12批白芍飲片中芍藥苷含量及二氧化硫殘留的比較

楊曉梅 董麗榮 郭菊玲

1.玉溪市食品藥品檢驗(yàn)所，云南 玉溪 653100； 2. 昆明市食品藥品檢驗(yàn)所，云南 昆明 650100

12批白芍飲片中芍藥苷含量及二氧化硫殘留的比較

楊曉梅1董麗榮2郭菊玲1

1.玉溪市食品藥品檢驗(yàn)所，云南 玉溪 653100； 2. 昆明市食品藥品檢驗(yàn)所，云南 昆明 650100

目的: 通過(guò)對(duì)白芍飲片中芍藥苷的含量及二氧化硫殘留進(jìn)行測(cè)定比較，對(duì)市售白芍飲片的質(zhì)量進(jìn)行分析，了解市售白芍飲片的質(zhì)量狀況，并尋找兩個(gè)指標(biāo)之間的關(guān)聯(lián)性。方法: 芍藥苷含量測(cè)定采用HPLC法，條件為：Agilent Extend-C18色譜柱(5μm，4.6mm×150mm)；流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸溶液(14∶86)；柱溫為30℃；流速為1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm；SO2采用蒸餾法測(cè)定。結(jié)果: 12批不同來(lái)源的白芍飲片中，有5批芍藥苷含量低于《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定，分別為1.0%、0.084%、0.027%、0.12%、0.11%，且這5批二氧化硫殘留量也相對(duì)較高，分別為：73.0mg/kg、315mg/kg、214mg/kg、290mg/kg、292mg/kg。結(jié)論:兩個(gè)指標(biāo)之間存在一定的關(guān)聯(lián)。

白芍飲片；芍藥苷；二氧化硫殘留；比較

白芍為毛茛科植物芍藥PaeonialactifloraPall.的干燥根。春夏兩季采挖，洗凈，除去頭尾和細(xì)根，置沸水中煮后除去外皮或去皮后再煮，曬干，洗凈，潤(rùn)透，切薄片，干燥即得白芍飲片。其性微寒，味苦酸，歸肝、脾經(jīng),具有平肝止痛、養(yǎng)血調(diào)經(jīng)、斂陰止汗之功效[1]。其主要成分為芍藥苷、芍藥苷內(nèi)酯等，具有抗炎、解痙、止痛等藥理作用[2]。筆者以芍藥苷含量和二氧化硫殘留為指標(biāo)，對(duì)12批白芍飲片進(jìn)行分析，并尋找兩指標(biāo)之間的關(guān)聯(lián)性，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 儀器與材料

1.1 儀器 Agilent 1260高效液相色譜儀(G1311C四元泵、G1314B紫外檢測(cè)器、G1329B自動(dòng)進(jìn)樣器、Agilent Chemstation 中文工作站，安捷倫科技公司)；電子天平(島津AEL-200)；超聲波清洗器(天津恒奧 HU10300F)；二氧化硫測(cè)定儀(盛泰 STEHDB-107S)。

1.2 材料 芍藥苷對(duì)照品(批號(hào)：110736-201035，中國(guó)食品藥品檢定研究院，含量以96.5%計(jì))；白芍飲片經(jīng)昆明市食品藥品檢驗(yàn)所董麗榮主管藥師鑒定均為毛茛科植物芍藥(PaeoniaLactifloraPall)的干燥根，市場(chǎng)抽取。乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其它試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 芍藥苷含量測(cè)定[1]

2.1.1 色譜條件 色譜柱：Agilent Extend-C18(5μm，4.6mm×150mm)；柱溫：30℃；流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸溶液(14∶86)；檢測(cè)波長(zhǎng)：230nm；塔板數(shù)均大于2000。

2.1.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對(duì)照品0.01041g至50mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，再精密量取3mL置10mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，即得濃度為60.21μg/mL的溶液。

2.1.3 供試品溶液的制備 取12批不同批次的白芍飲片粉碎(過(guò)二號(hào)篩)，每批精密稱取2份，每份為0.1g，置50mL量瓶中，加稀乙醇35mL，超聲處理(功率240W，頻率45KHz)30min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，用微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.1.4 測(cè)定方法及結(jié)果 分別吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，按“2.1.1”見項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，詳見表1。

表1 白芍中芍藥苷的含量測(cè)定結(jié)果

2.2 二氧化硫殘留物的測(cè)定

2.2.1 試樣處理 將12批不同批次白芍飲片用剪刀剪小后，稱取 5.00g均勻試樣，每批樣品稱取兩份置干燥的燒杯中。

2.2.2 檢測(cè)方法與結(jié)果 將稱好的試樣置入圓底蒸餾燒瓶中，加入250mL水，裝上冷凝裝置，冷凝管下端應(yīng)插入碘量瓶中的25mL乙酸鉛(20g/L)吸收液中，然后在蒸餾瓶中加入10mL鹽酸(1+1)，立即蓋緊，加熱蒸餾。蒸餾5min左右停止蒸餾，取下并合并碘量瓶中的乙酸鉛溶液，用少量純凈水沖洗碘量瓶，洗液一并合并。在檢測(cè)試樣之前需做空白試驗(yàn)。

向乙酸鉛溶液中依次加入10mL濃鹽酸、1mL淀粉指示液(10g/L)，搖勻之后用碘標(biāo)準(zhǔn)滴定液(0.010mol/L)滴定至變藍(lán)且在30s內(nèi)不褪色為止。具體結(jié)果見表2。

表2 二氧化硫殘留物實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.3 數(shù)據(jù)分析 2010年版《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定白芍飲片中芍藥苷的含量應(yīng)不低于1.2%，從表3可以看出芍藥苷含量最高為3.6%，最低為0.027%，12批白芍飲片中有5批低于規(guī)定，芍藥苷含量分別為1.0%、0.084%、0.027%、0.12%、0.11%。其中含量為0.084%、0.027%、0.12%、0.11%的白芍飲片二氧化硫殘留物相對(duì)其他批次高，芍藥苷含量為0.084%的白芍飲片的二氧化硫殘留物為最低值的50倍。

表3 12批次白芍飲片二氧化硫殘留與芍藥苷含量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)匯總表

3 討論

《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版規(guī)定，白芍飲片中芍藥苷的含量應(yīng)不低于1.2%[1]。從上述數(shù)據(jù)可以看出，12批白芍飲片中，芍藥苷含量低于標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的，其二氧化硫殘留物相對(duì)合格批次較高，芍藥苷含量最高與最低二者之間二氧化硫殘留相差50倍。結(jié)果表明，白芍不同樣品經(jīng)硫磺熏制后,芍藥苷含量明顯下降。

硫磺熏制是一項(xiàng)傳統(tǒng)的中藥材產(chǎn)地加工技術(shù)，主要應(yīng)用于難干燥易霉變的中藥材，炮制過(guò)程中使用硫磺熏制，一是可殺死或者抑制附在藥材上的螨蟲和蟲卵，起防蟲作用；二是可殺死或者抑制附在藥材上的霉菌，起防霉、防腐作用；三是可把藥材表皮漂白，使藥材外觀好看，以便賣個(gè)好價(jià)錢。經(jīng)硫磺熏制，利于中藥飲片的儲(chǔ)存運(yùn)輸，延長(zhǎng)了貨架周期[1,3-4]?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》2010版，白芍的加工炮制并未要求用硫磺熏制，但該加工手段一直在使用。醫(yī)學(xué)研究證明，人體食用硫磺熏蒸過(guò)的中藥材、食物會(huì)破壞消化道和呼吸道系統(tǒng)，使這些器官的黏膜受損，導(dǎo)致變異；另外，還對(duì)肝、腎臟等器官有損害[5]。另外，硫磺在熏蒸過(guò)程中會(huì)與氧結(jié)合，產(chǎn)生二氧化硫。二氧化硫是一種較強(qiáng)的還原劑，其溶于水，產(chǎn)生亞硫酸、硫酸和硫酸鹽，可能會(huì)造成某些藥材有效成分受到破壞，影響藥材質(zhì)量和療效[6]。 因此2015年版《中華人民共和國(guó)藥典》[10]中增加了對(duì)白芍飲片中二氧化硫殘留量的檢測(cè)。

硫磺熏制之所以在全國(guó)各地長(zhǎng)期普遍使用，直接原因是暫時(shí)沒有找到一種新的方法來(lái)代替它，若想在全國(guó)范圍內(nèi)取消硫磺熏制方法在中藥材中的應(yīng)用，需要進(jìn)一步尋找其它可代替的方法。因此，加強(qiáng)中藥材產(chǎn)地加工和中藥飲片儲(chǔ)存保管方法的研究勢(shì)在必行。規(guī)范藥材飲片硫黃熏制工藝是為了限制硫黃使用，控制二氧化硫含量，而尋找替代方法才是解決問(wèn)題的根本，近年來(lái)有文獻(xiàn)[7]提出可以對(duì)現(xiàn)代無(wú)損加工干燥技術(shù)(如紅外干燥技術(shù))開展適宜性研究；創(chuàng)制標(biāo)準(zhǔn)化的硫黃機(jī)械設(shè)備，使硫熏制過(guò)程可控，探索研究新型熏制劑等。此外[8]，在果品干燥方面有冷凍干燥、紅外干燥、微波干燥等現(xiàn)代方法，也有多種護(hù)色劑保持色澤，是否能用于藥材還需要進(jìn)一步研究。

實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)12批白芍飲片中芍藥苷的含量測(cè)定及二氧化硫殘留的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)有5批的芍藥苷含量低于藥典規(guī)定，合格率較低，需要相關(guān)部門加強(qiáng)白芍飲片的生產(chǎn)、流通、銷售渠道的監(jiān)管力度，規(guī)范中藥飲片市場(chǎng)，為臨床用藥提供保障。2015年版《中國(guó)藥典》[10]增訂了白芍藥材與飲片中二氧化硫殘留量的檢查，規(guī)定二氧化硫殘留量不得過(guò)400mg/kg，主要采用方法有酸堿滴定法、氣相色譜法和離子色譜法，但有研究認(rèn)為[9]，現(xiàn)行藥典方法不能準(zhǔn)確檢測(cè)二氧化硫殘留量，有必要進(jìn)行修訂或建立新的高選擇性檢測(cè)方法。

此外，現(xiàn)行藥典中白芍的含量測(cè)定是僅以芍藥苷為指標(biāo)進(jìn)行控制，比較單一，一測(cè)多評(píng)和指紋圖譜等方法必將是以后的發(fā)展方向。藥品監(jiān)管部門應(yīng)加強(qiáng)監(jiān)督、抽查力度，以保證白芍等中藥材及飲片的安全性、有效性。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2010版(一部)[S]. 北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:97.

[2]王麗巖, 肖洪彬, 趙銳.芍藥基源植物考證與藥源調(diào)查研究[J].中醫(yī)藥信息, 2009, 26(1): 32-33.

[3]劉靜靜，劉曉，李松林，等.硫磺熏蒸中藥材及飲片的研究現(xiàn)狀[J]. 中草藥,2010,8(41)：1403-1406.

[4]劉歡歡，孔銘，李秀楊，等. 《中國(guó)藥典》二氧化硫測(cè)定法應(yīng)用于白芍藥材檢測(cè)的探討[J].中國(guó)中藥雜志,2014，39(23)：4615-4619.

[5]段煜，秦昆明，鄒娜姝，等.中藥材的硫磺熏制養(yǎng)護(hù)方法-摒棄還是傳承[J].中國(guó)中藥雜志,2013,38(19)：3395-3399.

[6]吳利，梁曉燕，周雄琳，等.硫磺熏蒸工藝對(duì)中藥材二氧化硫含量的影響[J].中國(guó)中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育,2004, 2(11):43-44.

[7]孫艷菲，牛韜，劉靜靜，等.硫黃熏蒸中藥材現(xiàn)狀及解決措施[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2015,17(1)：125-127.

[8]彭月，李雪蓮，銀玲，等，中藥材硫熏法的研究現(xiàn)狀及其二氧化硫殘留量檢測(cè)方法[J].中藥與臨床，2012,3(5):5-8.

[9]高穎，房德敏，馬逾英，等，中藥材硫黃熏蒸干燥加工方法的現(xiàn)狀、問(wèn)題及對(duì)策[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2011,31(6)：506-509.

[10]國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典(一部)[S]. 北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2015:105.

Comparisons of Paeoniflorin Concentration and Sulfur Dioxide Residue in 12 Kinds ofPaeoniaAlbaRadix

YANG Xiaomei1DONG Lirong2GUO Juling1

1.Yuxi Institute For Food and Drug Control，Yunnan，Yuxi 653100，China；2.Kunming Institute For Food and Drug Control，Yunnan，Kunming 650100，China

Objective Determine of the content of paeoniflorin and SO2residue in radix paeoniae alba to analyze the quality of radix paeoniae alba sold, understand the status of the quality of radix paeoniae alba, and find the relationship between the two indicators.Methods HPLC was used to determinate the content of paeoniflorin；SO2residues was determined using iodometric titration.Results There are 5 slices of paeoniflorin content is lower than thePharmacopoeiaofthePeople'sRepublicofChinaregulation,1.0%, 0.084%, 0.027%,0.12% and 0.11% respectively, and the 5 batch of sulfur dioxide residue is relatively high,73.0μg/kg、315μg/kg、214μg/kg、290μg/kg、292μg/kg respectively.Conclusion sulfur dioxide residue has a certain influence on the content of paeoniflorin.

Radix Paeoniae Alba; Paeoniflorin; SO2Residue;Comparisons

楊曉梅(1982-)，女，漢族，主管藥師，研究方向?yàn)橹兴幉募爸谐伤帣z驗(yàn)、業(yè)務(wù)技術(shù)管理。E-mail：75524248@qq.com

R284.2

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2017-05-24 編輯：程鵬飛)