阿托伐他汀對高血壓患者血管內皮細胞損傷修復及PERK、IRE1α、BiP、Ero1-Lα蛋白表達的影響

林 捷 阮長武 葛智儒 黃 宇

(上海市浦東新區公利醫院心血管內科，上海 200135)

阿托伐他汀對高血壓患者血管內皮細胞損傷修復及PERK、IRE1α、BiP、Ero1-Lα蛋白表達的影響

林 捷 阮長武 葛智儒 黃 宇

(上海市浦東新區公利醫院心血管內科，上海 200135)

目的探討阿托伐他汀對高血壓患者血管內皮細胞損傷修復及PERK、IRE1α、BiP、Ero1-Lα蛋白表達的影響。方法88例高血壓患者通過隨機數表法分為研究線和對照組各44例。對照組采用高血壓基礎干預措施，研究組在對照組干預基礎上加用阿托伐他汀，兩組均持續治療2個月。對比兩組臨床療效，分析治療前后兩組內質網應激(ER stress)標記蛋白(Ero1-Lα、BiP、IRE1α、PERK)、血管內皮功能指標〔內皮素(ET)、一氧化氮(NO)、肱動脈血流介導血管擴張率(FMD)〕、血清炎癥因子〔白細胞介素(IL)-6、腫瘤壞死因子(TNF)-α、高敏C反應蛋白(hs-CRP)〕水平變化。結果研究組總有效率高于對照組(P<0.05)；治療前兩組Ero1-Lα、BiP、IRE1α、PERK光密度值對比無明顯差異(P>0.05)，治療后兩組各指標水平較治療前降低，且研究組均低于對照組(均P<0.05)；治療前兩組ET、NO、FMD水平比較無明顯差異(P>0.05)，治療后兩組各指標水平較治療前改善，且研究組ET水平低于對照組，NO、FMD水平高于對照組(P<0.05)；治療前研究組IL-6、TNF-α、hs-CRP水平與對照組比較無明顯差異(P>0.05)，治療后兩組炎癥因子水平均降低，且研究組均低于對照組(P<0.05)。結論采用阿托伐他汀治療高血壓患者可有效降低PERK、IRE1α、BiP、Ero1-Lα蛋白及血清炎癥因子表達水平，促使血管內皮細胞損傷修復，提高治療效果。

阿托伐他汀；高血壓；血管內皮細胞損傷修復；內質網應激標記蛋白

高血壓發病初期無特異性臨床癥狀，但危害較高，血管、腎、心等均為其生理病理作用主要靶器官〔1〕。高血壓最重要及最早期損害類型為血管內皮細胞損傷，正常生理狀態下，血管內皮細胞對血管收縮因子內皮素(ET)與舒張因子一氧化氮(NO)的分泌維持于動態平衡狀態，可保證血管正常結構及功能，若血壓增高會使ET及NO分泌失衡，損傷內皮細胞，進而引發心腦血管疾病〔2〕。Mason等〔3〕研究指出，高血壓時ET-1分泌量增多可導致血管內皮細胞出現內皮網應激(ER stress)反應，致使細胞損傷及凋亡。阿托伐他汀能否改善高血壓血管內皮細胞損傷等尚缺乏循證醫學證據〔4〕。本研究旨在探討阿托伐他汀對高血壓血管內皮細胞損傷修復及PERK、IRE1α、BiP、Ero1-Lα蛋白表達的影響。

1 資料與方法

1.1一般資料 抽取2015年4月至2016年7月上海市浦東新區公利醫院88例高血壓患者，隨機數表法分為研究組與對照組各44例。對照組女21例，男23例；年齡53～72〔平均(62.37±7.96)〕歲；病程3.4～12.6年，平均(8.31±3.02)年。研究組女19例，男25例；年齡51～73〔平均(62.50±8.01)〕歲；病程3.2～12.8年，平均(8.19±2.97)年。兩組病程、性別、年齡等基線資料無明顯差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2納入及排除標準 (1)納入標準：人民衛生出版社第8版《內科學》中高血壓臨床診斷標準〔5〕；體質量指數(BMI)<30.0 kg/m2；知情同意。(2)排除標準：并發腎實質性高血壓、腎血管性高血壓、藥物性高血壓等繼發性高血壓患者；并發心律失常、心肌病、心力衰竭、心臟瓣膜病者；哺乳期或妊娠期女性；對阿托伐他汀具有過敏史或過敏體質者。

1.3方法 對照組采用高血壓基礎干預措施，包括適量運動、飲食控制等，并給予β受體阻滯劑、血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(ARB)、血管緊張素轉化酶抑制劑(ACEI)、鈣離子通道阻滯劑(CCB)、利尿劑等。研究組在對照組干預基礎上加用阿托伐他汀(浙江新東港藥業股份有限公司，國藥準字H20133127)，晚間睡前口服20 mg/次，1次/d。兩組均持續治療2個月。

1.4觀察指標 (1)統計兩組患者臨床療效，收縮壓降低≥20.0 mmHg或舒張壓降低≥10.0 mmHg為顯效；收縮壓降低10.0～20.0 mmHg或舒張壓降低<10.0 mmHg為有效；舒張壓及收縮壓降低未至上述標準為無效；總有效率=(顯效+有效)/總例數×100.0%〔6〕。(2)分別于治療前后抽取兩組空腹靜脈血3 ml，以細胞免疫化學熒光法對ER stress標記蛋白(Ero1-Lα、BiP、IRE1α、PERK)進行檢測，并通過定量技術計算各指標光密度值。(3)對比治療前后兩組血管內皮功能指標〔ET、NO、肱動脈血管流介導血管擴張率(FMD)〕變化情況，以硝酸還原酶法檢測NO水平，以放射免疫法檢測ET水平，于血管舒張末期對肱動脈內徑予以測量，取平均值為D0，于肘關節以上加壓300.0 mmHg，持續約4 min后迅速放松血壓帶，放氣約15 s后再次測量舒張末期肱動脈內徑為D1，FMD=(D1-D0)D0×100.0%。(4)分別于治療前后通過酶聯免疫吸附法(ELISA)測定兩組血清炎癥因子高敏C反應蛋白(hs-CRP)、腫瘤壞死因子(TNF)-α、白細胞介素(IL)-6水平。

1.5統計學方法 應用SPSS20.0軟件進行t、χ2檢驗。

2 結 果

2.1兩組臨床療效比較 研究組總有效率(93.18%，顯效29例，有效12例，無效3例)高于對照組(77.27%，顯效15例，有效19例，無效10例；χ2=4.422,P<0.05)。

2.2兩組ER stress標記蛋白光密度值比較 治療前兩組PERK、IRE1α、BiP、Ero1-Lα光密度值差異無統計學意義(P>0.05)，治療后兩組各指標水平較治療前降低，且研究組均低于對照組(P<0.05)。見表1。

2.3兩組血管內皮功能指標比較 治療前兩組ET、NO、FMD

表1 兩組ER stress標記蛋白光密度值比較

與治療前比較：1)P<0.05；下表同

水平差異無統計學意義(P>0.05)，治療后兩組各指標較治療前改善，且研究組ET水平低于對照組，NO、FMD水平高于對照組(P<0.05)。見表2。

表2 兩組血管內皮功能指標比較

2.4兩組血清炎癥因子水平比較 治療前兩組IL-6、TNF-α、hs-CRP水平無明顯差異(P>0.05)，治療后兩組炎癥因子水平均降低，且研究組均低于對照組(P<0.05)。見表3。

表3 兩組炎癥因子水平比較

3 討 論

高血壓為臨床常見疾病，明確高血壓發病及進展機制對防治高血壓疾病具有積極意義。血管內皮細胞是全身血管內膜重要屏障結構，同時為機體主要信號感受及傳遞組織〔7〕。內質網為保持血管內皮細胞功能的亞細胞器，適當程度ER stress可有效保護細胞，但持續時間過長會導致內皮細胞損傷、凋亡，進而引發相關反應加速高血壓發病及進展。

內皮功能紊亂始動因素之一為高血壓，血壓水平上升可改變血管內皮細胞結構及功能。張勁松〔8〕研究表明，血壓過高會損傷內皮細胞，且兩者呈正相關關系，脈壓差增大為損傷高血壓患者內皮功能的主要因素。內質網屬真核細胞重要細胞器，是蛋白質折疊、蛋白質成熟及脂類合成的場所之一，質膜蛋白、分泌蛋白、高爾基體蛋白及溶酶體三級與四級結構均于內質網中進行折疊，且內質網是主要信號轉導細胞器，在內環境改變的感應及適應中具有重要作用。若蛋白質錯誤折疊則會引發脂質合成紊亂、鈣離子耗竭等現象，同時，內質網穩態失衡，會激活對應信號通路，引發細胞內多種反應，即ER stress。Jimenez等〔9〕指出，ER stress反應早期可抑制蛋白合成，改善內質網降解過程，并通過恢復內環境穩定而對細胞進行保護，但ER stress持續未得到緩解則會誘導凋亡通路致使細胞死亡。

近些年，ER stress在內皮細胞中的作用得到臨床醫學廣泛重視，并認為其可能介導內皮細胞參與腫瘤、動脈粥樣硬化、糖尿病等疾病生理病理過程。Yang等〔10〕實驗表明，ER stress標記蛋白中，Bip為內質網穩態感受器，在ERstree激活及檢測內質網內未折疊蛋白質聚集中具有重要作用。若內質網處于穩態，則BiP分別與IRE1、ATF6、PERK暴露于內質網腔內的結構域結合，但當內質網穩態失衡，則會引起大量未折疊蛋白聚集，導致BiP與IRE1、ATF6、PERK解離，并與未折疊蛋白質相結合，促使蛋白質正確折疊。本研究結果有力佐證阿托伐他汀對降低PERK、IRE1α、BiP、Ero1-Lα蛋白表達水平、促使高血壓血管內皮細胞損傷修復、提高治療效果方面具有較高臨床價值。阿托伐他汀屬羥甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶抑制劑，可對膽固醇于肝臟中的生物合成過程產生抑制作用，并促使機體對低密度脂蛋白攝取、分解代謝，抗動脈粥樣硬化、調脂效果顯著，可通過降低血管壁炎癥因子表達水平發揮降血壓效果，進而改善內環境，緩解ER stress反應。耿全勝等〔11〕研究表明，阿托伐他汀可激活NOS促使內皮細胞生成NO，并對NOS的mRNA表達水平產生影響，抑制血管平滑肌細胞活性，從多種途徑改善高血壓患者內皮功能。另從本研究表明阿托伐他汀不僅能降低高血壓患者PERK、IRE1α、BiP、Ero1-Lα蛋白水平，緩解ER stress反應，且能降低血清炎癥因子表達水平。Rakotoniaina等〔12〕研究表明，阿托伐他汀除降血脂效果顯著，同時可減少ET生成量，提高NO表達水平，而原發性高血壓患者內皮細胞功能失調主要機制為NO合成量減少、ET大量釋放等，阿托伐他汀可對G蛋白代謝水平產生干擾作用，降低hs-CRP、TNF-α等炎癥因子表達水平，減輕炎癥反應，并抑制神經內分泌活化，以此提高血管內皮功能，改善臨床療效。

1李 敏,孫 玲,李紅玲,等.阿托伐他汀減輕氧化型低密度脂蛋白導致的人微血管內皮細胞活化和損傷〔J〕.中國藥理學通報,2014;30(5):679-83.

2韓 冰,周進超,盧福建.不同劑量阿托伐他汀對高血壓合并高脂血癥患者血管內皮功能的影響〔J〕.實用心腦肺血管病雜志,2014;22(7):70-1.

3Mason JJ,Corbalan RF,Dawoud T,etal.Atorvastatin enhanced nitric oxide release and reduced blood pressure,nitroxidative stress and rantes levels in hypertensive rats with diabetes〔J〕.J Physiol Pharmacol,2015;66(1):65-72.

4陳 偉,張亞西.硝苯地平控釋片聯合阿托伐他汀治療高血壓合并冠心病及對超敏C反應蛋白及血管內皮功能的影響〔J〕.檢驗醫學與臨床,2015;12(1):40-2.

5葛均波,徐永健.內科學〔M〕.第8版.北京:人民衛生出版社,2013:257-68.

6王湘富,賀志偉,張 平,等.貝那普利聯合阿托伐他汀對老年高血壓患者血管內皮舒張功能及高敏C反應蛋白、胰島素水平改善的研究〔J〕.實用老年醫學,2014;28(8):672-4.

7張 玲,張 蕾.阿托伐他汀對高血壓患者血清炎性因子、血管內皮功能及血脂水平的影響〔J〕.海南醫學院學報,2015;21(7):905-7.

8張勁松.氨氯地平聯合阿托伐他汀治療老年高血壓的效果及其作用機制〔J〕.山東醫藥,2015;55(13):40-1.

9Jimenez D,Cremonezzi LI,Juncos NH,etal.Statins reverse renal inflammation and endothelial dysfunction induced by chronic high salt intake〔J〕.Am J Physiol,2011;301(2):263-70.

10Yang L,Gao YJ,Lee RM.The effects of quinapril and atorvastatin on artery structure and function in adult spontaneously hypertensive rats〔J〕.Eur J Pharmacol,2005;518(2):145-51.

11耿全勝,樊超強,李衛平,等.不同劑量的阿托伐他汀鈣對血脂正常的高血壓患者血管內皮功能的影響〔J〕.中國藥房,2014;25(4):348-50.

12Rakotoniaina Z,Guerard P,Lirussi F,etal.The protective effect of HMG-CoA reductase inhibitors against monocrotaline-induced pulmonary hypertension in the rat might not be a class effect:comparison of pravastatin and atorvastatin〔J〕.Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol,2006;374(3):195-206.

〔2017-06-20修回〕

(編輯 袁左鳴/滕欣航)

R543

A

1005-9202(2017)19-4803-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.19.050

上海市浦東新區衛生系統學科帶頭人附帶課題(No.PWRd2015-11)

阮長武(1961-)，男，博士生導師，主任醫師，主要從事心內科疾病研究。

林 捷(1974-)，男，碩士，副主任醫師，主要從事心血管內科疾病研究。