復蘇周期單囊胚移植與雙囊胚、雙卵裂胚移植的臨床結局比較

余秋鋒++賈曉麗

[摘要]目的 探討復蘇周期單囊胚移植與雙囊胚、雙卵裂胚移植的不同臨床結局。方法 回顧性分析2016年1～12月在本中心第一次行FET，年齡≤38歲的320例患者的臨床結局。其中單囊胚組98例，雙囊胚組90例，雙卵裂胚組132例，比較各組患者的臨床妊娠率、胚胎著床率和多胎率。結果 單囊胚組和雙卵裂胚組患者的臨床妊娠率均低于雙囊胚組，差異有統計學意義（P<0.05）。單囊胚組和雙囊胚組患者的胚胎著床率均顯著高于雙卵裂胚組，差異有統計學意義（P<0.01）。單囊胚組患者的多胎率顯著低于雙囊胚組及雙卵裂胚組，差異有統計學意義（P<0.05）。結論 對年齡≤38歲的患者，建議其第一次凍融移植周期行單囊胚移植，在顯著降低多胎率的同時能夠獲得與雙卵裂胚相似甚至更好的臨床結局；不建議移植雙囊胚，以避免過高的多胎率。

[關鍵詞]復蘇周期；單囊胚移植；雙囊胚移植；雙卵裂胚移植；多胎率

[中圖分類號] R492.6 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2017）09（b）-0090-03

Comparison of clinical outcomes of single blastocyst transplantation，double blastocyst transplantation and double cleavage embryo transplantation in resuscitation cycle

YU Qiu-feng JIA Xiao-li

Center of Reproductive Medicine，Maternal and Child Health Care Family Planning Service Center in Shaoguan City，Guangdong Province，Shaoguan 512026，China

[Abstract]Objective To discuss the different clinical outcomes of single blastocyst transplantation，double blastocyst and double cleavage embryo transplantation.Methods The clinical outcomes of 320 patients with first implementation of FET and the age of no more than 38 years old from January to December 2016 in our center were retrospectively analyzed.All patients were divided into single blastocyst transplantation group （n=98），double blastocyst transplantation group （n=90） and double cleavage embryo transplantation group （n=132）.The clinical pregnancy rate，embryo implantation rate and multiple pregnancy rate among three groups were compared.Results The clinical pregnancy rate of the single blastocyst transplantation group and the double cleavage transplantation group were lower than the double blastocyst transplantation group，and the differences were statistically significant （P<0.05）.The rate of embryo implantation in the single blastocyst transplantation group and the double blastocyst transplantation group were significantly higher than that in the double cleavage embryo transplantation group，and the difference was statistically significant （P<0.01）.The multiple pregnancy rate of single blastocyst transplantation group was significantly lower than the double blastocyst transplantation group and the double cleavage embryo transplantation group，the difference was statistically significant （P<0.05）.Conclusion For patients whose age no more than 38 years old，the first freeze-thaw transplantation cycle is recommended for single blastocyst transplantation which can obtain a similar clinical outcome or even better compared with double cleavage embryo transplantation，at the same time significantly decreases the multiple birth rate.The double blastocyst transplantation is not advisable in order to avoid too high multiple pregnancy rate.endprint

[Key words]Resuscitation cycle；Single blastocyst transplantation；Double blastocyst transplantation；Double cleavage embryo transplantation；Multiple pregnancy rate

人類輔助生殖技術歷經30多年的發展，為世界眾多不孕不育家庭帶去了福音。然而，使用輔助生殖技術所帶來的居高不下的多胎妊娠率成為近幾年各中心關注的焦點。多胎妊娠被視為人類輔助生殖技術中的一種并發癥而非成功的助孕結局[1]，因多胎妊娠屬于高危妊娠范疇，其圍生兒死亡率和畸形率與單胎妊娠相比顯著增加[2]。選擇一個高種植潛能的胚胎進行移植被認為是降低多胎率的一項有效策略[3]。近些年伴隨胚胎冷凍解凍技術的不斷成熟、序貫培養液以及三氣培養箱的應用，越來越多醫學中心將全部胚胎或移植后剩余胚胎行囊胚培養后進行冷凍。本研究分別比較了本中心的320例患者第一次凍融單囊胚、雙囊胚、雙卵裂胚移植的臨床結局，以期為臨床醫生選擇移植策略提供參考依據，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

回顧性分析2016年1～12月在本中心第一次行FET，年齡≤38歲的320例患者的臨床結局。排除子宮內膜異位癥及內膜厚度<7 mm的患者。所有操作經我院醫學倫理委員會審核及同意，并在患者充分知情同意情況下行凍融移植。根據移植胚胎情況，分為單囊胚組患者98例，平均年齡（31.7±4.0）歲；雙囊胚組患者90例，平均年齡（32.0±3.9）歲；雙卵裂胚組患者132例，平均年齡（32.2±3.9）歲。三組患者的年齡、決定日內膜等一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

1.2.1胚胎培養及評分

卵裂胚及囊胚均采用序貫培養液（Vitrolife，瑞典）培養。D3天參照Peter卵裂期評分標準[4]并結合中心實際作修改：胚胎發育速度，卵裂球大小均勻，碎片≤5%為1級胚胎；胚胎發育速度正常，卵裂球大小均勻或大致均勻，碎片>5%～20%為2級胚胎；卵裂球大小不均勻，碎片>20%～50%為3級胚胎；卵裂球大小不均勻，碎片>50%為4級胚胎。其中1、2級胚胎為優質胚胎，1、2、3級胚胎為可用胚胎。除少部分無優質胚胎且不愿意培養囊胚者，原則上只冷凍優質胚胎。D5或D6天根據Gardner等[5]囊胚分級系統對囊胚進行評估：處于3～6期的囊胚內細胞數目多，排列緊密為A級；細胞數目少，排列松散為B級；細胞數目很少為C級。3～6期的囊胚滋養層上皮細胞層由較多的細胞組成，結構致密為A級；上皮細胞層由不多的細胞組成，結構松散為B級；上皮細胞層由稀疏的細胞組成為C級。3期以上，內細胞團或滋養層評級B以上為可移植或冷凍囊胚。

1.2.2胚胎冷凍解凍及移植

1.2.2.1胚胎冷凍 使用冷凍液（Vitrolife，瑞典），按使用說明書結合本中心的實際情況冷凍卵裂胚或囊胚。冷凍卵裂胚是于37℃下在1號液中放置5～10 min，轉移至2號液放置2 min后轉移至3號液，并于30 s內裝入載桿并投入液氮中；冷凍囊胚前先用激光放液，然后于37℃下在1號液中放置10～20 min，轉移至2號液放置2 min后轉移至3號液并于45 s內裝入載桿并投入液氮中。

1.2.2.2胚胎解凍 使用解凍液（Vitrolife，瑞典），按使用說明書結合本中心的實際情況解凍卵裂胚或囊胚。卵裂胚解凍在37℃條件下迅速放入1號液，30 s內迅速轉移至2號液1 min，然后轉移至3號液2 min，再轉入4號液5 min，最后轉移至預先平衡好的培養皿過夜培養；囊胚解凍在37℃條件下迅速放入1號液2 min，然后將胚胎轉移至2號液放置3 min，再轉入3號液10 min，最后轉移至預先平衡好的培養皿等待移植。

1.2.2.3胚胎移植 自然周期或激素替代周期內膜準備。所有卵裂胚解凍后均過夜培養后移植，囊胚當天解凍及移植。

1.3觀察指標及評價標準

比較各組患者的臨床妊娠率、胚胎著床率和多胎率，臨床妊娠判斷標準為移植后28 d B超下見孕囊和胎心

1.4統計學方法

采用SPSS 13.0統計學軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差（x±s）表示，多組間比較采用方差分析；計數資料采用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

單囊胚組和雙卵裂胚組患者的臨床妊娠率均低于雙囊胚組，差異有統計學意義（P<0.05），單囊胚組患者的臨床妊娠率與雙卵裂胚組比較，差異無統計學意義（P>0.05）。單囊胚組患者的胚胎著床率與雙囊胚組比較，差異無統計學意義（P>0.05），但單囊胚組和雙囊胚組患者的胚胎著床率均顯著高于雙卵裂胚組，差異有統計學意義（P<0.01）。單囊胚組患者的多胎率顯著低于雙囊胚組及雙卵裂胚組，差異有統計學意義（P<0.05）（表1）。

3討論

相關研究證實[6]，新鮮周期中選擇性地單囊胚移植，能夠在維持累計妊娠率的同時降低多胎妊娠的風險。囊胚移植能提高患者臨床妊娠率和胚胎著床率[7]，而凍融囊胚相比新鮮囊胚更具優勢，凍融胚胎移植通常采取接近自然周期的移植策略，可以有效減少子宮內膜容受性的影響[8]，而良好的種植環境是胚胎種植成功和臨床妊娠的關鍵[9]。囊胚是卵裂期胚胎之后的一個重要發育階段，形態上經歷了細胞融合、囊胚腔出現及囊胚腔擴張的變化，基因調控上經歷了由母型調節向胚胎型調節的轉化。在這過程中，發育潛能差及染色體異常的胚胎大多數發生發育阻滯，質量好的胚胎才能發育至囊胚期。另外有文獻報道稱[10]，囊胚移植更符合自然的生理現象。因為自然生理狀態下，早期胚胎在輸卵管中發育，直到接近囊胚期才進入子宮腔[11-12]。利用囊胚培養技術，待胚胎形成囊胚后再植入子宮腔，使子宮內膜與胚胎發育趨于同步，同時縮短了胚胎移植入子宮腔后進一步發育及著床的時間間隔，且子宮收縮逐漸減少，可減少胚胎排出體外的機會，降低了異位妊娠等并發癥的發生率。endprint

本研究結果提示，單囊胚凍融移植可以獲得與雙卵裂胚凍融移植相似的臨床妊娠率，而雙囊胚凍融移植雖然較單囊胚移植有更高的臨床妊娠率，但多胎率（50.0%）是雙卵裂胚組的（21.9%）的2倍有余，接近單囊胚移植（5.2%）的10倍，單囊胚組患者的多胎率顯著低于雙囊胚組及雙卵裂胚組，差異有統計學意義（P<0.05）。Yanaihara等[13]在研究中，所納入的患者年齡31～38歲，研究發現復蘇周期單囊胚移植與雙囊胚移植的臨床妊娠率沒有明顯差異，其雙囊胚移植組的雙胎率是單囊胚移植組的近8倍，差異有統計學意義（P<0.05），本研究在臨床妊娠率方面的結果與之不一致，可能是由于研究例數較少，但多胎率的結果與該研究基本一致。張波等[14]研究提示，選擇性單囊胚移植的臨床妊娠率與卵裂期胚胎移植比較，差異無統計學意義（47.35%，47.29%，P=0.988），但多胎率顯著降低（0.86%，24.59%，P<0.001）。值得注意的是，其研究中對評為BB級以上的予單囊胚移植，評為BC級及其以下的囊胚予雙囊胚移植。本研究對于3期以上、滋養層或內細胞團其中一項評分為B級以上患者即行單囊胚移植，單囊胚組的臨床妊娠率（59.2%）略高于雙卵裂胚組（55.3%），但差異無統計學意義（P>0.05），多胎率（5.2%）低于雙卵裂胚組（21.9%），差異有統計學意義（P<0.05）。因此，對于年齡≤38歲的患者，無需刻意選擇優質單囊胚移植即可在保證妊娠率的同時有效降低多胎率。另外，單囊胚移植組患者的胚胎著床率與雙囊胚移植組比較，差異無統計學意義（P>0.05），這與陳攀宇等[15]的研究結果不同，分析原因是本研究單囊胚移植的標準為3期以上、內細胞團或滋養層評級其中一項為B級以上，而該研究的單囊胚移植標準為3期以上、內細胞團與滋養層評分同時滿足B級。

綜上所述，對于年齡≤38歲的患者，第一次凍融移植應該建議行單囊胚移植，其能獲得與移植雙卵裂胚相似的臨床妊娠率，提高胚胎著床率，有效降低多胎率，不建議行雙囊胚移植以避免過高的多胎率，但這個結論仍需更多數據支持。

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（收稿日期：2017-07-12 本文編輯：孟慶卿）endprint