2014-2016年粵北地區規模化豬場偽狂犬病血清學調查與分析

南文金，黃健強，吳靜波，胡鴻惠，彭國良

（韶關學院動物疫病實驗室，廣東韶關512005）

2014-2016年粵北地區規模化豬場偽狂犬病血清學調查與分析

南文金，黃健強，吳靜波，胡鴻惠，彭國良

（韶關學院動物疫病實驗室，廣東韶關512005）

為了解粵北地區豬偽狂犬病（Pseudorabies,PR）毒野毒感染及疫苗免疫情況，用ELISA方法對2014-2016年粵北地區25個規模豬場送檢的3 895份（49批次）血清進行了偽狂犬病毒（Pseudorabies virus,PRV）gE抗體和gB抗體檢測.檢測結果顯示，粵北地區2014-2016年豬場PR野毒陽性率分別為78.57%、77.78%和64.71%，樣品陽性率分別為7.02%、9.72%和10.44%.2014-2016年公豬、經產母豬、后備母豬、保育豬和生長育肥豬gE抗體總陽性率分別為11.72%、10.3%、9.49%、4.89%和14.61%，不同豬群間PR野毒感染率差異顯著.2014-2016年不同豬群PRV gB抗體調查結果顯示，公豬、經產母豬、后備母豬、保育豬和生長育肥豬總陽性率分別為96.55%、98.97%、92.4%、65.23%和35.79%.結果表明，粵北地區規模豬場PR野毒感染普遍存在，整體陽性率相對不高；種豬群PR疫苗免疫抗體水平較高，但保育豬群和生長育肥豬群疫苗抗體水平較低，成為野毒感染高風險群體.

豬；偽狂犬病毒；gE抗體；gB抗體；調查分析

偽狂犬病（Pseudorabies,PR）是由偽狂犬病毒（Pseudorabies virus,PRV）引起的多種家畜和野生動物發病的一種傳染病［1］.在畜牧業生產中，PRV對養豬業的危害最為嚴重，臨床上可引起母豬繁殖障礙，仔豬神經癥狀、腹瀉和中大豬呼吸道疫病.豬場一旦爆發該病，往往造成較大經濟損失.在養豬生產中，該病可以通過免疫豬偽狂犬疫苗進行預防，特別是PRV基因工程疫苗的廣泛應用，不但有效控制了該病在我國的流行，一些豬場還成功凈化了該病.但近幾年來，PR在我國部分地區豬場爆發并廣泛流行，部分PRV野毒陰性豬場迅速轉陽，成為近年對我國養豬業影響較大的疫病之一［2-3］.

免疫PRV基因工程疫苗的豬群，可以通過檢測血清中gE抗體來評估野毒感染情況，通過檢測血清中gB抗體對疫苗免疫效果進行評估，為豬場開展PRV凈化及防控提供科學依據.為了解粵北地區近三年來豬PR流行動態和免疫情況，對2014-2106年粵北地區部分規模豬場送檢的血清樣品進行了PRV gE抗體和gB抗體檢測，并對檢測數據進行了統計分析.

1 材料和方法

1.1 樣品信息

201 4-2016年粵北地區25個規模化豬場49批次送檢的3 895份血液樣品，實驗室常規方法分離血清，4℃冷藏保存待檢.所檢豬場均已免疫接種豬偽狂犬病毒基因工程疫苗.

1.2 檢測方法

豬偽狂犬病毒gB抗體檢測試劑盒和gE抗體檢測試劑盒均使用美國IDEXX公司生產的ELISA檢測試劑盒，嚴格按試劑盒使用說明書進行操作.

1.3 結果判定

根據S/N值來判定抗體陰陽性，當S/N≤0.6，樣品判定為gE(gB)抗體陽性；當0.6＜S/N≤0.7，樣品判定為gE(gB)抗體陰性，判為可疑；當S/N＞0.7，樣品判定為gE(gB)抗體陰性.

1.4 數據統計

分年度統計檢測豬場gE抗體陽性率、樣品gE抗體陽性率、不同豬群gE抗體陽性率和gB抗體陽性率.

2 結果

2.1 豬場偽狂犬野毒感染情況調查結果

201 4-2016年粵北地區規模化豬場PR野毒感染情況調查結果見表1.結果顯示，豬場PR野毒陽性率分別為78.57%、77.78%和64.71%.樣品陽性率分別7.02% 、9.72%和10.44%.結果表明，近三年來粵北地區規模化豬場野毒感染情況普遍存在，豬場陽性率呈逐年下降趨勢，但樣品陽性率呈逐年上升趨勢.

2.2 不同豬群偽狂犬野毒感染情況調查結果

201 4-2016年對不同階段豬群PR野毒感染情況統計見表2.結果顯示，不同年份不同階段豬群PR野毒陽性率不同，三年間公豬、母豬和后備豬群樣品總陽性率差異不大，分別為11.72%、10.3%和9.49%，保育豬群PR野毒陽性率最低為4.89%，生長育肥豬群PR野毒陽性率最高，為14.61%.從分年統計結果來看，公豬群2016年PR野毒陽性率最高，達到18.18%，母豬群2015年陽性率最高，達到14.98%，后備豬群2016年陽性率最高，達到12.98%，保育豬群2016年陽性率最高，達到7.57%，生長育肥豬群陽性率呈逐下降趨勢，從2014年陽性率12.91%下降到2016年的9.27%.

表1 偽狂犬野毒感染情況調查結果

表2 不同豬群偽狂犬野毒感染情況調查結果

2.3 豬偽狂犬疫苗抗體陽性率調查結果

201 4-2016年粵北地區規模豬場不同階段豬群豬偽狂犬病毒gB抗體調查結果見表3.結果顯示，公豬和母豬gB抗體陽性率較高，平均陽性率分別為96.55%和98.97%.2014-2016年后備母豬gB抗體陽性差別較大，分別為81.55%、93.29%和92.22%.保育豬和生長育肥豬gB抗體陽性率較低，其中生長育肥豬陽性率最低，在35%～40.24%.

3 討論

gE基因是PRV一個主要毒力基因，當前養豬業廣泛使用的PRV基因工程疫苗都缺失了gE基因，免疫gE基因缺失的PRV基因工程疫苗后不會產生針對gE蛋白的抗體，而感染PRV野毒株的豬會產生gE抗體，因此，免疫過PRV基因缺失疫苗的豬群，可以通過檢測gE抗體對豬群感染豬PRV野毒情況做評估［4］。

表3 不同豬群偽狂犬疫苗抗體水平調查結果

表1結果表明，2014-2016年粵北地區規模化豬場豬PRV野毒陽性率都在70%以上，三年來豬場陽性率差別不大，但樣品陽性率卻呈現逐年上升趨勢，三年間檢測的樣品gE抗體陽性率分別為7.02%、9.72%和10.44%.

表2對不同階段豬群PRV野毒感染情況統計表明，不同豬群間gE抗體陽性率差異顯著.2014-2015年PRV野毒感染率最高的豬群為生長育肥豬，gE陽性率為分別為23.91%和14.15%，但生長育肥豬gE抗體陽性率三年間呈現逐年降低趨勢，至2016年下降到9.27%.公豬、母豬和后備豬gE陽性率各年間差異較大.保育豬陽性率最低，2014-2016年陽性率分別為3.81%、3.67%和7.57%.2016年公豬和后備豬PRV野毒感染率明顯高于2014年和2015年，這是由于2016年在檢測的一個豬場引進公豬和后備母豬時沒有進行引種前檢測，引進了部分PRV gE抗體陽性種豬導致該年公豬和后備母豬PRV野毒感染率升高.粵北地區規模化豬場 2014-2016 年豬場陽性率高于湖南［5］、福建［6］、廣西［7］、安徽［8］等地區，但樣品陽性率則比大多數地區報道的陽性率要低，這表明PRV野毒在粵北地區規模化豬場普遍存在，但豬群感染程度相對較低，這一調查結果和李段等對廣東省豬偽狂犬病流行病學調查結果相一致［9］.

gB蛋白是PRV重要糖蛋白，gB蛋白能誘導機體產生中和抗體，因此，通過檢測PRV gB抗體可以對PRV疫苗免疫效果進行評估.表3對2014-2016年粵北地區規模化豬場PRV gB抗體檢測結果顯示，公豬和母豬gB抗體總陽性率都在90%以上，最低的2014年公豬陽性率為94.28%，疫苗免疫效果較好；后備豬群疫苗免疫效果各年差異較大，保育豬和育肥豬疫苗抗體合格率較低，特別是生長育肥豬，2014-2016年gB抗體陽性率雖然逐年上升，但最高的2016年也僅為44.96%.對比生長育肥豬gE抗體和gB抗體陽性率變化趨勢可以發現，在gB抗體合格率逐年升高的同時，粵北地區規模化豬場育肥豬群中gE抗體陽性率呈逐年下降.這一結果也充分說明近幾年導致偽狂犬病爆發和流行的一個重要原因就是忽視了中大豬的疫苗免疫.長期以來，由于偽狂犬疫苗良好的免疫效果使得豬偽狂犬病在規模化豬場很少發生，因此，許多豬場僅對種豬群進行免疫，對商品豬群不進行疫苗免疫或僅采用的是1日齡滴鼻免疫，隨著母源抗體下降，保育后期PRV抗體合格率開始迅速下降，造成中大豬疫苗抗體水平較低或無抗體，成為易感群體，一旦有野毒侵入，病毒迅速繁殖，快速傳播.因此，要重視保育豬和生長育肥豬PRV疫苗免疫，制定科學的免疫程序，避免生長育肥豬成為PRV免疫空白群體對豬場PRV防控至關重要.

201 1年以來PR發病率在全國明顯上升，許多PRV野毒陰性豬場迅速轉陽.本調查中的豬場大部分為大型豬場，經產母豬存欄在500～3 000頭，每年進行1～3次定期監測，三年間僅有2個豬場一直保持PRV野毒抗體陰性，這和近年來PRV在全國流行趨勢相符.通過以上三年檢測數據，結合粵北地區近年來豬偽狂犬病發病情況分析，粵北地區規模化豬場當前PRV野毒陽性已經很普遍，但除個別豬場gE陽性率較高，超過20%，甚至達到50%以上外，多數規模化豬場感染壓力相對較低，特別是種豬群，gE陽性率大多低于10%，具備凈化條件.

研究證明近幾年流行的PRV毒株發生了較大變異，毒力也明顯增強，現有疫苗對當前流行毒株保護力下降［10-12］，但生產實踐中證明，在尚未有更新型的PRV疫苗面世前，利用現有疫苗和檢測技術，通過制定科學合理的免疫程序，提高豬群疫苗抗體水平，增強整個豬群對PRV野毒感染抵抗力，也可以有效防控PR，做到感染不發病，降低因PR流行帶來的經濟損失.

［1］殷震,劉景華.動物病毒學[M].北京:科學出版社,1997.

［2］常洪濤,劉慧敏,郭達占,等.河南省及周邊省份豬群中大面積感染豬偽狂犬病毒的病因分析[J].病毒學報,2014,30（4）:441-449.

［3］鄭輝,劉爽,董雅琴,等.2015年我國部分地區豬偽狂犬病血清學調查[J].中國動物檢疫,2016,33（9）:38-39.

［4］何啟蓋,童光志,楊漢春,等.豬偽狂犬病流行病學特征、凈化技術及其應用示范[J].中國畜牧雜志,2015,51（24）:68-74.

［5］唐小明,王昌建,林源,等.2014-2015年湖南省規模豬場豬偽狂犬病血清學調查[J].動物醫學進展,2016,37（7）:123-126.

［6］戴愛玲,范克偉,李曉華,等.閩西南地區部分規模化豬場豬偽狂犬野毒感染的血清流行病學調查[J].安徽農業大學學報,2015,43（1）:51-55.

［7］鐘舒紅,胡帥,李軍,等.2012-2014年廣西部分地區豬偽狂犬病野毒株感染血清學調查[J].黑龍江畜牧獸醫,2016,43（4）:122-124.

［8］占鶴松,劉華,周迎春,等.安徽省規模化種豬場豬偽狂犬病血清學調查[J].動物醫學進展,2015,36（3）:124-127.

［9］李段.廣東省豬偽狂犬病血清學調查及帶毒情況的研究[D].鄭州：河南農業大學,2015.

［10］彭金美,安同慶,周鴻遠,等.豬偽狂犬病病毒新流行株的分離鑒定及抗原差異性分析[J].中國預防獸醫學報,2013,35（1）:1-4.

［11］李寧,吳志明,閆若潛,等.2012-2014年河南省豬偽狂犬病病毒gE基因和TK基因的遺傳變異分析[J].中國獸醫學報,2016,36（10）:6531-1657.

［12］魏春華,戴愛玲,李曉華,等.福建省豬偽狂犬病病毒新流行株gD、gE基因遺傳變異分析[J].中國獸醫雜志,2016,52（3）:15-18.

Serological Investigation and Analysis of Porcine Pseudorabies in Scale Pig Farms of Northern Guangdong from 2014 to 2016

NAN Wen-jin,HUANG Jian-qiang,WU Jing-bo,HU Hong-hui,PENG Guo-liang
（Laboratory of Animal Disease，Shaoguan University,Shaoguan 512005,Guangdong,China）

To understand the porcine Pseudorabies(PRV)wild strain infection and vaccine immune effect in northern Guangdong region,a total of 3 895 serum samples obtained from 25 large-scale pig farms,serum samples were tested for PRV-gE or PRV-gB antibody by ELISA method.The monitoring data showed that PRV wild strain infection rate of pig farms was 78.57%,77.78%,64.71%in the year of 2014,2015 and 2016 respectively,and samples wild strain positive rates were 7.02%,9.72%and 10.44%.From 2014 to 2016,PRV wild strain infection was a significant difference between boars,multiparity sows,gilt,nursery pig and growing-finishing pigs,gE antibody total positive rate were 11.72%,10.3%,9.49%,4.89%and 14.61%,PRV gB antibody positive rate were 96.55%,98.97%,92.4%,65.23%and 35.79%in these swine herds.The results indicated that scale pig farms with PRV wild strain infection were widespread in northern Guangdong region,the overall positive rate was relatively low,and PRV vaccine immune antibody level were higher in breeding herds,but in nursery pig and growing-finishing pigs vaccine antibody level were lower,and these pigs would become high-risk groups with wild strains infection.

swine；PRV；gE antibody；gB antibody,investigation and analysis

S852.5+3

A

1007-5348（2017）09-0071-04

2017-06-22

廣東省科技計劃項目（2016A040402038）；廣東省現代農業科技創新聯盟建設項目（2016LM1141）；韶關市科技計劃項目（2013CX/N09）.

南文金（1981-），男，河南靈寶人，韶關學院動物疫病實驗室助理研究員，碩士；研究方向：動物傳染病防控技術.

（責任編輯：閆文龍）