上杭縣居民MCV、MCH與地貧基因檢測結(jié)果之分析與研究

華敦洪，莫曉云，黃錦坤，孔春英，胡榮興，謝萬招，賴新連

(福建省上杭縣醫(yī)院，福建 龍巖 364200)

上杭縣居民MCV、MCH與地貧基因檢測結(jié)果之分析與研究

華敦洪，莫曉云，黃錦坤，孔春英，胡榮興，謝萬招，賴新連

(福建省上杭縣醫(yī)院，福建 龍巖 364200)

目的 調(diào)查本縣居民MCV、MCH同時降低的陽性率與地中海貧血的基因分型情況，并對不同年齡、性別對MCV、MCH在地中海貧血篩查中的影響進行研究。方法 通過對二年來在本院住院、門診、健康體檢者108 722例血液分析結(jié)果的統(tǒng)計分析，比較不同人群小細(xì)胞、低色素性貧血的發(fā)病率；對其中1 054例進行地中海貧血基因檢測，并將此結(jié)果作為參考標(biāo)準(zhǔn)計算并觀察MCV和MCH聯(lián)合檢測對地中海貧血篩查的準(zhǔn)確度、特異度、靈敏度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值。計算出本縣居民地中海貧血各基因型的構(gòu)成比。結(jié)果 小細(xì)胞、低色素性貧血的發(fā)病率,在不同的年齡段有較大的差別，嬰幼兒最高，其次是青少年，老年人最低。在15歲前男性高于女性，15歲以后至50歲女性高于男性。MCV和MCH系列聯(lián)合檢測對地貧篩查的靈敏度和陰性預(yù)測值在不同的人群中都高達95%以上，特異性和陽性預(yù)測值卻相對較差，而且在不同的人群具有較大的差別。結(jié)論 小細(xì)胞、低色素性貧血的發(fā)病率,在不同的年齡段有較大的差別，MCV、MCH正常者幾乎可以排除地中海貧血的診斷。但作為診斷指標(biāo)特異性和陽性預(yù)測值卻相對較差，而且在不同的人群具有較大的差別。本縣居民地中海貧血總發(fā)病率約為10.19%；α-地中海貧血基因攜帶率為6.59%；β地中海貧血基因攜帶率為3.60%。子女和其父母的MCV、MCH檢測結(jié)果綜合分析是地中海貧血篩查經(jīng)濟而有效的方法。

地中海貧血；MCV；MCH；臨床篩查；基因檢測

地中海貧血，是由于基因缺陷導(dǎo)致血紅蛋白中至少一種珠蛋白合成缺乏或不足，引起貧血或病理狀態(tài)，是一組常染色體不完全顯性遺傳性疾病[1]。地中海貧血的防治最有效的措施就是全面進行產(chǎn)前篩查，防止中重型患者的出生。基因檢測是地中海貧血診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，但技術(shù)要求較高，在近期內(nèi)無法普及至基層，且因費用較高，難以被推廣。近年來隨著先進的血液分析儀的普及，平均紅細(xì)胞體積（MCV）、平均血紅蛋白含量（MCH）測定已成為各類醫(yī)療機構(gòu)的常規(guī)檢驗項目。MCV、MCH降低（又稱小細(xì)胞、低色素性貧血）在地中海貧血篩查中的應(yīng)用得到普遍重視。本文在對不同年齡、性別人群小細(xì)胞、低色素性貧血發(fā)病率進行調(diào)查分析的基礎(chǔ)上，結(jié)合基因檢測結(jié)果，對MCV、MCH在不同年齡、性別人群中篩查地中海貧血的應(yīng)用價值等方面進行分析與研究，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 MCV、MCH檢測對象為2015年1月～2016年12月到本院住院、門診、健康體檢者108 722例。其中男46 636例，女62 086例。年齡1 d～102歲。地貧基因檢測者來自同期、同類人員1 054例，其中男461例，女593例。年齡3 d～82歲。

1.2 MCV、MCH檢測 采用SYSMEX XN-1000血液分析儀及其試劑。隨機采集靜脈血2 mL，EDTA-K2抗凝。30分鐘內(nèi)完成檢測。

1.3 基因分析 在本院采集EDTA-K2抗凝全血2 mL，由福州金域醫(yī)學(xué)檢驗所員工到本院檢驗科收集后送到其實驗室檢測。采用深圳益生堂生產(chǎn)的試劑、PTC-200基因擴增儀，PCR+反向點雜交法檢測。

1.4 收集、保存所有基因檢測者的相關(guān)信息，包括基因檢測和MCV、MCH檢測結(jié)果，以及受檢者的年齡、性別。對15歲以下小孩則盡可能地收集其父母MCV、MCH的檢測結(jié)果。

MCV、MCH對地中海貧血診斷的真實性評價以基因檢測結(jié)果為參比標(biāo)準(zhǔn)，以同時出現(xiàn)MCH＜27 pg、MCV＜82 fL者為篩查陽性。采用兒童及其父母MCV、MCH聯(lián)合檢測結(jié)果篩查地中海貧血時則以兒童MCH＜27 pg、MCV＜82 fL加上父母中有一人或二人MCH＜27 pg、MCV＜82 fL為篩查陽性。按四格表法計算靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值。1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件,進行二樣本率差別的顯著性檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 小細(xì)胞、低色素性貧血的發(fā)病率,在不同的年齡段有較大的差別，嬰幼兒最高，其次是青少年，老年人最低。在15歲前男性高于女性，15歲以后至50歲女性高于男性。經(jīng)二樣本間率的顯著性檢驗上述三種數(shù)據(jù)比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。50歲以上男女間的陽性率的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。各年齡段小細(xì)胞、低色素性貧血的陽性率見圖1；二樣本間率的顯著性檢驗結(jié)果見表1。20歲以上的男性小細(xì)胞低色素性貧血的總陽性率為11.31%（3 887/34 372）。

2.2 基因檢測結(jié)果 648例地中海貧血患者的基因檢測結(jié)果見表2。

2.3 不同年齡、性別人群用MCV、MCH聯(lián)合檢測地中海貧血的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值及準(zhǔn)確性比較。見表3。

圖1 不同年齡人群小細(xì)胞、低色素性貧血的陽性率

表1 不同人群間小細(xì)胞、低色素性貧血的陽性率比較

表2 648例地中海貧血患者的基因分型

表3 不同人群用MCV、MCH聯(lián)合檢測地貧的真實性比較

2.4 62例同時出現(xiàn)MCH＜27 pg、MCV＜82f，年齡小于15歲的兒童，其父母雙方MCV、MCH正常者27例，只1例基因檢測異常，陽性率為3.70%；父母中有一人或二人同時出現(xiàn)MCH＜27 pg、MCV＜82 fL者35例，地貧基因異常者29例，陽性率達82.86%。；經(jīng)兩樣本率差別的顯著性檢驗顯示兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義（u=6.18，P＜0.01）。

3 討論

3.1 MCH、MCV同時降低，又稱小細(xì)胞、低色素性貧血，主要見于缺鐵性貧血、慢性失血性貧血、地中海貧血等。該指標(biāo)用于地中海貧血篩查的研究已有眾多報告[2-5]。但是，不同性別、年齡的人群小細(xì)胞、低色素性貧血的發(fā)病率比較卻尚未見報道，本文通過對108 722例檢測結(jié)果的分析研究，發(fā)現(xiàn)男性與女性人群不僅小細(xì)胞、低色素性貧血的發(fā)病率不同，而且隨著年齡的增長呈現(xiàn)的變化趨勢也不同。在嬰幼兒期男性的發(fā)病率明顯高于女性，而在青春期開始至50歲這一年齡雖然二者發(fā)病率都有下降，但女性發(fā)病率卻高于男性。50歲以后兩性的發(fā)病率開始趨于一致。男女兩性小細(xì)胞、低色素性貧血發(fā)病率的變化曲線在15歲時出現(xiàn)一個明顯的交叉。15～50歲的女性小細(xì)胞、低色素性發(fā)病率較高應(yīng)該是月經(jīng)所致，15歲前的小孩發(fā)病率高于成人也可能是因其鐵攝入量難以滿足生長發(fā)育的需要而導(dǎo)致缺鐵性貧血發(fā)病率高于成人。但男孩為何明顯高于女孩，以及除地中海貧血和缺鐵性貧血外是否還有其他原因?qū)е滦『⑿〖?xì)胞、低色素性貧血陽性率高達50%以上，卻有待進一步研究。

3.2 近年來，隨著對地中海貧血防治工作的開展，MCV、MCH檢測在地中海貧血篩查中的應(yīng)用研究也日益增加。普遍認(rèn)為MCV、MCH對地中海貧血的篩查具有很高的靈敏度（90%～96%）[2-3]，但特異度卻相對較差，MCV和MCH系列聯(lián)合檢測相對單項檢測和平行聯(lián)合檢測具有較高的特異性。本文采用系列聯(lián)合檢測（兩項指標(biāo)均出現(xiàn)陽性結(jié)果時才判斷為陽性）比較不同人群的差異。

從表3可看出，MCV和MCH系列聯(lián)合檢測對地貧篩查的靈敏度和陰性預(yù)測值在不同的人群中都高達95%以上，說明該指標(biāo)用于地貧篩查具有極高的靈敏度。MCV、和MCH正常者幾乎可以排除地中海貧血的診斷。但作為診斷指標(biāo)特異性和陽性預(yù)測值卻相對較差，而且在不同的人群具有較大的差別。在15歲前的小孩低于成年人，其中男孩比女孩更低；15歲以后女性卻低于男性。總體結(jié)果與各類人群的小細(xì)胞低色性性貧血的陽性率密切相關(guān)，陽性率越高用于地中海貧血篩查的特異度和陽性預(yù)測值就越低，反之亦然。在所有人群中20歲以上的男性特異性、陽性預(yù)測值和準(zhǔn)確度最高，分別為88.89%，90.10%，93.44%；而且其靈敏度和陰性預(yù)測值分別高達97.84%，97.56%。也就是說對于這一人群采用該指標(biāo)篩查地中海貧血具有靈敏、準(zhǔn)確等優(yōu)點。

地中海貧血是一組常染色體遺傳性疾病，死亡率極低，在同一族群中，如果沒有進行醫(yī)學(xué)干預(yù)措施，在不同的性別、年齡的人群中發(fā)病率幾乎是相同的。20歲以上的男性發(fā)病率與其同一族群的總發(fā)病率是基本相同的。因此，可用20歲以上男性MCV和MCH系列聯(lián)合檢測的陽性率及其對地中海貧血診斷的陽性預(yù)測值粗略推算出其所在族群地中海貧血的發(fā)病率。據(jù)此，采用本文資料可以推算出上杭縣居民地中海貧血的發(fā)病率約為11.31%×90.10%=10.19%。

3.3 從表2可見，本縣居民地中海貧血α型較多，占64.66%；其中又以α-地貧1基因雜合子（--/2α）最多，占總數(shù)的51.39%；β型地中海貧血占35.34%，其中以Ivs-Ⅱ-654位點突變基因雜合子最多，占總數(shù)的19.75%。結(jié)合前文推算出的地中海貧血發(fā)病率可計算出上杭縣居民α-地中海貧血基因攜帶率為64.66×10.19%＝6.59%；β地中海貧血基因攜帶率為35.34%×10.19%＝3.60%。徐兩蒲[6]根據(jù)949例樣本調(diào)查得出的福建省龍巖市地中海貧血的發(fā)病率、α-地中海貧血基因攜帶率、β地中海貧血基因攜帶率分別為9.38%、7.06%、2.32%。與本文結(jié)果略有差別，可能是抽樣誤差所致。也可能本縣居民都是客家人，而所在的龍巖市還有其他民系居民，兩者的地中海貧血發(fā)病率確實存在差異。3.3 MCV和MCH系列聯(lián)合檢測陽性兒童，如果其父母雙方均為正常者27例，只1例基因檢測異常。陽性率為3.70%；父母中有一人或二人同時出現(xiàn)陽性者MCH＜27 pg、MCV＜82 fL者35例，地貧基因異常者29例，陽性率達82.85%。；說明對于MCV、MCH降低的兒童，只要再檢測其父母雙方的MCV、MCH就能對其是否患有地中海貧血作出較準(zhǔn)確的判斷。特別是對于父母雙方均為陰性者，幾乎可以排除地中海貧血的診斷。相對于基因檢測而言，MCV、MCH檢測費用極其低廉，而且簡單快速。建義在對兒童進行地中海貧血篩查時同時對其父母進行MCV、MCH檢測。對于成年人如果能獲得其父母這二項指標(biāo)的檢測結(jié)果，同樣也有助于是否患有地中海貧血的判斷[7-8]。

MCV、MCH同時降低的檢出率,在不同的年齡段有較大的差別，嬰幼兒最高，其次是青少年，老年人最低。在15歲前男性高于女性，15歲以后至50歲女性高于男性。50歲以后男女兩性的檢出率開始趨于一致。

MCV和MCH系列聯(lián)合檢測對地貧篩查的靈敏度和陰性預(yù)測值在不同的人群中都高達95%以上，用于地貧篩查具有極高的靈敏度。MCV和MCH正常者幾乎可以排除地中海貧血的診斷。但作為診斷指標(biāo)特異性和陽性預(yù)測值卻相對較差，而且在不同的人群具有較大的差別。在15歲前的小孩低于成年人，其中男孩比女孩更低；15歲以后女性卻低于男性。在所有人群中20歲以上的男性特異性、陽性預(yù)測值和準(zhǔn)確度最高，分別為88.89%，90.10%，93.44%；而且其靈敏度和陰性預(yù)測值分別高達97.84%，97.56%。

本縣居民地中海貧血總發(fā)病率約為10.19%；α-地中海貧血基因攜帶率為6.59%；β地中海貧血基因攜帶率為3.60%。

對于MCV、MCH降低的兒童，只要再檢測其父母雙方的MCV、MCH就可對其是否患有地中海貧血作出較準(zhǔn)確的判斷[9]。特別是對于父母雙方均為陰性者，幾乎可以排除地中海貧血的診斷。子女和其父母的MCV、MCH檢測結(jié)果綜合分析是地中海貧血篩查經(jīng)濟而有效的方法。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2017.30.053

莫曉云，E-mail：Moxiaoyun1965@163.com