牡蠣共生菌Chaetomium globosum ML4發酵液的化學成分及其體外抗腫瘤活性研究

萬丹　陳曦　朱力　王鳳舞　孔桂美　曹桂云　申麗

[摘要]采用硅膠柱色譜、Sephadex LH20凝膠柱色譜、制備薄層色譜和高效液相色譜等方法對牡蠣共生菌Chaetomium globosum ML4發酵液的化學成分進行分離純化，獲得5個化合物。利用高分辨質譜、核磁共振譜及文獻比對的方法，將上述化合物分別鑒定為chaetoglobosin V（1），chaetoglobosin Vb（2），tyrosol（3），5methyluracil（4），uracil（5）。采用MTT法測定化合物對人肝癌細胞株SMMC7721的體外細胞毒活性，結果發現，化合物1對SMMC7721細胞具有明顯的增殖抑制活性，其IC50為605 mg·L-1，陽性對照藥順鉑的IC50為1996 mg·L-1。進一步研究發現，化合物1可引起SMMC7721細胞G2期細胞周期阻滯，并能誘導SMMC7721細胞凋亡；SMMC7721細胞中Bcl2/Bax的比值下降，Caspases3，8，9的表達增加，Akt蛋白的表達和磷酸化水平下降。上述結果表明，化合物1對SMMC7721細胞的體外抗腫瘤活性與誘導細胞周期G2期阻滯以及細胞凋亡相關；其誘導凋亡作用同時涉及線粒體途徑和死亡受體途徑，且與PI3K/Akt信號通路活性下降相關。

[關鍵詞]牡蠣； 共生菌； Chaetomium globosum； 化學成分； 抗腫瘤活性

[Abstract]Isolation and purification of chemical constituents of liquid culture of symbiotic Chaetomium globosum ML4 of oyster was performed through silica gel column chromatography， gel filtration over Sephadex LH20， preparative TLC and HPLC Five compounds were obtained and their structures were determined as chaetoglobosin V（1）， chaetoglobosin Vb（2）， tyrosol（3）， 5methyluracil（4）and uracil（5）， respectively， based on HRMS and NMR data and comparison with literatures In vitro cytotoxicity of compounds against human hepatocellular carcinoma cell line SMMC7721 were measured byMTT method， and results showed that compound 1 could obviously inhibit the proliferation of SMMC7721 cells with an IC50 value of 605 mg·L-1， while the IC50 value of positive control cisplatin was 1996 mg·L-1 Further studies discovered that compound 1 could lead to G2 phase arrest in SMMC7721 cells and induce SMMC7721 cells apoptosis The ratio of Bcl2/Bax in SMMC7721 cells was decreased The expression of protein Caspases3，8，9 was improved and the expression and phosphorylation level of Akt were reduced Aforementioned results revealed that in vitro antitumor activity of compound 1 against SMMC7721 cells were related to G2 phase cell cycle arrest and inducedapoptosis The inducedapoptosis was involved in both the mitochondrial pathway and the death receptor pathway and connected with activity decline of PI3K/Akt signaling pathway

[Key words]oyster； symbiotic microorganism； Chaetomium globosum； chemical constituents； antitumor activity

牡礪是一種常見的海洋貝類動物，具有很高的食用和藥用價值，在中醫藥領域具有相當重要的地位。作為一種傳統的中藥材，中國古代醫學文獻《神農本草經》、《海藥本草》、《本草綱目》等對牡礪均有記載。中醫臨床的重要經典著作《傷寒論》和《金匾要略》中共有14個方劑涉及海洋藥物，其中有11個方劑用到牡礪[1]。牡蠣的藥用價值與其所含的化學成分密切相關[2]。研究表明，很多從海洋動物中分離得到的活性物質實際是由其共生微生物所產生[34]，牡蠣共生菌也極有可能產生與牡蠣相同或相似的藥理活性成分。

前期實驗中，王鳳舞博士從青島海域的牡蠣中分離得到一株球毛殼菌Chaetomium globosum（菌株編號ML4）。本課題組對其發酵液的化學成分進行分離純化，得到5個化合物chaetoglobosin V（1），chaetoglobosin Vb（2），tyrosol（3），5methyluracil（4），uracil（5），化合物1結構見圖1。進一步研究發現，chaetoglobosin V（1）對人肝癌細胞株SMMC7721具有明顯的體外抗腫瘤活性；該活性與誘導SMMC7721細胞G2期細胞周期阻滯以及細胞凋亡相關；還發現，chaetoglobosin V（1）的誘導凋亡作用同時涉及線粒體途徑和死亡受體途徑，且受到PI3K/Akt信號通路的調控。endprint

1材料

AVANCE600核磁共振儀、AVANCE Ⅲ HD 400核磁共振儀和UHRTOF maXis 超高分辨飛行時間質譜儀，德國Bruker公司；Primaide高效液相色譜儀和UV3900紫外可見分光光度計，日本日立公司；Isolera one快速純化制備液相色譜儀，瑞典Biotage公司；Thermo Series Ⅱ CO2細胞培養箱，美國Thermo公司；ELX800多功能酶標儀，美國BioTek公司；FACSCalibur流式細胞儀，美國BD公司；JYZY5 Western blot電泳儀，美國BioRad公司；5475R超速低溫離心機和5415D小型高速離心機，德國Eppendorf公司等。

LaChrom C18色譜柱（46 mm×150 mm，5 μm），日本日立公司；Poroshell 120 ECC18色譜柱（46 mm×150 mm，5 μm），美國安捷倫公司；柱色譜硅膠（200～300目），青島海洋化工廠分廠；GF254硅膠預制板（20 cm×20 cm），國藥集團化學試劑有限公司；Silica gel 60 F254鋁板（20 cm×20 cm），德國Merck公司；Sephadex LH20，瑞典Pharmacia Biotech；氘代丙酮和氘代DMSO，美國Cambridge Isotope Laboratories；氘代甲醇，青島騰龍微波科技公司；色譜純甲醇，美國TEDIA化學試劑有限公司；人肝癌細胞株SMMC7721，上海中科院細胞研究所；RPMI1640培養基，美國GIBCO公司；新生牛血清，上海洛神生物技術有限公司；四甲基偶氮唑鹽（MTT），美國Amresco公司；碘化丙錠（PI），上海江萊生物有限公司；FITC Annexin V細胞凋亡檢測試劑盒，美國BD公司；胰蛋白酶和PVDF膜，北京索萊寶科技有限公司；兔抗人Bcl2，Bax，Caspase3，Caspase8，Akt，pAkt和βactin的單克隆抗體，小鼠抗人Caspase9的單克隆抗體和羊抗兔IgG抗體，美國Cell Signaling Technology公司；兔抗小鼠IgG抗體，北京博士德公司；脫脂奶粉，北京普利萊公司；蛋白質Marker，美國Ferments公司；Super ECL Plus超敏發光液，北京普利萊公司；順鉑，江蘇豪森藥業股份有限公司；其余試劑均為分析純。

2方法

21菌株來源和發酵液的提取與分離菌株ML4是王鳳舞博士2014年從青島膠州灣海域牡蠣中分離得到的一株真菌，根據菌株形態學特征以及18S rDNA序列比較，鑒定其為球毛殼菌Ch. globosum [5]。該菌種現保存到中國普通微生物菌種保藏管理中心，菌種編號為CGMCC No6571。

Ch. globosum ML4采用液體發酵法[5]。發酵液經乙酸乙酯萃取3次、減壓蒸餾去除溶劑后得粗浸膏32 g。粗浸膏經硅膠柱色譜分離，梯度洗脫（氯仿甲醇 100∶0～0∶100）得到7個組分。Fr3（020 g）經Sephadex LH20凝膠柱色譜（氯仿甲醇1∶1）分離得到Fr36（5810 mg）和Fr37（1553 mg）。Fr36經HPLC（LaChrom C18色譜柱，220 nm，甲醇水 50∶50，08 mL·min-1）分離純化得到化合物2（13 mg，tR =199 min）和化合物1（12 mg，tR =319 min）。Fr37經HPLC（LaChrom C18色譜柱，220 nm，甲醇水 40∶60，08 mL·min-1）分離純化得到化合物3（05 mg，tR =155 min）。Fr4（020 g）經Sephadex LH20凝膠柱色譜（氯仿甲醇1∶1）分離得到的Fr46（5670 mg），先經TLC制備、再經HPLC（Poroshell 120 ECC18色譜柱，205 nm，甲醇水 30∶70，08 mL·min-1）進一步純化得到化合物4（20 mg，tR =23 min）。Fr5（028 g）經硅膠柱色譜得到的Fr54（114 mg）經Sephadex LH20凝膠柱色譜（氯仿甲醇1∶1）分離得到Fr546（550 mg），Fr546經TLC制備、再經HPLC（LaChrom C18色譜柱，254 nm，甲醇水 20∶80，08 mL·min-1）純化得到化合物5（15 mg，tR =21 min）。

22MTT法測定化合物體外細胞毒活性SMMC7721細胞在含10%新生牛血清的RPMI 1640培養液中，于37 ℃，5% CO2培養箱內培養至對數生長期。收集對數生長期的SMMC7721細胞，以1×104個/孔接種于96孔板，常規貼壁培養24 h后，實驗組分別加入2 μL待測化合物（少量DMSO助溶，DMSO終濃度01%），陰性對照組（negative control，NC）和空白組分別加入等體積DMSO和培養液。培養48 h后，每孔加入20 μL MTT，繼續孵育4 h。然后棄去培養液，每孔滴加150 μL DMSO，37 ℃振蕩10 min，使結晶充分溶解，酶標儀在波長490 nm處測定各孔吸光度。

23流式細胞術分析細胞周期取對數生長期SMMC7721細胞接種在6孔板中，在37 ℃，5% CO2培養箱內培養12 h。然后每孔分別加入等量的化合物，干預48 h。收集細胞，用預冷的70%乙醇固定細胞，4 ℃保存過夜，至少固定18 h。上機測試前，2 400 r·min-1離心10 min除去乙醇，將細胞重懸于04 mL碘化丙錠染液中（其中含RNaseA），37 ℃保溫30 min（碘化丙錠染液終濃度為50 mg·L-1，RNaseA終濃度為20 mg·L-1），然后用400目網篩過濾。最后，進行流式細胞儀分析，應用ModFit LT30軟件分析細胞周期中各期細胞所占總細胞的百分率。endprint

24流式細胞術檢測細胞凋亡率采用Annexin V/PI雙染技術檢測細胞凋亡率。取對數生長期SMMC7721細胞，調整細胞密度為80×105個/mL，每孔05 mL接種于6孔板中，放入37 ℃，5% CO2培養箱中培養12 h。加藥物20 μL于孔內，處理48 h；胰酶消化，收集細胞至15 mL離心管中，1 000 r·min-1離心5 min，并用PBS洗滌2遍；吸棄上清，每管加入500 μL 1×binding buffer重懸細胞；每管中加入5 μL AnnexinV和10 μL PI混勻，避光室溫孵育15 min；300目尼龍網過濾，混懸均勻，用流式細胞儀進行檢測。

25Western blot法檢測蛋白表達取加藥處理后的細胞，棄去培養液，以預冷的PBS洗滌2次，加入相應體積的1×SDS蛋白裂解液，冰上放置30 min。以刮棒刮下細胞，沸水浴10 min，然后4 ℃12 000 r·min-1離心10 min。取上清，用改良Lowry法進行蛋白定量。調整樣品蛋白質濃度使其相等，保證每個樣品孔蛋白上樣量一致。蛋白質經SDSPAGE后，轉移至PVDF膜上。PVDF膜以5%脫脂奶粉封閉4 h后，加入一抗過夜。經洗滌后，再加入辣根過氧化酶標記的二抗，室溫下反應3～4 h。每步反應結束均用TBST洗滌3次，每次10 min。最后顯影，用Image J軟件進行定量分析。

26統計分析方法采用SPSS 170進行單因素方差分析，組間差異采用t檢驗法比較，P<005為差異有顯著性，P<001為差異有非常顯著性。

3結果

31結構鑒定化合物1白色粉末；HRESIMS m/z 551251 4 [M+Na]+，567245 4 [M+K]+，分子式C32H36N2O5（C32H36N2O5Na理論值551251 6）；1HNMR（DMSOd6，600 MHz）δ：1089（1H，s，1′NH），888（1H，s，19OH），821（1H，s，2NH），744（1H，d，J=78 Hz，H4′），733（1H，d，J=84 Hz，H7′），706（1H，t，J=72 Hz，H6′），704（1H，s，H2′），697（1H，t，J=72 Hz，H5′），628（1H，dd，J=156，108 Hz，H13），517（1H，t，J=132 Hz，H14），469（1H，d，J=72 Hz，7OH），385（1H，s，H7），355（1H，dd，J=180，78 Hz，H22a），338（1H，m，H3），294（1H，s，H4），279（1H，s，H17），272（1H，dd，J=144，54 Hz，H10a），255（1H，dd，J=132，72 Hz，H15a），243（1H，dd，J=174，54 Hz，H22b），241（1H，s，H21），231（1H，dd，J=144，102 Hz，H10b），230（1H，m，H16），214（1H，t，J=102 Hz，H8），185（3H，s，H25），179（1H，dd，J=240，108 Hz，H15b），152（3H，s，H12），111（3H，s，H11），064（3H，d，J=66 Hz，H24）；13CNMR（DMSOd6，150 MHz）δ：2095（C23），2020（C20），1738（C1），1481（C19），1449（C18），1360（C1′a），1337（C6），1317（C13），1313（C14），1269（C3′a），1255（C5），1234（C2′），1208（C6′），1183（C5′），1179（C4′），1113（C7′），1098（C3′），677（C7），630（C9），569（C3），534（C8），487（C4），418（C17），408（C22），400（C21），379（C15），316（C10），311（C16），168（C11），153（C24），143（C12），119（C25）； 13CNMR（CDCl3，125 MHz）δ：2087（C23），2027（C20），1750（C1），1476（C18），1464（C19），1364（C1′a），1351（C14），1325（C6），1300（C13），1268（C5），1267（C3′a），1233（C2′），1222（C6′），1196（C5′），1183（C4′），1115（C7′），1109（C3′），691（C7），632（C9），574（C3），540（C8），496（C4），430（C17），413（C22），399（C21），384（C15），326（C10），319（C16），174（C11），156（C24），141（C12），122（C25）。以上數據與文獻[6]對照，故鑒定化合物1為chaetoglobosin V。

化合物2白色粉末；HRESIMS m/z 551251 1 [M+Na]+，分子式C32H36N2O5（C32H36N2O5Na理論值551251 6）；1HNMR（acetoned6，600 MHz）δ：1013（1H，s，1′NH），756（1H，d，J=78 Hz，H4′），740（1H，d，J=78 Hz，H7′），728（1H，s，2NH），716（1H，s，H2′），710（1H，t，J=72 Hz，H6′），702（1H，t，J=78 Hz，H5′），624（1H，dd，J=150，102 Hz，H13），522（1H，m，H14），408（1H，d，J=84 Hz，H7），366（1H，d，J=72 Hz，7OH），360（1H，m，H3），350（1H，dd，J=156，54 Hz，H22a），324（1H，s，H4），287（1H，m，H10a），261（1H，dd，J=138，90 Hz，H10b），241（1H，s，H21），230（1H，d，J=144 Hz，H15a），227（1H，t，J=96 Hz，H8），225（1H，s，H17），216（1H，d，J=150 Hz，H22b），206（3H，s，H25），199（1H，dd，J=240，120 Hz，H15b），167（1H，m，H16），163（3H，s，H12），128（3H，s，H11），108（3H，d，J=66 Hz，H24）；13CNMR（acetoned6，150 MHz）δ：2129（C23），2044（C20），1763（C1），1515（C18），1477（C19），1386（C1′a），1356（C6），1353（C14），1326（C13），1293（C3′a），1281（C5），1255（C2′），1232（C6′），1207（C5′），1202（C4′），1133（C7′），1126（C3′），710（C7），671（C9），595（C3），561（C17），556（C8），523（C21），518（C4），462（C15），454（C22），446（C16），341（C10），230（C24），184（C11），178（C25），156（C12）； 13CNMR（C5D5N，150 MHz）δ：2125（C23），2042（C20），1758（C1），1517（C18），1468（C19），1377（C1a），1349（C6），1337（C14），1321（C13），1281（C3′a），1269（C5），1247（C2′），1218（C6′），1194（C5′），1190（C4′，1122（C7′），1115（C3′），698（C7），664（C9），584（C3），550（C8），550（C17），511（C21），510（C4），448（C15），446（C16），435（C22），337（C10），220（C24），175（C11），171（C25），150（C12）。以上數據與文獻[7] 對照，故鑒定化合物2為chaetoglobosin Vb。endprint

化合物3白色粉末；1HNMR（CD3OD，600 MHz）δ：701（2H，d，J=84 Hz，H4，H8），668（2H，d，J=84 Hz，H5，H7），367（2H，t，J=42 Hz，H1），270（2H，t，J=72 Hz，H2）；13CNMR（CD3OD，150 MHz）δ：1568（C6），1309（C3，C4，C8），1162（C5，C7），646（C1），395（C2）。以上數據與文獻[8] 對照，故鑒定化合物3為酪醇（tyrosol）。

化合物4白色粉末；HRESIMS m/z 149032 3[M+Na]+，分子式C5H6N2O2（C5H6N2O2Na理論值149032 1）；1HNMR（DMSOd6，600 MHz）δ：1082（2H，br s，1NH，3NH），724（1H，d，J=12 Hz，H6），172（3H，d，J=12 Hz，5CH3）。以上數據與文獻[9] 對照，故鑒定化合物4為5甲基尿嘧啶（5methyluracil）。

化合物5白色粉末；1HNMR（DMSOd6，600 MHz）δ：1083（2H，br s，1NH，3NH），738（1H，d，J=78 Hz，H6），541（1H，d，J=78 Hz，H5）。以上數據與文獻[9] 對照，故鑒定化合物5為尿嘧啶（uracil）。

32化合物的體外細胞毒活性采用MTT法測定化合物對SMMC7721細胞的體外細胞毒活性，結果發現，化合物1能劑量依賴性地抑制SMMC7721細胞的增殖，其IC50為605 mg·L-1，而陽性對照藥順鉑的IC50為1996 mg·L-1，見圖1。

與對照組相比1）P<005，2）P<001（圖2～6同）。

33化合物1對SMMC7721細胞的細胞周期影響細胞增殖受細胞周期的精密調控，細胞周期調控的異常成為腫瘤產生的一種內因。為探討化合物1對SMMC7721細胞的增殖抑制作用是否與細胞周期阻滯相關，本研究采用一定濃度的化合物1處理SMMC7721細胞48 h，然后收集細胞，經乙醇固定、PI染色，然后進行細胞周期分析。結果發現，化合物1干預后，SMMC7721細胞的G2期細胞比例由陰性對照（NC）的（073±055）%分別增加至（199±084）%，（403±138）%，（783±456）%，（1252±324）%，（2404±651）%。這表明，化合物2可導致SMMC7721細胞的G2期細胞增多，即G2期細胞周期阻滯，見圖2。

34化合物1對SMMC7721細胞凋亡率的影響腫瘤不僅是細胞增殖失控和細胞分化異常的結果，更與腫瘤細胞凋亡失衡有著密切的關系[10]。為探究化合物1對SMMC7721細胞的增殖抑制作用是否與誘導細胞凋亡相關，本研究采用一定濃度的化合物1處理SMMC7721細胞48 h后，收集細胞，檢

測細胞凋亡率。結果發現，化合物1能劑量依賴性地促進SMMC7721細胞凋亡，與陰性對照組相比，藥物處理組細胞凋亡率（包括早期凋亡和晚期凋亡）分別上升至（728±405）%，（1308±745）%，（1439±775）%，（1629±682）%，（2116±552）%，見圖3。

35化合物1對SMMC7721細胞中Bcl2和Bax表達的影響bcl2基因家族是細胞凋亡的重要調節者，Bcl2蛋白家族包括2個蛋白亞群，一類抑制細胞凋亡（抗凋亡蛋白），如：Bcl2，BclxL等；另一類促進細胞凋亡（促凋亡蛋白），如：Bax，Bad，Bim，Bid等。研究發現，bcl2原癌基因是抑制凋亡的主要基因，多種腫瘤組織中bcl2基因高表達[11]。Bcl2/Bax的比值在凋亡過程中具有重要意義，Bcl2和Bax可通過形成同源或異源二聚體來調節細胞凋亡[12]。本研究采用一定濃度的化合物1處理SMMC7721細胞48 h，收集細胞蛋白，采用Western blot分析Bcl2和Bax的含量，以未加藥孔蛋白作陰性對照（NC），βactin為內參。結果發現，化合物1處理后，SMMC7721細胞中Bcl2表達明顯下降，Bax表達略微上升，Bcl2/Bax比值明顯下降，見圖4，提示Bax可通過形成同源二聚體促進SMMC7721細胞凋亡。

36化合物1對SMMC7721細胞Caspases蛋白的影響Caspases蛋白是一族在細胞凋亡中發揮重要

作用的效應蛋白，它們一般通過蛋白水解激活或失活底物蛋白實現對細胞凋亡的調節[13]。其中，Caspase3 是細胞凋亡中最重要的執行者之一，它的激活是凋亡發生不可逆轉的一步。目前，細胞凋亡有2條主要的途徑，即Caspase9參與的線粒體凋亡途徑和Caspase8參與的死亡受體途徑[14]。為確認化合物1對SMMC7721細胞的誘導凋亡作用是否與上述2條凋亡途徑相關，本研究采用一定濃度的化合物1處理SMMC7721細胞48 h，結果發現，Caspases3，8，9的表達均明顯上升，見圖5，這說明化合物1誘導的SMMC7721細胞凋亡同時涉及線粒體凋亡途徑和死亡受體途徑。

37化合物1對SMMC7721細胞中PI3K/Akt信號通路活性的影響PI3K（phosphoinositide 3 kinase，磷脂酰肌醇3激酶）/Akt（也被稱為蛋白激酶B，protein kinase B，PKB）信號通路是細胞內重要的信號轉導通路，通過調節多種蛋白的磷酸化而參與細胞增殖、分化和凋亡等[15]。Akt是原癌基因cakt的表達產物，也是PI3K分子下游重要的靶蛋白。PI3K/Akt信號通路與腫瘤的發生發展密切相關，腫瘤細胞中PI3K/Akt信號通路活性常異常增高[16]。為了解化合物1對SMMC7721細胞中PI3K/Akt信號通路活性的影響，本研究采用一定濃度的化合物1處理SMMC7721細胞48 h后，采用Western blot法檢測細胞中Akt和pAkt的水平。結果發現，SMMC7721細胞中Akt和pAkt水平均明顯下降見圖6，可推測化合物1通過下調Akt蛋白的表達和降低Akt的磷酸化活性而誘導SMMC7721細胞凋亡。endprint

4結論

特殊生態環境下的微生物與特殊的次生代謝產物密切相關，因此，微生物源新藥或先導化合物的篩選將更多注意力集中于特殊生境微生物。C globosum ML4是從青島海域的牡蠣中分離獲得的一株海洋真菌，其為適應外部特殊環境，自身形成極為特殊的基因類型和生理機制，有著不同的遺傳背景和代謝途徑，能夠產生特殊的次生代謝產物。本研究從C globosum ML4發酵液中分離獲得5個化合物，其中chaetoglobosin V（1）和chaetoglobosin Vb（2）是細胞松弛素化合物。細胞松弛素化合物因具有抗菌、抗腫瘤、抗氧化應激、抑制HIV蛋白酶、免疫抑制、抑制乙酰膽堿酯酶和神經細胞保護等多種藥理活性[1718]，而引起科研人員的廣泛關注。本研究發現，chaetoglobosin V（1）對SMMC7721細胞具有一定的體外抗腫瘤活性，其可劑量依賴性引起SMMC7721細胞G2期阻滯、誘導SMMC7721細胞凋亡；chaetoglobosin V（1）還可下調SMMC7721細胞中抑凋亡蛋白Bcl2的表達、上調促凋亡蛋白Bax的表達，同時SMMC7721細胞中Caspases3，8，9蛋白表達增加、Akt蛋白的表達和磷酸化水平皆下降，這說明chaetoglobosin V（1）對SMMC7721細胞的體外抗腫瘤活性與G2期細胞周期阻滯和細胞誘導凋亡相關；其誘導凋亡作用與Bcl2和Bax相關，涉及線粒體途徑和死亡受體途徑，且與PI3K/Akt信號通路活性下降相關。其抗腫瘤機制有待進一步深入研究。

腫瘤的發生發展與細胞凋亡密切相關。細胞凋亡在腫瘤發生發展過程中主要起負調控作用，可以阻遏腫瘤細胞迅速生長，不少腫瘤的發生機制與凋亡受阻密切相關[10，19]。研究發現，廣泛用于肝癌、胃癌、卵巢癌、食道癌和肺癌等的化療藥物長春新堿、喜樹堿、5氟尿嘧啶和順鉑等，可通過誘導腫瘤細胞凋亡來治療癌癥[20]。因此，研究藥物誘導腫瘤細胞凋亡的分子機制，可以為癌癥的治療以及新藥開發提供新思路。

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[責任編輯丁廣治]endprint