（4）：801-804.

[9] 樊蔚虹，姚建平，趙文景.柴胡疏肝散對卒中后抑郁大鼠海馬組織Bcl-2，Bax蛋白表達的影響[J].中國實驗方劑學雜志，2011，17（3）：181- 183.

[10] 李生強.柴胡疏肝散對圍絕經期綜合征肝郁證大鼠模型海馬ERK1/2的影響[J].中華中醫藥雜志，2014，29（10）：3201-3204.

[11] WANG S E. Effect of Chaihu Shugan San and its components on expression of ERK1/2 mRNA in the hippocampus of rats with chronic mild unpredicted stressed depression[J]. Journal of Central South University（Medical Science），2011，36（2）：93-100.

[12] QIU J， HU S Y， ZHANG C H， et al. The effect of Chaihu-Shugan-San and its components on the expression of ERK5 in the hippocampus of depressed rats[J]. Journal of Ethnopharmacology，2014，152（2）：320-326.

[13] 樊蔚虹，禹方，姚建平.柴胡疏肝散對慢性應激抑郁模型大鼠海馬調節HPA軸功能的影響[J].中國中醫基礎醫學雜志，2015，21（1）：50-52.

[14] 杜雅薇，王玉來，尹嶺，等.柴胡疏肝散對肝郁證模型大鼠行為學及血液ACTH、CORT的影響[J].北京中醫藥大學學報：中醫臨床版，2010， 17（2）：1-3.

[15] 李云輝，張春虎，王素娥，等.柴胡疏肝散對慢性應激抑郁模型大鼠行為及血漿促腎上腺皮質激素釋放激素和促腎上腺皮質激素的影響[J].中西醫結合學報，2009，7（11）：1073-1077.

[16] 李生強，陳淑嬌，梁文娜，等.柴胡疏肝散對圍絕經期綜合征肝郁證大鼠下丘腦-垂體-腎上腺軸的調節作用[J].福建中醫藥大學學報，2013， 23（6）：27-29.

[17] 王玉杰，謝鳴，楊柳倩，等.疏肝、健脾、疏肝健脾方對肝郁脾虛證模型大鼠T3、T4、TRH、TSH的影響[J].北京中醫藥大學學報，2010，33（6）：381-384.

[18] 王琦，韓云志，尚立芝，等.柴胡疏肝散聯合他莫昔芬對大鼠乳腺增生的干預作用[J].中醫學報，2016，31（11）：1734-1737.

[19] 敖海清，徐志偉，嚴燦，等.柴胡疏肝散及逍遙散對慢性心理應激大鼠血清皮質酮及胃腸激素的影響[J].中藥新藥與臨床藥理，2007，18（4）：288-291.

[20] 李雪萍，張楨，雷鳴.柴胡疏肝散對便秘模型大鼠便質及腸道蠕動功能的影響[J].吉林中醫藥，2014，34（3）：282-285.

[21] 凌江紅，韋連明，張鈺琴，等.疏肝理氣法對功能性消化不良大鼠下丘腦和胃竇胃泌素、生長抑素表達的影響[J].中國中藥雜志，2010，35（22）：3069-3073.

[22] 李奇.中藥免疫增強劑的研究概況[J].中國藥房，2012，23（39）：3737-3740.

[23] 賀立娟，王玉來，馬玉峰，等.柴胡疏肝散對肝氣郁結證大鼠行為學及血漿IL-6、TNF-α的影響[J].北京中醫藥，2012，31（5）：380-382.

[24] 盧文生，蔣欽云，陸永經，等.柴胡疏肝散對腸易激綜合征大鼠血清IL-6、TNF-α和5-HT的影響[J].內蒙古中醫藥，2013，32（25）：1-2.

[25] 尚立芝，季書，王琦，等.柴胡疏肝散抗肝纖維化作用研究[J].中藥藥理與臨床，2014，30（5）：8-11.

[26] 金玲，楊欽河，張玉佩，等.疏肝健脾方藥對非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝組織TNF-α、IL-6及IL-1的影響[J].暨南大學學報：自然科學與醫學版，2012，33（2）：161-166.

[27] 李秋紅，李廷利，黃莉莉，等.中藥抗氧化的作用機理及評價方法研究進展[J].時珍國醫國藥，2008，19（5）：1257-1258.

[28] 任鵬，王林林，許飛虹，等.柴胡疏肝散醇提物的抗氧化活性[J].中國實驗方劑學雜志，2014，20（10）：161-164.

[29] LI S Q. In vitro and in vivo antioxidant effects and the possible relationship between the antidepression efficacy of traditional Chinese medicine formulation Chaihu Shugan San[J]. Chinese Journal of Natural Medicines，2010，8（5）：353-361.

[30] 張曉芹，許小凡，姜婷婷，等.柴胡疏肝散通過抗氧化反應對二氯二丁基酯聯合乙醇誘發小鼠胰腺纖維化的防治作用[J].中國病理生理雜志， 2014，30（10）：1827-1832.

[31] 孫麗霞，周玲玲，袁冬平，等.柴胡疏肝散對大鼠免疫性肝損傷的防治作用[J].中國生化藥物雜志，2012，33（5）：628-630.

（收稿日期：2016-07-11）

（修回日期：2016-11-04；編輯：向宇雁）