2016年1月和2017年1—2月云南省曲靖市禽流感外環境監測結果分析

朱向暉，陳曉麗，余正權，王秀英，王建紅云南省曲靖市疾病預防控制中心急性傳染病防制科，云南曲靖 655000

2016年1月和2017年1—2月云南省曲靖市禽流感外環境監測結果分析

朱向暉，陳曉麗，余正權，王秀英，王建紅
云南省曲靖市疾病預防控制中心急性傳染病防制科，云南曲靖 655000

目的了解曲靖市外環境中H5、H7、H9亞型禽流感病毒的分布狀況，為曲靖市防控人感染高致病性禽流感提供依據。方法收集2016年1月和2017年1—2月曲靖市采集的外環境禽流感標本，采用RT-PCR方法檢測禽流感病毒核酸，陽性者進一步檢測H5、H7、H9亞型。監測數據采用Excel和統計學軟件進行統計分析。結果2016年1月和2017年1-2月年共采集126份禽流感外環境標本，檢出A型流感病毒核酸陽性標本34份，陽性檢出率26.98%。H9亞型檢出率最高為15.87%；不同采樣場所，活禽交易市場陽性率最高為68.75%；不同采樣部位，清洗禽類污水和案板拭子陽性率較高，分別為57.14%、50.00%。結論曲靖市活禽交易市場有禽流感H5、H7、H9亞型存在，感染人的風險較高，加強活禽市場監管力度及宣傳教育是防控人感染高致病性禽流感的針對性措施。

禽流感；外環境；監測結果

人感染高致病性禽流感是由人類感染禽流感病毒（avian influenza virus,AIV）所引起的人禽共患傳染病[1]，目前，H5N1、H7N1、H7N2、H7N3、H7N7 和 H9N2 亞型禽流感病毒能感染人[2]。2005年中國大陸發現第1例人感染高致病性H5N1禽流感病例，2013年第1次發現人感染H7N9禽流感病例，均引發社會極大關注[3-4]。為了解曲靖市人禽流感的流行現狀，評估曲靖市人禽流感的發生風險，以便采取有針對性的防控措施，曲靖市疾病預防控制中心根據云南省監測方案，開展了禽類動物環境中禽流感病毒的監測。現對2016年1月和2017年1—2月曲靖市主城區家禽養殖區和農貿市場等環境中的禽流感病毒H5、H7、H9亞型的流行分析如下。

表1 2016年1月和2017年1-2月年曲靖市外環境禽流感病毒核酸檢測結果

表3 2016年1月和2017年1-2月年曲靖市不同種類標本禽流感病毒核酸檢測結果

1 材料與方法

1.1 實驗材料

標本收集按照《云南省高致病性禽流感環境監測方案》要求，2016年1月、2017年1—2月，共開展環境標本采集3次，每次42份標本，共126份標本。期間，選擇家禽規模養殖戶、家禽散養戶、活禽交易市場，采集標本含：禽類糞便、籠具表面擦拭物、案板拭子、清洗禽類的污水、禽類飲水或食物等。

1.2 標本檢測

標本檢測從環境標本中提取病毒RNA后，以實時熒光量RT-PCR檢測禽流感病毒核酸FluA，陽性者進一步檢測 H5、H7、H9 亞型。

1.3 檢測方法及儀器

主要檢測試劑和儀器RNA提取試劑盒 (貨號為74104)與 Quanti Tect Probe RT-PCR Kit(貨號為 204443)均由QIAGEN公司生產。病毒核酸檢測試劑盒由北京金豪制藥股份有限公司生產。主要檢測儀器設備為低溫高速臺式離心機、旋渦混合器、二級生物安全柜、Agilent Technologies MX3000P實時熒光定量PCR儀。實驗所用各種引物、探針均由上海Invitrogen公司合成提供，所有試劑、耗材均在有效期內使用。

1.4 統計方法

數據分析有關數據錄入Excel 2003進行整理，通過Excel 2003和SPSS 17.0統計學軟件進行統計分析，主數資料用（%）表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 外環境型禽流感病毒核酸檢測結果

陽性標本檢出情況：2016—2017年共3次采集并檢測各類禽流感環境標本126份。檢出病毒核酸陽性標本34份，陽性檢出率26.98%。各次陽性檢出率差別不大（χ2＝0.08，P＞0.05），H9 亞型禽流感病毒陽性檢出率明顯高于其他亞型，為 15.87%（χ2＝30.42，P＜0.05），見表 1。

2.2 不同監測場所禽流感病毒檢出率

監測場所分布陽性率活禽交易市場為68.75%，家禽規模養殖戶為2.38%，家禽散養戶未檢出，差異有統計學意義（χ2＝68.70，P＜0.01），表明禽流感病毒主要傳播于活禽交易市場。見表2。

表2 2016年1月和2017年1-2月年曲靖市不同監測場所禽流感病毒檢出情況

2.3 不同種類標本禽流感病毒核酸檢測結果

標本來源分布從不同類型的標本中均檢出禽流感病毒核酸，檢出率從高至低分別為：清洗禽類污水57.14%、案板拭子50.00%、籠具表面擦拭物36.36%、禽類糞便21.74%、禽類飲水或食物12.50%，不同類型標本陽性檢出率差異有統計學意義（χ2＝10.91，P＜0.05），見表3。

3 討論

從2016年1月和2017年1—2月曲靖市禽流感外環境標本監測結果來看，近年來曲靖市涉禽環境禽流感病毒較活躍，H5、H7、H9亞型均檢出，其中H9檢出率較高。 總陽性率高于肇慶[5]、貴陽[6]、淮安[7]等地。

不同監測場所的檢測結果表明：曲靖市活禽交易市場檢出率明顯高于家禽規模養殖戶和家禽散養戶。曲靖市的活禽銷售來源除本地養殖外，還從廣西、貴州等地大量購入活禽，市場上匯聚了來自不同地方的禽類，增加了禽流感發病的風險。

不同標本來源的檢測結果表明：曲靖市禽流感外環境標本病毒檢出率由高至低依次是:清洗禽類污水、案板拭子、籠具表面擦拭物、禽類糞便、禽類飲水或食物。

提示禽流感病毒既存在于禽體中，又可廣泛分布于污水、案板及糞便等各種外環境中。清洗禽類污水、案板拭子的陽性率最高，提示活禽交易從業人員及購買人員是禽流感傳播的高危人群。

經呼吸道傳播是人感染禽流感病毒的主要傳播途徑[8]。城鄉活禽市場禽類來源復雜,污染機會多,存在病毒循環的條件是禽流感病毒傳播的一個重要渠道[9]。為此，建議曲靖市有關部門加強活禽市場監管力度，鼓勵從業人員加強個人防護；在曲靖主城區實施活禽市場一日一清洗、一周一消毒、一月一休市的措施，休市期間禽類動物需全部撤出市場，對市場內的籠具、案板、環境進行清洗和消毒，同時做好活禽跨地區運輸和檢疫的工作。另外，應定期開展活禽市場、養殖業、農村散養禽類及外環境禽流感病毒監測，發現陽性結果及時處理。同時應加強對活禽市場從業人員的宣教，做好風險溝通。

[1]中華人民共和國衛生部.人禽流感診療方案[S].北京:中華人民共和國衛生部,2008.

[2]王隴德.人感染高致病性禽流感[M].北京:人民衛生出版社,2007.

[3]胡世雄,孫倩萊,劉富強,等.2009-2011年湖南省禽流感外環境監測結果分析[J],疾病監測,2014,29(3):207-209.

[4]宋蕊,成軍.認識甲型H7N9禽流感[J].首都醫科大學學報,2013,30(3):475-478.

[5]朱碧柳,黃國華,麥煒,等.2011-2013年肇慶市禽流感職業暴露人群及外環境病毒分布監測分析[J].現代預防醫學,2015,42(8):1386-1388.

[6]曾樂,洪峰,陸朝國,等.貴陽市禽類相關外環境1013份標本中禽流感病毒檢測結果分析[J].現代預防醫學,2016,43(18):3311-3313.

[7]高強,蘇琦,范剛,等.2011—2013年淮安市職業暴露人群血清學和環境禽流感監測分析[J].現代預防醫學,2015,42(3):410-411.

[8]人禽流感專家組.中國高致病性禽流感A/H5N1病毒感染病例臨床管理專家共識（草案）[J].中華結核和呼吸雜志,2009,32(5):329-334.

[9]陳燕萍,朱榮健,陳婷,等.2010—2012年南寧市職業暴露人群血清學和環境高致病性禽流感監測分析[J].職業與健康,2013,29(23):3066-3068.

Analysis on the Monitoring Results of Avian Influenza External Environment in Qujing,Yunnan from January 2016 and January to February 2017

ZHU Xiang-hui,CHEN Xiao-li,YU Zheng-quan,WANG Xiu-ying,WANG Jian-hong
Department of Prevention and Control of Acute Infectious Disease,Qujing Disease Prevention and Control Center,Qujing,Yunnan Province,655000 China

s]ObjectiveThis paper tries to understand the distribution of H5,H7 and H9 subtype avian influenza viruses in external environment in Qujing,Yunnan province,and provide evidence for the prevention and control of human infection with avian influenza virus.MethodsExternal environment samples in Qujing from January 2016 and January to February 2017 were collected and avian influenza virus nucleic acid was tested by RT-PCR;the positive samples were exposed to further H5,H7 and H9 subtype testing;the results were analyzed by Excel and software.ResultsA total of 126 external environment samples were collected from January 2016 and January to February 2017 and 34 were tested of influenza A virus nucleic acid positive,accounting for 26.98%.H9 subtype positive detection rate reached 15.87%;as for different collecting places,the highest positive detection rate occurs in live poultry markets,amounting to 68.75%;as for different collecting places,the highest positive rates occur in poultry washing water and slaughtering board,amounting to 57.14%and 50.00%respectively.ConclusionH5,H7 and H9 subtype avian influenza virus existed in the external environment in Qujing,such as those live poultry markets,and the risk of human infection was high.The targeted measures to prevent and control human infection with avian influenza virus should be strengthened;the management of live poultry markets and more publicity of health education should be increased.

Avian influenza virus;External environment;Monitoring result

R1

A

1672-5654（2017）08（b）-0008-03

2017-05-11）

10.16659/j.cnki.1672-5654.2017.23.008

朱向暉（1973-），男，云南曲靖人，本科，副主任醫師，主要從事疾病監測與控制工作。