IgG、Integrinβ6、P16在人腦膠質瘤中的表達及其臨床意義

張緒美　徐政秀　張燕

【摘要】目的 探討IgG、Integrinβ6（整合素β6）、P16在人腦膠質瘤中的表達及其與患者預后的關系。方法 采用免疫組化SP二步法檢測IgG、Integrinβ6、P16在55例膠質瘤和20例正常腦組織中的表達，原位雜交檢測IgG mRNA在膠質瘤組織中的表達。結果 IgG、Integrinβ6、P16的表達陽性率在正常腦組織與膠質瘤組均有顯著性差異（P均<0.05），膠質瘤中IgG 與Integrinβ6的表達呈正相關（P<0.05），IgG與P16表達呈負相關（P<0.05）。結論 膠質瘤中P16低表達，IgG、Integrinβ6高表達可能在膠質瘤的發生發展中起一定作用。

【關鍵詞】膠質瘤；IgG；Integrinβ6；P16；免疫組化；原位雜交

【中圖分類號】R739.41 【文獻標識碼】A 【文章編號】ISSN.2095-6681.2017.02..02

【Abstract】Objective To investigate the expression of IgG、Integrinβ6 and P16 in human glioma.Methods The expression of IgG、Integrinβ6 and P16 in tissue samples from 55 cases with glioma and 20 cases with normal brain tissue was detected by “SP two steps” of immunohistochemistry.Results Integrinβ6 and P16 between glioma tissue and normal brain tissue（P<0.05）.There was a positive correlation between IgG and Integrinβ6 expression （P<0.05），and negative correlation between IgG and P16 expression （P<0.05）.Conclusion Low expression of P16，over Expression of IgG and Integrinβ6 in glioma might correlate to carcinogenesis.

【Key words】gliomas；IgG；Integrinβ6；P16；immunohistochemistry；FISH

腦膠質瘤起源于腦部神經膠質細胞，是最常見的顱內腫瘤，約占所有顱內腫瘤的45%左右，至今仍是全身腫瘤中預后最差的腫瘤之一。隨著研究的深入，免疫分子在膠質瘤發生發展中的作用成為研究的熱點。本研究應用原位雜交、免疫組化方法檢測正常腦組織、不同級別的人腦膠質瘤中IgG蛋白的表達水平，并探討其與膠質瘤發展的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取濰坊醫學院附屬醫院2012年1月～2014年12月手術切除并經病理證實的膠質瘤標本55例。男性30例，女性25例，年齡11～74歲。按2007年WHO中樞神經系統膠質瘤分類標準進行分級，并將Ⅰ～Ⅱ級歸為低級別組，Ⅲ～Ⅳ級為高級別組，低級別組25例，高級別組30例。另取20例正常腦組織（腦外傷內減壓獲得）作為對照。

1.2 檢測方法

免疫組化SP二步法檢測IgG、Integrinβ6、P16蛋白表達，石蠟標本5μm切片，常規脫蠟入水，熱抗原修復，SP法免疫組化染色，Integrinβ6、P16兩種抗體DAB鏡下控制顯色，IgG抗體AEC鏡下控制顯色。PBS 液代替一抗作陰性對照。

1.3 結果判定

顯微鏡下隨機觀察10個高倍視野，每個視野計數100個細胞。IgG以腫瘤細胞胞漿內出現紅色顆粒為陽性。Integrinβ6陽性染色為棕黃色顆粒， 分布于膠質瘤細胞膜和細胞漿。P16陽性表達位于細胞核，胞質部位出現著色視為陰性。

1.4 統計學方法

采用SPSS 16.0統計學軟件進行統計分析，計數資料采用x2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義

2 結 果

2.1 IgG、Integrinβ6、P16 在膠質瘤中的表達

IgG在膠質瘤組織中表達陽性率為74.5%（41/55），在正常腦組織中表達率0%（0/20），差異有顯著性（P<0.05）；IgG在低級別膠質瘤中的表達率為48%（12/25）， 在高級別膠質瘤中表達率為96.7（29/30）（P<0.05）。Integrinβ6 在正常腦組織中無表達，在膠質瘤中表達陽性率為76.4%（42/55），差異有顯著性（P<0.05）；Integrinβ6 在低級別膠質瘤中的表達率為64.0%（16/25），在高級別膠質瘤中的表達率為86.7%（26/30）（P>0.05）。膠質瘤組織中P16 陽性率為36.4%（20/55），在正常腦組織中表達率為95%（19/20）（P<0.05）；P16在低級別膠質瘤中的表達率為56%（14/25），在高級別膠質瘤中的表達率為20%（6/30）（P<0.05）。

2.2 膠質瘤中IgG 表達與Integrinβ6、P16表達的相關性（見表1）

膠質瘤中IgG與P16表達呈負相關（P<0.05﹚，與Integrinβ6表達呈正相關（P<0.05﹚。

3 討 論

膠質瘤系浸潤性生長物，手術難以切除或根本不能手術，膠質瘤的浸潤和復發是導致患者死亡的主要原因。近年來，隨著研究的深入，免疫靶向治療成為膠質瘤臨床研究的重點，對腫瘤免疫分子的研究也是腫瘤研究的熱點。

免疫球蛋白是一種在機體內含量很高且具有重要功能的蛋白。根據重鏈的不同，免疫球蛋白可分為IgM、IgG、IgA、IgD和IgE五類[1]。IgG通過Fc段和Fc受體結合，介導多種免疫反應，如噬菌作用、細胞內吞作用、抗體依賴細胞介導的細胞毒性作用、炎性介質的釋放以及對B細胞活化和抗體產生的調控作用[2]。經典的免疫學理論認為，免疫球蛋白是B淋巴細胞的特征性產物，其它的體細胞不會表達免疫球蛋白。

IgG主要表達于惡性腫瘤細胞，在正常上皮及良性腫瘤中則處于低表達或無表達的狀態。IgG在上皮性腫瘤細胞的功能，文獻報道[3]，IgG類似生長因子，具有促進腫瘤細胞增殖、抑制凋亡的作用。

對膠質瘤中IgG表達與Integrinβ6、P16表達的相關性分析發現，膠質瘤中IgG與Integrinβ6高表達，二者表達呈正相關，P16低表達，與IgG表達呈負相關，提示三者相互作用，可能在膠質瘤的發生發展中起一定作用。

綜上所述，IgG在膠質瘤腫瘤細胞中的異位表達具有重要的功能和病理學意義，IgG和腦膠質瘤的惡性轉化具有相關性。對這一現象的深入研究，將可能揭示免疫球蛋白新的生理和病理功能，對腫瘤的診斷、預后判斷以及靶向治療提供新的思路。

參考文獻

[1] Amzel，L.M.& Poljak，R.J.Three-dimensional structure of immunoglobulins.Annu Rev Biochem，1979， 48， 961-97.

[2] 薛雨健，張 杰，汪明玉，等.IgG在人腦膠質瘤中的表達及其與OPN、MMP-2、MMP-9、P16的關系.解剖科學進展，2013， Nov，19（6）：513～515，519.

[3] 張朝陽，徐克森，楊廣運，等.反義整合素β6基因對結腸癌細胞作用的研究.中華醫學雜志.2007，October，87（37）：2645-2647.

本文編輯：李 豆endprint