姬松茸多糖提取、生物活性及產品開發研究進展

徐 勇 孫培龍 張安強

姬松茸多糖提取、生物活性及產品開發研究進展

徐 勇 孫培龍 張安強*

（浙江工業大學食品科學技術系，浙江杭州 310014）

姬松茸藥食兼用，營養豐富，而姬松茸多糖是其重要的生物活性成分，具有抗腫瘤、抗氧化、抗輻射、免疫調節、抗病毒和降血糖等作用。綜述姬松茸多糖的提取、分離純化、結構分析、生物學活性以及產品開發現狀及其市場化前景。

姬松茸多糖；分離純化；結構分析；生物學活性；產品開發

姬松茸（Murill，ABM）又名巴西蘑菇，原產于巴西，是一種藥食兼用的珍稀食用菌，因具有重要的藥用價值，我國和日本廣泛種植。姬松茸富含多糖、蛋白質、核酸、脂肪、皂甙、單寧、甾醇、礦物質、微量元素及人體必需的氨基酸等[1]，其中姬松茸多糖是其發揮作用的主要活性物質[2]。其在抗腫瘤[3]、降低血糖[4]、抗疲勞[5]、抗氧化[6]等方面具有顯著效果，可用來治療癌癥、心臟病、肥胖癥等疾病[7～9]。

1 姬松茸多糖的提取分離制備及其結構分析

1.1 姬松茸多糖提取

目前姬松茸多糖提取分為子實體多糖提取[9]和菌絲體發酵多糖提取[10]，提取方法主要有溶劑提取法（熱水浸提法）、酶提取法、超聲波提取法、微波提取法、高速剪切提取法和堿提法（表1）。為提高多糖的得率，須對各方法進行溫度、料液比、提取時間、萃取介質、超聲功率等因素的響應面優化。

表1 姬松茸多糖的提取工藝

1.2 姬松茸多糖的分離純化和結構研究

目前多糖常采用離子交換和凝膠分子篩層析等方法進行分離純化，高效液相色譜（HPLC）法用于多糖的純度鑒定和分子量的測定，應用紫外光譜法（UV）、紅外光譜（IR）、質譜（MS）、核磁共振（NMR）等進行多糖結構鑒定等。

孫培龍采用分級醇沉得到ABMP-Ⅰ和ABMP-Ⅱ兩純品，分子量分別為＞2 000 kDa和1 400 kDa[16]。經鑒定，ABMP-Ⅰ其糖鏈是以1,4連接的吡喃型葡萄糖為主鏈并含有少量結合蛋白的非淀粉α葡聚糖；而ABMP-Ⅱ可能是含有一吡喃型葡萄糖基的蛋白聚糖[16]。Gonzaga從姬松茸子實體多糖中分離得到β-葡聚糖，并且實驗分析結構為β-1,6-葡聚糖[17]。Liu分離純化得到的ABP-AW1組分，經鑒定其主鏈由（1→6）-β-D-吡喃半乳糖基，（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖基和（1→3,6）-β-D-吡喃葡萄糖基組成，側鏈連接在（1→3,6）-β-L-吡喃葡萄糖基的O-3位置上，由（1→）-β-L-阿拉伯呋喃糖苷和（1→）-β- D-吡喃葡萄糖組成，6種糖基比例為20︰10︰10︰6︰6︰2︰2[18]。

2 姬松茸多糖的生物學活性

2.1 抗腫瘤

研究表明，多糖的糖鏈能通過抑制腫瘤細胞的增殖和分化直接作用于腫瘤細胞，調節細胞的生長與衰老，也可通過增強免疫力或誘導腫瘤細胞凋亡而發揮抗腫瘤作用[19～21]。Vercosa等在pH 4和pH 7條件下分別用熱水浸提和超聲提取得到4種姬松茸多糖，研究其對腫瘤誘導的γ球蛋白含量的影響，結果發現姬松茸多糖具有抗腫瘤活性[22]。秦曉飛等研究姬松茸多糖對體外培養小鼠樹突狀細胞（DC）的影響，發現姬松茸多糖能促進DC分化成熟，增強DC的抗腫瘤作用[23]。孫培龍等將小鼠接種S180實體瘤腫瘤細胞，后又做肝癌腹水小鼠實體瘤試驗，分別用分離純化得到的ABMP-Ⅰ和ABMP-Ⅱ兩種姬松茸多糖純品灌胃給藥，發現姬松茸多糖有較好的抑瘤作用，其中ABMP-Ⅰ組分多糖抑瘤率分別為46.3%和53.4%，ABMP-Ⅱ組分多糖抑瘤率分別為38.7%和40.1%[16]。

近幾年，姬松茸多糖的抗腫瘤活性機理研究是一個熱門，有學者通過試驗分析了抗腫瘤活性的潛在機理。Liu等分析證明姬松茸多糖是特異性TLR2激動劑，并且通過與Gr-1（+）CD11b（+）MDSCs相反的抑制功能而具有抗腫瘤活性[24]。林祥偉等實驗發現姬松茸粗多糖能抑制K562細胞增殖，并且可以誘導其凋亡，其作用機制與NF-κB通道的異常激活明顯相關[25]。

2.2 免疫調節

大量研究表明，姬松茸多糖具有免疫調節活性。國內外學者利用小鼠脾細胞等不同的研究對象，通過不同的試驗方法，探究姬松茸多糖的免疫調節活性機理。Martins等研究發現用巴西乳桿菌的酸處理姬松茸多糖富集部分（ATF）可顯著增加單核細胞對白色念珠菌的粘附/吞噬作用[26]。李晨光等研究發現熱水浸提除蛋白后得到的姬松茸子實體多糖可以促進巨噬細胞生成細胞因子IL-1β、TNF-α、IFN-β[4]。王宏艷等發現低分子多糖（LMPAB，50 kD）可明顯促進免疫小鼠Ig G1、Ig G2b和Ig G表達[27]。蔣麗艷等發現姬松茸水溶性多糖（ABP-AW1）能顯著促進免疫低下小鼠脾T淋巴細胞和B淋巴細胞增殖反應[28]。路垚等通過測脾臟中細胞因子IL-2、IL-4、INF-γ 的相對表達量，發現姬松茸多糖有良好的免疫調節作用，且磷酸化姬松茸多糖對小鼠脾臟細胞因子表達的影響高于姬松茸多糖[29]。

2.3 降血糖

糖尿病在我國發病率極高。人體胰島素分泌缺乏會影響人體糖、脂肪、蛋白質的正常代謝，從而導致糖尿病的形成，所以降低血糖的食品越來越受到人們的重視和關注。呂娟等對小鼠注射滅菌鏈脲佐菌素成功建立糖尿病（DM）大鼠試驗模型，發現姬松茸多糖具有降血糖作用，并且具有一定的量效關系[30]。李龍等給小鼠注射鏈脲佐霉素，誘導非胰島素依賴型糖尿病模型，結果發現，姬松茸多糖可降低Ⅱ型糖尿病小鼠的空腹血糖，提高空腹胰島素水平，改善胰島β細胞分泌[31]。

2.4 防輻射

太陽光、手機、電腦、醫院放射設備等放出的紫外線、X射線等，都可能會對人體健康造成不良影響。輻射可引起機體物質代謝紊亂、造成機體免疫系統損傷，還會引起機體多種器官的氧化損傷，嚴重破壞體內防御系統[32]，所以輻射保護越來越受到人們的關注。

周國清等通過大鼠給予直線加速器X射線建模，發現姬松茸多糖可顯著提高輻射損傷大鼠的淋巴細胞增殖活性和紅細胞溶血度，對輻射損傷大鼠的免疫調節具有一定的保護作用[32]。朱燕等選擇人永生化角質形成細胞（HaCaT）作為受試細胞，在體外建立中波紫外線（UVB）照射致 HaCaT 細胞光損傷模型，發現姬松茸粗多糖在適宜濃度時可抑制UVB誘導的細胞光損傷，并提高其細胞存活率[33]。

2.5 其他作用

姬松茸多糖還具有抗炎、抗衰老、抗氧化和提高記憶的功能。門繼光等通過雞卵白蛋白（OVA）誘導建立支氣管哮喘小鼠模型。結果顯示，姬松茸多糖有效抑制哮喘小鼠氣道炎癥細胞，減輕氣道炎癥反應，具有一定的抗炎作用[34]。高尚龍等給小鼠進行姬松茸多糖溶液灌胃，發現衰老小鼠的肝臟組織T-AOC活性得到顯著提高，MDA含量降低，血液中ALT活性降低，表明其具有較好的抗衰老活性[35]。呂娟等研究姬松茸多糖對糖尿病大鼠氧自由基的影響，發現其有抗氧化作用，能減輕腎組織氧自由基損失[36]。劉曉慶等研究姬松茸多糖清除DPPH、ABTS自由基的能力以及還原力，發現姬松茸多糖具有抗氧化能力[1]。黃清松等研究發現姬松茸粗多糖可增強D-半乳糖致腦老化模型小鼠的學習記憶能力，其作用機制與提高腦老化小鼠海馬神經細胞線粒體膜電位和抑制細胞凋亡有關[37]。

3 姬松茸產品開發

姬松茸在調節細胞生長，增強機體免疫力，防癌抗疲勞等方面療效顯著，并且無任何毒副作用，因此利用其作為材料，制成多種醫藥用品、保健品和功能食品配料等具有廣闊的開發前景。王航等以姬松茸菌絲體多糖為材料，按1︰1加入微晶纖維素制備保肝膠囊[38]。郜鵬云等在姬松茸多糖溶液中加入黃芩、板藍根、甘草、金銀花經高壓滅菌后制成復方姬松茸口服液[39]。趙肖通等優化姬松茸多糖泡騰片的配方，采用濕粉制粒壓片法制得的多糖分散片，可以作為保健品使用[40]。方雪等以姬松茸發酵液和牛奶為主要原料，以嗜熱鏈球菌和保加利亞乳桿菌為發酵劑，研制出一種具有營養保健功能的酸奶[41]。劉亞兵等將傳統餅干與姬松茸、牛骨粉配合，優化配方設計，制得的餅干既美味又營養豐富[42]。張良等將金針菇煮制、脫水、配料，與姬松茸混合加油拌料，殺菌熟化制備而成姬松茸金針菇即食產品[43]。甄佳美等將姬松茸加到小麥粉中，采用二次擠出技術制備出姬松茸面條[44]。

4 展 望

姬松茸含有多糖、甾醇類等生物活性物質，具有抗腫瘤、免疫調節、抗氧化、抗衰老、抗疲勞、抗炎等生物活性，且營養豐富，食藥兩用，開發前景廣闊。近幾年，國內外研究人員對姬松茸的多糖結構及生物活性進行了大量的研究，也研發出一系列產品，越來越受到人們的關注。雖然研究證實姬松茸多糖活性的報道很多，但是探究其機制的卻較少，對姬松茸抑菌性方面的研究也不夠廣泛，所以應加大對姬松茸作用機理的研究，為姬松茸多糖食品、藥品和保健品的開發提供理論指導，大規模、大范圍地將姬松茸產品市場化。

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Research progress on preparation analysis, biological activities and product development of polysaccharides fromMurill

Xu Yong Sun Peilong Zhang Anqiang*

（Department of Food Science and Technology, Zhejiang University of Technology, Hangzhou 310014, China）

Murill is a valuable edible and medicinal mushroom with rich nutrition. Polysaccharides are the most important active ingredients ofMurill. It has been widely concerned for its anti-tumor, anti-oxidation, anti-radiation, immune regulation, anti-virus and hypoglycemic bioactivities. In this paper, the extraction, isolation and purification, structural analysis, biological activity, and product development were reviewed for the further research ofMurill.

Murill polysaccharide; isolation and purification; structural analysis; biological activity; product development

S646

A

2095-0934（2017）05-308-05

國家自然基金面上項目（31671813）

徐勇，男，碩士研究生，從事食品活性物質分離檢測

*通訊作者：張安強，男，博士，副教授，從事功能食品檢測與開發，E-mail：zhanganqiang@zjut.edu.cn