慢性自發性蕁麻疹患者血清中IL-31水平與瘙癢程度的相關性

段 娜 鄭 瑞 周瑞艷

·論著·

·論著·

山西省留學回國人員科技活動項目擇優資助項目(編號：2014-779)

山西醫科大學第一醫院，太原,030001

鄭瑞，E-mail: zhengr2002@163.com

慢性自發性蕁麻疹患者血清中IL-31水平與瘙癢程度的相關性

段 娜 鄭 瑞 周瑞艷

目的明確慢性自發性蕁麻疹患者血清中IL-31水平與瘙癢程度的相關性。方法采用ELISA法檢測61例慢性自發性蕁麻疹患者和59名健康體檢者血清IL-31的含量，視覺模擬量表評價患者瘙癢程度。結果蕁麻疹患者血清IL-31水平為28.63±15.38 pg/mL高于對照組的1.74±0.30 pg/mL，兩組相比差異具有統計學意義(P<0.001)。慢性自發性蕁麻疹患者輕度、中度及重度瘙癢組IL-31水平分別為17.82±14.77 pg/mL，34.28±10.39 pg/mL 和37.68±15.18 pg/mL，各組間差異有統計學意義(P<0.05)。結論慢性自發性蕁麻疹患者瘙癢程度可能與血清IL-31的表達升高有關。

慢性自發性蕁麻關疹； 白細胞介素-31； 瘙癢

慢性自發性蕁麻疹(chronic spontaneous urticaria, CSU)是皮膚科最常見的變態反應性疾病之一，CSU患者常伴有明顯的瘙癢。目前研究證實了多種瘙癢因子包括組胺、白三烯B4、P物質、5-羥色胺、白介素-2、白介素-31(Interlukin 31，IL-31)、血小板活化因子、乙酰膽堿、阿片樣肽等。有效控制瘙癢是CSU治療目標之一，抗組胺藥物可以減輕患者瘙癢癥狀，但仍然有部分患者療效比較差。本實驗采用ELISA法檢測CSU患者和健康體檢者外周血IL-31表達水平，探討其與瘙癢程度的關系，這可能對CSU發病機制及瘙癢的治療有指導性意義。

1 對象與方法

1.1 對象 研究組：來自2016年6～12月在山西醫科大學第一醫院皮膚科門診確診為CSU的患者61例，男24例，女37例，男女比例0.65:1，平均年齡(37.48±13.31)歲。納入標準：(1)蕁麻疹每周發作≥2次，持續時間≥6周，無明顯誘因；(2)年齡≥16歲；(3)就診前3天未用抗組胺類藥物，1個月內未用糖皮質激素、免疫抑制劑及免疫調節劑；(4)有閱讀能力并能根據病情如實回答問題；排除標準：(1)肝腎功能明顯異常(高于正常值1倍以上)；(2)因合并其他疾病需使用藥物治療或嚴重系統性疾病及腫瘤等；(3)合并感染者；(4)患有其他過敏性疾病或自身免疫性疾病；(5)藥物及/或酒精濫用者；(6)妊娠期及哺乳期婦女；(7)不愿意加入本研究及患有神經精神等疾患不能合作者。

健康組：隨機抽取同期在我院進行體檢的健康正常人群59名，男32名，女27名，男女比例1.19∶1，平均年齡(40.92±11.30)歲。排除近期局部及全身感染性疾病，且均無心、肺、肝、腎、內分泌等系統性疾病，也無哮喘、特應性皮炎等其他過敏性疾病及自身免疫性疾病史。

兩組受檢者的性別、年齡、職業、文化程度、居住地等均無統計學差異，所有受檢者都簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 標本的采集 抽取受試者的肘靜脈血3 mL，靜置于室溫50 min，后3000 r/min離心10 min，取上清液，置-80℃冰箱待檢，避免反復凍融。

1.2.2 標本檢測 采用人IL-31 ELISA試劑盒檢測受試者血清樣本中IL-31水平，嚴格按照說明書操作進行操作。

1.2.3 病情評估 瘙癢程度的評估：瘙癢嚴重程度的評估是根據視覺模擬評分(Visual analogue scale, VAS)來評價，按瘙癢嚴重程度從輕到重分0～10不同的等級刻度，其中0代表無瘙癢，10代表難以忍受的瘙癢。瘙癢程度按3級評分：輕度瘙癢(1～3)、中度瘙癢(4～6)、重度瘙癢(7～10)[1]。

蕁麻疹活動度評分：我們采用歐洲EAACI/GA2LEN/EDF/WAO推薦的UAS表來評估慢性蕁麻疹的活動度[2]，根據CSU患者過去一周內風團數量及瘙癢程度來評分。每日評分為0～6，總分值為0～42。將兩部分連續7天的得分相加得到總分并進行分組：輕度組(0～14)、中度組(15～28)、重度組(29～42)。

1.2.4 統計學方法 采用SPSS 22.0軟件對數據進行處理，采用SPSS 22.0進行統計學分析。定量數據描述采用均數±標準差，定性數據以率的形式表示。定量資料如果滿正態性則采用獨立樣本t檢驗或者方差分析進行對比；若不滿足則采用基于秩次的非參數檢驗進行對比。定性資料采用四個表或者R×C列表進行分析。P<0.05認為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 研究組與對照組血清IL-31水平對比 經正態性檢驗，研究組和對照組IL-31含量均不滿足正態分布(P<0.05)，研究組IL-31水平為(28.63±15.38 pg/mL)，對照組IL-31水平為(1.74±0.30 pg/mL)。經Mann-Whitney U檢驗，兩組差異具有統計學意義(Z=-9.095，P<0.001)。見表1。

表1 研究組和對照組IL-31表達情況

2.2 血清IL-31水平和瘙癢程度對比 輕度、中度和重度瘙癢三組之間的比較采用Kruskal-Wallis檢驗，輕度、中度、重度瘙癢組之間IL-31水平差異有統計學意義(P<0.05)，結果見表2。進一步做Kruskal-Wallis檢驗兩兩比較，校正后的檢驗效度為0.017。結果顯示，輕度瘙癢和中度瘙癢以及輕度瘙癢與重度瘙癢之間差異有統計學差異(P<0.016)，中度瘙癢和重度瘙癢之間沒有統計學差異(P>0.016)，結果見表3。

表2 不同瘙癢程度分組CSU患者血清IL-31水平對比

表3 不同瘙癢程度分組CSU患者IL-31水平兩兩比較

3 討論

CSU是一種常見的反復發作的變態反應性疾病，以速發性風團為主要的臨床特征，并伴有瘙癢。CSU病程持續時間長，反復發作風團和瘙癢，遷延不愈，使患者的身心健康受到不同程度的影響，甚至使得他們無法正常工作和生活。國內外大量實驗均是通過測定CSU患者體內的細胞因子表達水平來間接反映CSU與Th1/Th2細胞失衡間的關系，并證實主導其免疫應答的是Th2細胞[3]。另有學者發現機體免疫功能異?？赡軈⑴cCSU的發病，表現為Th1細胞因子水平降低，Th2細胞因子平升高[4]。Th2 細胞可通過分泌細胞因子諸如IL-4、IL-5、IL-13等，也可促進 B 細胞產生IgE直接或間接地引起變態反應[5]。IL-31主要是由激活的Th2產生，其可能也在 CSU 發病中發揮作用[6]。IL-31屬于IL-6 家族成員，人IL-31基因定位在12q24.31，全長為904 bp，開放閱讀框為495 bp，其編碼的蛋白前體由164個氨基酸組成，其活性形式由141個氨基酸組成的具有4個α螺旋結構。IL-31通過與其受體，即由IL-31受體A(IL-31RA)與OSMR(Oncostatin M receptor，制瘤素M受體)構成的二聚體，結合發揮生物學效應。

目前關于IL-31的研究主要集中在特應性皮炎(Atopic Dermatitis，AD)中，認為IL-31是參與瘙癢性疾病的一種新型細胞因子。Takaoka[7]等將有持續瘙癢行為的自發性AD NC/Nga小鼠，與半抗原誘發的無瘙癢行為的AD小鼠進行比較，前者IL-31mRNA的表達明顯增加，給小鼠皮膚注射IL-31后出現明顯的搔抓行為，且搔抓評分與IL-31mRNA的表達呈正相關。另有研究報道，在大多數自然發生AD的犬中可以檢測到犬IL-31，且可致犬產生搔抓的行為，表明該細胞因子可能在瘙癢性過敏性皮膚病中起著重要的作用[8]。腹腔注射抗IL-31單克隆抗體可以有效減少NC/Nga小鼠的瘙癢行為，但對皮炎無任何影響，進一步說明了IL-31與AD瘙癢相關[9]。角質形成細胞能夠對IL-31作出反應，干擾角質形成細胞的分化，此外，INF-γ等前炎癥因子可刺激角質形成細胞表達IL-31RA[10，11]。體內外實驗發現，IL-31可誘導感覺神經元發生轉錄，導致神經伸長并出現分支[12]。脊髓后根神經節處主要有感覺神經元胞體，癢感主要由感覺神經元無髓C纖維傳遞。Bando等[13]研究顯示在三叉神經結以及脊髓背根神經結神經元上都檢測到IL-31R mRNA，且分布在脊髓背根神經結處的IL-31R mRNA與OSMR完全重疊，可形成有功能的受體復合物，對IL-31及0SM的刺激產生反應。亦有報道稱，在角質形成細胞和脊髓背根神經節中均有IL-31RA和OSMRβ表達[14]。因此，IL-31可能通過與其脊髓背根神經節處受體結合來傳遞瘙癢信號。另有研究證實，多次給予小鼠皮內注射IL-31可使小鼠背根神經節胞體表達IL-31RA和OSMRβ增加，當停止注射后2日，IL-31RA的表達降至原來的基線水平[15]。國內學者在AD皮損中發現，在神經纖維束內、真皮層觸覺小體及環層小體被囊均有IL-31RA表達，提示IL-31可能直接調節皮膚感覺神經纖維興奮，參與瘙癢形成[16]。

目前，有關IL-31與CSU的研究國內外僅有少數報道。外國學者在CSU患者體內檢測出IL-31水平高于健康對照組，認為IL-31可能在CSU患者瘙癢中也起著一定作用[6，17]。國內學者研究證實CSU患者外周血IL-31水平明顯高于健康組，且與皮膚瘙癢程度評分呈正相關，而與風團數量及大小無相關性[18]。我們檢測出IL-31水平高于健康對照組，且與瘙癢程度呈正相關。我們還檢測出研究組IL-31水平與蕁麻疹嚴重程度呈正相關。

推測IL-31可能參與CSU的發病過程，并與瘙癢程度有關，IL-31RA在表皮全層、汗腺導管、血管內皮細胞，以及觸覺小體、環層小體被囊以、皮膚傳入神經纖維、脊髓背根神經結均有表達。IL-31水平與瘙癢程度呈正相關，可能是IL-31通過與角質形成細胞、內皮細胞受體結合，激活皮膚感覺神經，經過脊髓投射到中樞神經系統，產生癢覺；也可能通過與角質形成細胞表面的功能性受體結合，從而影響角質形成細胞神經營養因子的產生釋放，直接或間接調節皮膚感覺神經纖維功能以及神經肽的合成，從而參與瘙癢形成。此外，血清IL-31表達水平升高也見于其它瘙癢性皮膚疾病，如AD、銀屑病、扁平苔癬、變應性接觸性皮炎、皮膚T細胞淋巴瘤等。有效的控制瘙癢是CSU治療目標之一，抗組胺藥物可以減輕患者瘙癢癥狀，但仍然有部分患者療效比較差。因此，基于已有研究的基礎上對IL-31進行更深一步的研究是及其必要的。

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ThecorrelationbetweentheIL-31levelinserumandpruritusseverityinthepatientswithchronicspontaneousurticaria

DUANNa,ZHENGRui,ZHOURuiyan.

FirstHospitalofShanxiMedicalUniversity,Taiyuan030001,China

ZHENGRui,E-mail:zhengr2002@163.com

Objective: To determine the correlation between serum IL-31 levels and itching severity in the patients with chronic spontaneous urticaria.MethodsThe level of IL-31 in 61 patients with chronic spontaneous urticaria and 59 healthy controls was detected by ELISA. The itching severity was assessed by visual analogue scale.ResultsThe average serum level of IL-31 in the patients was 28.63±15.38 pg/mL, which was higher than those in the healthy controls (1.74±0.30 pg/mL), with a significant difference (P<0.001). The average serum levels of IL-31 in the patients with mild, moderate and sever itching were 7.82±14.77 pg/mL, 34.28±10.39 pg/mL and 37.68±15.18 pg/mL respectively. The differences among the groups were significant (P<0.05).ConclusionThe itching severity in the patients with chronic spontaneous urticaria may be associated with the increasing level of IL-31.

chronic spontaneous urticaria; interleukin-31; pruritus

(收稿：2017-04-27 修回：2017-07-12)