子宮內膜癌組織Septin- 9表達變化及其意義

楊愛萍

(青海紅十字醫院，西寧810000)

子宮內膜癌組織Septin- 9表達變化及其意義

楊愛萍

(青海紅十字醫院，西寧810000)

目的探討子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達變化及其臨床意義。方法選擇子宮內膜癌患者120例(子宮內膜癌組)、子宮內膜不典型增生患者63例(不典型增生組)、子宮肌瘤患者70例(子宮肌瘤組)，分別取手術切除的子宮內膜癌組織、子宮內膜不典型增生組織、正常子宮內膜組織，采用qRT- PCR法檢測各子宮內膜組織Septin- 9 mRNA表達。同時分析子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與患者臨床病理參數及預后的關系。結果子宮內膜癌組、不典型增生組、子宮肌瘤組Septin- 9 mRNA相對表達量分別為1.98±0.51、1.64±0.23、1.00±0.00，組間兩兩比較P均<0.05。子宮內膜癌組Septin- 9 mRNA表達與淋巴結轉移、肌層浸潤和FIGO分期有關(P均<0.05)，與患者年齡、絕經狀態、病理類型及病理分級無關(P均>0.05)。以子宮內膜癌組Septin- 9 mRNA相對表達量的下四分位數為界值，將子宮內膜癌患者分為Septin- 9 mRNA低表達者和Septin- 9 mRNA高表達者。Septin- 9 mRNA高表達者術后5年生存率及總生存時間均低于Septin- 9 mRNA低表達者(P均<0.05)。結論子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達升高，其表達變化可能有助于子宮內膜癌診斷、病情評估及預后預測。

子宮內膜癌；Septin- 9；實時熒光定量PCR；臨床病理特征；預后

子宮內膜癌是女性常見的三大惡性腫瘤之一，占女性生殖道惡性腫瘤的20%～30%，近年來其發病率有升高趨勢[1]。Septin- 9蛋白是細胞骨架GTP結合蛋白家族的重要成員之一，廣泛存在于真核生物中，與細胞骨架重構、囊泡運輸以及細胞質分裂等多種生理過程密切相關[2]。近年研究表明，Septin- 9可參與多種惡性腫瘤的發生、發展，如乳腺癌[3]、直腸癌[4]、胃癌[5]等。但Septin- 9與子宮內膜癌發生、發展的關系鮮有報道[6]。本研究分析子宮內膜癌組織Septin- 9表達變化及其與患者臨床病理參數和預后的關系。現分析結果并報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 研究對象為2008年1月～2012年1月在青海紅十字醫院行手術收治的子宮疾病患者253例，其病例資料完整。其中，子宮內膜癌患者120例(子宮內膜癌組)，年齡38～75(54.98±10.75)歲，術前未行任何抗腫瘤治療；子宮內膜不典型增生患者63例(不典型增生組)，年齡36～72(57.47±13.62)歲；子宮肌瘤患者70例(子宮肌瘤組)，年齡36～80(53.54±12.17)歲。所有患者經術后組織病理檢查明確診斷。三組年齡具有可比性。本研究經青海紅十字醫院醫學倫理委員會批準，患者均知情同意。

1.2 子宮內膜組織Septin- 9 mRNA表達檢測 采用qRT- PCR法。取三組手術切除的子宮內膜組織，采用TRIzol抽提試劑盒提取組織總RNA，紫外分光光度計檢測總RNA濃度和純度，采用逆轉錄試劑盒將總RNA逆轉錄為cDNA，然后進行PCR擴增。引物序列由上海英駿生物技術有限公司設計合成。引物序列：Septin- 9上游引物：5′- CAGAGCGGCTTGGGTAAATCC- 3′，下游引物： 5′- CTCCTCAATATCGTGC-GTGATGG- 3′；GAPDH上游引物：5′- ACAACTTTGGTATCGTGGAAGG- 3′，下游引物：5′- GCCATCACGCCACAGTTTC- 3′。PCR反應體系共20 μL，反應條件：50 ℃孵育2 min，95 ℃ Taq酶活化10 min，95 ℃ 15 s、60 ℃ 1 min共40個循環。所有操作在熒光定量PCR擴增儀(ABI PRISM? 7300，美國ABI公司)上進行。以GAPDH為內參，采用2-ΔΔCt法計算Septin- 9 mRNA相對表達量。

1.3 子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與患者臨床病理參數關系分析 收集子宮內膜癌患者臨床病理參數，包括年齡、絕經狀態、組織學類型、病理分級、FIGO分期、肌層浸潤、淋巴結轉移等，分析子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與患者臨床病理參數的關系。

1.4 子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與患者預后關系分析 收集子宮內膜癌患者隨訪資料。以子宮內膜癌患者Septin- 9 mRNA相對表達量的下四分位數為界值，將子宮內膜癌組分為Septin- 9 mRNA低表達者(Septin- 9 mRNA相對表達量低于下四分位數)和Septin- 9 mRNA高表達者(Septin- 9 mRNA相對表達量等于或高于下四分位數)，繪制其Kaplan- Meier生存曲線，比較其術后5年生存率和總生存時間。

2 結果

2.1 各組Septin- 9 mRNA相對表達量比較 子宮內膜癌組、不典型增生組、子宮肌瘤組Septin- 9 mRNA相對表達量分別為1.98±0.51、1.64±0.23、1.00±0.00，組間兩兩比較P均<0.05。

2.2 子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與患者臨床病理參數的關系 子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與淋巴結轉移、肌層浸潤和FIGO分期有關(P均<0.05)，與患者年齡、絕經狀態、組織學類型及病理分級無關(P均>0.05)。見表1。

表1 子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達 與患者臨床病理參數的關系

2.3 子宮內膜癌組織Septin- 9表達與患者預后的關系 隨訪3～60個月，子宮內膜癌組死亡78例。Septin- 9 mRNA高表達者與Septin- 9 mRNA低表達者術后5年生存率分別為18.75%(12/64)、53.57%(30/56)，總生存時間分別為(33.67±2.59)、(50.55±2.35)個月，Septin- 9 mRNA高表達者術后5年生存率及總生存時間均低于Septin- 9 mRNA低表達者(P均<0.05)。

3 討論

子宮內膜癌屬于上皮性惡性腫瘤，以來源于子宮內膜腺體的腺癌最常見，是女性生殖系統的三大惡性腫瘤之一，其病因迄今尚不明確[7]。手術聯合放化療為目前子宮內膜癌的首選治療方法[8]，但患者預后并不樂觀。故尋求新的治療和預測預后的靶標是臨床研究的熱點[9]。

Septin- 9基因是Septin- 9蛋白的編碼基因，位于染色體17q25.3，其轉錄產物可產生18種變異剪切體，編碼15種多肽[10]。Septin- 9變異剪切體之間具有一定的核苷酸相似性和氨基酸一致性[11]，且他們的分布具有組織特異性，如Septin- 9 v1分布于除腦和胸腺外的組織[12]，Septin- 9 v2、Septin- 9 v3、Septin- 9 v4多在胎兒組織中表達[13]。Scholz等[14]研究證實，siRNA技術干擾Septin- 9表達可使細胞分裂不完整；Fukushige等[15]研究表明，Septin- 9異常表達可導致細胞極性丟失，從而使細胞癌變的發生風險增加。

本研究結果顯示，子宮內膜癌組Septin- 9 mRNA表達顯著高于不典型增生組和子宮肌瘤組，且不典型增生組Septin- 9 mRNA相對表達量顯著高于子宮肌瘤組。提示隨著正常子宮內膜組織向子宮內膜癌組織進展，Septin- 9 mRNA表達逐漸升高，Septin- 9在子宮內膜癌發生、發展過程中可能具有癌基因作用。本研究還發現，子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與患者年齡、絕經狀態、組織學類型和病理分級無關，而與淋巴結轉移、肌層浸潤和FIGO分期有關，且存在淋巴結轉移、肌層浸潤深、FIGO分期高的子宮內膜癌患者Septin- 9 mRNA表達相對較高，提示Septin- 9可能與子宮內膜癌的侵襲和轉移有關，檢測癌組織Septin- 9 mRNA表達有助于判斷病情。林春燕等[16]研究發現，Septin- 9能夠抑制HIF- 1α蛋白降解，增加血管內皮生長因子的表達，從而促進腫瘤血管形成。這可能是Septin- 9參與子宮內膜癌發生、發展的具體機制。

本研究結果顯示，Septin- 9 mRNA高表達者總生存時間較Septin- 9 mRNA低表達者明顯縮短，術后5年生存率亦明顯降低。提示子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達變化可影響患者預后，Septin- 9 mRNA高表達提示患者預后不良；檢測子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達將有助于評估子宮內膜癌患者預后。

[1] 劉妮，閆雅欣，錢延玲，等.子宮內膜癌的治療進展[J].醫藥前沿,2016,6(11):5- 7.

[2] Dolat L, Hu Q, Spiliotis ET. Septin functions in organ system physiology and pathology[J]. Biol Chem, 2014,395(2):123- 141.

[3] Connolly D, Yang Z, Castaldi M, et al. Septin 9 isoform expression, localization and epigenetic changes during human and mouse breast cancer progression[J]. Breast Cancer Res, 2011,13(4):R76.

[4] Molnár B, Tóth K, Barták BK, et al. Plasma methylated septin 9: a colorectal cancer screening marker[J]. Expert Rev Mol Diagn, 2015,15(2):171- 184.

[5] 李楠，王賀玲，梁曉平，等.SEPTIN 9在胃癌組織中的表達及臨床意義[J].中國微創外科雜志，2014，14(12):1125- 1127.

[6] 呂訥男，姚洪文，肖汀，等.卵巢上皮性癌患者外周血中septin- 9和clusterin蛋白的表達及其意義[J].中華婦產科雜志，2015，50(9):679- 684.

[7] Stubert J, Gerber B. Current issues in the diagnosis and treatment of endometrial carcinoma[J]. Geburtshilfe Frauenheilkd, 2016,76(2):170- 175.

[8] Loukovaara M, Luomaranta A, Leminen A. Treatment of endometrial carcinoma[J]. Duodecim, 2014,130(22- 23):2348- 2355.

[9] Liu LC, Lai HC, Chou YC, et al. Paired boxed gene 1 expression: a single potential biomarker for differentiating endometrial lesions associated with favorable outcomes in patients with endometrial carcinoma[J]. J Obstet Gynaecol Res, 2016,42(9):1159- 1167.

[10] Mostowy S, Cossart P. Septins: the fourth component of the cytoskeleton[J]. Nat Rev Mol Cell Biol, 2012,13(3):183- 194.

[11] 馬強.Septin9蛋白與人類疾病[J].讀寫算(教育教學研究),2015,4(17):150.

[12] Mao H, Liu J, Shi W, et al. The expression patterns of Septin- 9 after traumatic brain injury in rat brain[J]. J Mol Neurosci, 2013,51(2):558- 566.

[13] Bridges AA, Gladfelter AS. Septin Form and Function at the Cell Cortex[J]. J Biol Chem, 2015,290(28):17173- 17180.

[14] Scholz R, Imami K, Scott NE, et al. Novel host proteins and signaling pathways in enteropathogenic E. coli pathogenesis identified by global phosphoproteome analysis[J]. Mol Cell Proteomics, 2015,14(7):1927- 1945.

[15] Fukushige S, Horii A. DNA methylation in cancer: a gene silencing mechanism and the clinical potential of its biomarkers[J]. Tohoku J Exp Med, 2013,229(3):173- 185.

[16] 林春燕，稅青林.SEPT9與惡性腫瘤的研究進展[J].瀘州醫學院學報,2013,36(2):186- 188.

10.3969/j.issn.1002- 266X.2017.36.027

R737.33

B

1002- 266X(2017)36- 0082- 03

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