全腔鏡食管癌根治術聯合TP化療方案對食管癌患者血清腫瘤相關因子及survivin蛋白表達的影響

梁敏++++++付茂勇++++++王烈++++++梁維維++++++張小燕

[摘要] 目的 探討全腔鏡食管癌根治術聯合TP化療方案對食管癌患者血清腫瘤相關因子及survivin蛋白表達的影響。 方法 選擇2010年8月～2013年8月川北醫學院附屬醫院接受食管癌治療的100例患者，依據隨機數字表法分為對照組和觀察組，對照組50例患者僅接受全腔鏡食管癌根治術，觀察組50例患者在對照組基礎上行術前TP化療。觀察兩組手術時間、術中出血量、下床活動時間、并發癥發生率和預后情況，同時比較兩組治療前后血清腫瘤標志物[可溶型MHC-Ⅰ類鏈相關蛋白A（sMICA）、轉錄因子YY1（YY1）、細胞角蛋白19片段抗原21-1（Cy-fra21-1）]、血清腫瘤惡性生物學標志物[基質金屬蛋白酶-9（MMP-9）、CD44v、血管內皮生長因子（VEGF）]及survivin蛋白水平。 結果 治療后，兩組sMICA、Cyfra21-1、MMP-9、CD44v、VEGF、survivin蛋白水平均較治療前降低（P < 0.05），其中觀察組sMICA、YY1、Cyfra21-1、MMP-9、CD44v、VEGF、survivin蛋白明顯低于對照組（P < 0.05）。觀察組術中出血量顯著少于對照組，下床活動時間顯著短于對照組（P < 0.05），兩組手術時間比較差異無統計學意義（P > 0.05）。對照組術后并發癥發生率顯著高于觀察組（P < 0.05）。對照組患者3年生存率顯著低于觀察組（P < 0.05）。 結論 全腔鏡食管癌根治術聯合TP化療能夠有效下調血清腫瘤相關因子、survivin蛋白表達，療效顯著、并發癥發生率低，值得臨床推廣。

[關鍵詞] 全腔鏡；TP化療方案；食管癌；血清腫瘤相關因子；survivin蛋白

[中圖分類號] R735.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2017）08（b）-0075-05

[Abstract] Objective To explore the effect of thoracoscopic and laparoscopic esophagectomy combined with TP chemotherapy on serum tumor-related factors and survivin protein expression of esophageal cancer patients. Methods 100 cases of esophageal cancer patients treated in Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College from August 2010 to August 2013 were selected. All patients were divided into control group and observation group according to the random number table method， thoracoscopic and laparoscopic esophagectomy was used in control group （50 cases）， TP chemotherapy before surgery on the basis of control group was applied in observation group （50 cases）. The surgery time， intraoperative bleeding， postoperative activity time， incidence rate of complication and prognosis between two groups were observed. Serum tumor markers [soluble major histo-compatibility complex class Ⅰ chain-related protain A （sMICA）， transcription factor YY1 （YY1）， cytokeratin 19 fragment antigen21-1 （Cyfra21-1）]， malignant biological markers of serum tumors [matrix metalloprotein-9 （MMP-9）， CD44v， vascular endothelial growth factor （VEGF）] and serum survivin protein of two groups were compared. Results The sMICA， YY1， Cyfra21-1， MMP-9， CD44v， VEGF， survivin protein of two groups after treatment were lower than before treatment （P < 0.05）. The sMICA， YY1， Cyfra21-1， MMP-9， CD44v， VEGF， survivin protein of observation group after treatment were lower than those of control group （P < 0.05）. The intraoperative bleeding of observation group was less than that of control group （P < 0.05）. The postoperative activity time of observation group was shorter than that of control group （P < 0.05）. There was no significant difference in operation time between two groups （P > 0.05）. The incidence rate of postoperative complication in control group was significantly higher than that in observation group （P < 0.05）. 3-year survival rate of control group was significantly lower than that of observation group （P < 0.05）. Conclusion Thoracoscopic and laparoscopic esophagectomy combined with TP chemotherapy can significantly decrease the levels of serum tumor-related factors and serum survivin protein expression. Efficacy is significant， the incidence rate of complication is low. It is worthy of clinical promotion.endprint

[Key words] Thoracoscopic and laparoscopic esophagectomy； TP chemotherapy； Esophageal cancer； Serum tumor-related factor； Survivin protein

食管癌是消化道常見惡性腫瘤，約占全身惡性腫瘤的3%，也是當今國內外死亡率和發病率增長最快的癌癥之一，威脅人體健康[1-4]。由于食管癌早期癥狀不典型，多數患者發現時已屬中、晚期，單純手術治療效果不佳，術后5年生存率只有15%[5]。而紫杉醇與順鉑聯合應用的TP化療方案能消除微轉移病灶，縮小腫塊，有利于后期手術治療[6]。最近報道顯示，可溶型MHC-Ⅰ類鏈相關蛋白A（soluble major histo- compatibility complex class Ⅰ chain-related protain A，sMICA）、轉錄因子YY1（transcription factor YY1，YY1）和細胞角蛋白19片段抗原21-1（cytokeratin 19 fragment antigen21-1，Cy-fra21-1）是血清中重要腫瘤標志性分子，而基質金屬蛋白酶-9（matrix metalloprotein-9，MMP-9）、CD44v、血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是腫瘤惡化的重要標志物，因此研究腫瘤標志性分子和腫瘤惡化標志物對于監控癌癥患者的病情十分必要[7-10]。survivin蛋白是凋亡抑制蛋白（IAP）家族的成員之一，survivin蛋白的高表達與腫瘤組織的增殖呈顯著正相關，并與細胞凋亡呈負相關，提示survivin蛋白可以促進癌細胞的增殖，增加癌癥惡化的風險[11-12]。故本研究考察全腔鏡食管癌根治術聯合輔助化療對食管癌患者血清腫瘤相關因子及血清survivin蛋白的影響，探求全腔鏡食管癌根治術聯合輔助化療治療食管癌的具體機制及臨床效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2010年8月～2013年8月川北醫學院附屬醫院（以下簡稱“我院”）接受食管癌治療的100例患者為研究對象，采用隨機數字表法分為對照組和觀察組，其中對照組50例，男25例，女25例；年齡36～69歲，平均（50.4±3.1）歲；TNM分期：T1N1M0期11例，T1N2M0期8例，T2N0M0期3例，T2N1M0期12例，T2N2M0期10例，T3N1M0期6例。觀察組50例，男27例，女23例；年齡38～70歲，平均（51.3±5.3）歲；TNM分期：T1N1M0期9例，T1N2M0期9例，T2N0M0期5例，T2N1M0期12例，T2N2M0期11例，T3N1M0期4例。兩組患者一般資料比較，差異無統計學意義（P > 0.05），具有可比性。本研究經我院倫理委員會批準執行。

納入標準：①經內鏡檢查，血液檢查，腹部超聲，頭、胸、腹部CT，上消化道造影和骨掃描檢查確診為食管鱗癌；②未發生遠處轉移；③未接受其他的抗腫瘤治療；④無胸腔手術史者；⑤對本研究知情且自愿簽署知情同意書者。

排除標準：①合并其他類型腫瘤者；②有嚴重血液系統疾病、感染性疾病、心力衰竭以及重大手術史患者；③有手術禁忌者；④有食管外轉移現象者。

1.2 治療方法

對照組僅進行全腔鏡食管癌根治術。患者左側臥位，取腋中線與第7肋間做切口為觀察孔，腋后第8肋間作切口為超聲刀孔，腋前線與第5肋間交點做切口為拉鉤孔，肩胛下角線與第8肋間的交點做切口為操作鉗孔。在食管的下端游離一段食管并用套帶套住，分別向上向下游離至頸部和食管裂孔，并清掃胸腹腔及各系統淋巴結。之后，患者改平臥位，氣腹針在患者臍上穿刺，以建立人工氣腹。并在臍上緣、左鎖骨中線肋緣下、平臍左腹直肌外側及右鎖骨中線肋緣下分別建立觀察孔、主操作孔、超聲刀孔及輔助操作孔。之后，游離胃，向右至幽門，向左至賁門，并清掃胃左淋巴結。在腔鏡下，使用直線切割縫合器，將胃裁剪成管狀，游離食管，氣囊注水擴張食管裂孔，并將管狀胃送入右側胸腔。之后，在左側胸鎖乳突肌前緣做一個切口，拉出管狀胃，食管-胃端端吻合后，閉合胸部、腹部及頸部的手術切口。

觀察組則在術前進行輔助化療[13]，完成2周期化療1個月后再行全腔鏡手術治療，具體方案如下：分別于化療第1、8天給藥紫杉醇（寧波綠之健藥業有限公司，生產批號20110331），總劑量為175 mg/m2。另外于化療第1～4天每天給予順鉑（德州德藥制藥有限公司，生產批號20140204）30 mg/m2。化療期間，于第4、9天進行肝、腎功能及血常規復查，明確肝、腎功能損傷及骨髓抑制情況；每化療周期（8 d）后進行肝、腎功能、血常規及胸部CT的復查；每個化療周期間隔4周。

1.3 觀察指標

比較兩組患者的手術時間、術中出血量和下床活動時間，觀察兩組患者術后并發癥發生率及預后等。并于患者術前1 d及術后1周，采集其肘靜脈外周血4～5 mL，以3000×g的離心力離心10 min后，取上清儲存于-80℃冰箱待測。采用Ek-Bioscience生產的ELISA試劑盒檢測血清sMICA、YY1、Cyfra21-1、MMP-9、CD44v、VEGF及survivin蛋白水平，按操作說明進行檢測。

1.4 統計學方法

采用SPSS 19.0統計軟件對數據進行分析和處理，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，采用t檢驗，計數資料采用χ2檢驗，以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者術中及術后指標比較

兩組患者手術時間比較差異無統計學意義（P > 0.05）；觀察組患者術中出血量少于對照組，下床活動時間短于對照組，差異均有統計學意義（P < 0.05）。見表1。endprint

2.2 兩組患者術后并發癥及預后情況比較

對照組患者術后肺部并發癥5例、吻合口瘺2例、胃排空障礙1例、吻合口狹窄2例，并發癥發生率為20.0%（10/50）；觀察組患者發生肺部并發癥1例、胃排空障礙1例、喉返神經損傷1例，并發癥發生率為6.0%（3/50），兩組比較差異有統計學意義（χ2=4.332，P=0.037）。對照組患者3年的生存率為60.00%（30/50），觀察組3年生存率為82.00%（41/50），兩組比較差異有統計學意義（χ2=5.877，P=0.015）。

2.3 兩組患者血清腫瘤標志物含量比較

治療前，兩組患者sMICA、YY1及Cyfra21-1血清腫瘤標志物含量比較差異無統計學意義（P > 0.05）。治療后，兩組患者sMICA、YY1及Cyfra21-1血清腫瘤標志物含量較治療前明顯降低，差異有統計學意義（P < 0.05），其中觀察組各指標含量明顯低于對照組（P < 0.05）。見表2。

2.4 兩組患者血清腫瘤惡性生物學標志物含量比較

治療前，兩組患者MMP-9、CD44v及VEGF血清腫瘤惡性生物學標志物含量比較差異無統計學意義（P > 0.05）。治療后，兩組患者MMP-9、CD44v及VEGF血清腫瘤惡性生物學標志物含量較治療前明顯降低，差異有統計學意義（P < 0.05），其中觀察組各指標含量明顯低于對照組（P < 0.05）。見表3。

2.5 兩組患者血清survivin蛋白水平比較

治療前，兩組患者血清survivin蛋白水平比較差異無統計學意義（P > 0.05）。治療后，兩組患者survivin蛋白水平較治療前明顯降低，差異有統計學意義（P < 0.05），其中觀察組明顯低于對照組（P < 0.05）。見表4。

3 討論

我國是世界上食管癌高發區之一，每年約有15萬人死于食管癌，且多發于40歲以上的男性患者[14]。目前，食管癌臨床上主要采用手術、化學治療、放射治療等手段聯合治療，但半數以上的中、晚期食管癌患者生存時間短于1年。TP化療方案作為一種全身化療，包括紫杉醇與順鉑兩種抗癌藥物。紫杉醇通過促進微管蛋白集聚，使癌細胞增殖停滯在G2/M期；而順鉑通過P53依賴途徑，激活細胞周期蛋白依賴性激酶（CDK）抑制因子，下調CDK表達，使癌細胞停滯在G1期，達到抑制癌細胞增殖分化的作用[14-15]。TP化療方案一般在手術或放療前進行，可以使中、晚期腫瘤患者的腫瘤體積縮小，提高手術可切除率，降低亞臨床轉移病灶轉移率，延長患者生存時間[15-16]。本研究顯示，觀察組患者術中出血量和術后下床時間較對照組顯著降低（P < 0.05），并可減少全腔鏡食管根治術產生的并發癥（P < 0.05）。術前聯合TP化療不僅能抑制癌細胞增殖，促進癌細胞凋亡，有利于腫瘤病灶的縮小；而且腫瘤病灶縮小，使全腔鏡的手術視野更為清晰，有利于腫瘤切除及相關組織的分離，避免手術過程中對于周邊正常組織如肺臟的損傷。術前行TP化療可以有效抑制食管癌細胞轉移、累積及浸潤，緩解術后晚期食管癌患者惡性腫瘤負荷效應[15-17]。

sMICA、Cyfra21-1、MMP-9與CD44v在腫瘤的發展以及轉移中起關鍵作用，與腫瘤的浸潤以及轉移密切相關[18-20]。轉錄因子YY1屬于鋅指類轉錄調節因子，主要參與調節細胞增殖、細胞周期及細胞分化等過程[21]。而VEGF參與新生血管形成，該因子的過表達直接影響腫瘤微血管密度，是食管癌細胞侵入、增殖以及遷移的重要病理生理學基礎[22]。本研究表明，觀察組患者sMICA、YY1、Cyfra21-1、MMP-9、CD44v、VEGF等血清指標明顯低于對照組（P < 0.05）。TP方案中的紫杉醇及順鉑能夠有效抑制上述因子的表達，抑制腫瘤細胞黏附、趨化過程，起到抑制腫瘤發展轉移作用，并能有效降低食管癌患者體內CD44v水平，抑制淋巴轉移過程；且高表達的CD44v與食管癌患者存活時間短、預后差明顯相關[15-19]。并推測這可能與TP化療方案有助于控制轉移病灶，降低其侵襲能力有關。

survivin蛋白是迄今發現的凋亡抑制作用最強的蛋白，能夠在惡性腫瘤細胞中實現再表達，且直接影響腫瘤的臨床分期、組織學分級及淋巴轉移數目[23]。據報道，食管癌中survivin基因的表達量是肝、腎、腦和心等正常組織的6.1倍，而食管癌細胞中的survivin基因啟動子的表達量是正常組織細胞的28.5倍，表明在食管癌細胞中survivin基因表達增強[24]。牛朝霞[25]認為患者的食管癌與survivin蛋白之間存在密切關系，survivin蛋白高表達患者其預后效果要顯著差于survivin蛋白低表達患者。本研究表明，觀察組3年生存率明顯高于對照組（82.00%和65.22%）（P < 0.05），且兩種方法均能有效降低survivin的表達量（P < 0.05），其中與TP方案聯用能使survivin表達量更低（P < 0.05）。survivin蛋白一方面可以通過組織細胞凋亡通路抑制癌細胞的凋亡，另一方面，通過抑制P53蛋白的表達，使細胞失去P53蛋白對其的監控，有利于細胞的癌變以及癌細胞的增殖。本研究中，患者治療后survivin蛋白表達量降低，表明其癌組織中細胞正常的DNA變異的P53監測體系以及細胞正常凋亡程序已經恢復。

綜上所述，全腔鏡食管癌根治術聯合TP化療能降低血清腫瘤標志物及survivin蛋白水平，提高療效，減少并發癥，值得臨床推廣應用。

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