FUS-200全自動尿沉渣分析儀的性能評價

曹笠,張廣波,許關(guān)斌

大連市第三人民醫(yī)院 輸血科,遼寧 大連 116033

FUS-200全自動尿沉渣分析儀的性能評價

曹笠,張廣波,許關(guān)斌

大連市第三人民醫(yī)院 輸血科,遼寧 大連 116033

目的對FUS-200全自動尿沉渣分析儀質(zhì)量性能進行評價,證實其性能滿足臨床要求,并達到ISO 15189標準要求.方法按照有關(guān)文件規(guī)定,對FUS-200全自動尿沉渣分析儀的部分項目進行檢測,如精密度、線性范圍、攜帶污染率、穩(wěn)定性能、陰性符合率、與人工顯微鏡檢查可比性等各項指標.結(jié)果FUS-200全自動尿沉渣分析儀的各項指標均在文件規(guī)定允許范圍內(nèi),滿足臨床需求.結(jié)論必須定期對實驗室儀器進行性能驗證,確保檢測結(jié)果的準確性.

全自動尿沉渣分析儀;線性范圍;性能評價;精密度;穩(wěn)定性

引言

至20世紀90年代,國際實驗室組織互認已初步形成,實驗室認可活動也由此變得極為重要[1].為了保證檢驗質(zhì)量以及參加ISO15189醫(yī)學實驗室認可,檢驗科每年必須根據(jù)本科室具體條件,用試驗去評價檢測系統(tǒng)的基本分析性能,至少應包括精密度、準確度、線性范圍等[2-4].其中,根據(jù)ISO15189 5.3.1要求,實驗室設備需具有完整性、有效性和適用性.新儀器使用前應對其精密度、線性范圍、攜帶污染率及準確性等進行評價以確保其性能及要求.對于已使用的儀器設備應按要求進行校準和比對.此外,ISO15189 5.3.11對儀器維修后的驗證提出了要求,即當設備脫離本實驗室或維修、維護過后,在使用前應對其進行檢查,確保其性能滿足[5].

目前,尿液有形成分常用的檢查方法有傳統(tǒng)的顯微鏡檢查法和儀器檢查法,前者客觀準確,后者操作簡單快速,尿液標本不需離心.迪瑞的FUS-200全自動尿沉渣分析儀是影像法與流式細胞術(shù)的結(jié)合,符合國際NCCLS標準(國際臨床檢驗標準專業(yè)委員會)和中國CCCLS標準(中國臨床檢驗標準專業(yè)委員會)關(guān)于尿液檢測標準化的規(guī)定.本文依照ISO15189標準,對FUS-200全自動尿沉渣分析儀的部分檢測項目的精密度、線性范圍、攜帶污染率、穩(wěn)定性能、陰性符合率、與人工顯微鏡檢查可比性等各項指標進行系統(tǒng)評價.

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

FUS-200全自動尿沉渣分析儀(長春迪瑞公司)及有效期內(nèi)配套試劑;普通雙目生物顯微鏡(Olympus);尿沉渣定量計數(shù)板;離心機.

1.2 標本來源

收集2013年5月～2013年12月我院住院患者晨尿標本100例,用一次性塑料尿杯收集尿液標本,檢測前充分混勻,倒入試管,置于測試架上.

1.3 試驗方法

(1)FUS-200全自動尿沉渣分析儀測定過程中嚴格按照儀器說明書對每份充分混勻的尿液標本進行測定,記錄實驗結(jié)果.

(2)評價方法.精密度測定:高、中、低3種濃度的紅細胞懸液標本,連續(xù)在FUS-200全自動尿沉渣分析儀上測定20次,計算CV%.

線性測定:分別取含RBC濃度為5578個/μL和WBC濃度為5272個/μL的兩份標本,用生理鹽水做倍比稀釋,儀器檢測后結(jié)果與理論值做線性回歸分析.

攜帶污染率:分別選取RBC、WBC高值、低值的標本,在儀器上先檢測高值標本3次,記錄為H1、H2、H3,隨后檢測低值標本3次,記錄為L1、L2、L3,然后按公式:

計算互染率.檢測3次,結(jié)果取均值.

穩(wěn)定性觀察:新鮮尿液標本要求必須2 h內(nèi)完成,故對標本做2 h不同時段測定,采集后室溫靜置,在2 h內(nèi)不同時段(0、30、60、90、120 min)用FUS-200全自動尿沉渣分析儀測定,觀察儀器檢測結(jié)果的穩(wěn)定性.

陰性符合率:按CLSI推薦要求將尿液離心后,選取人工計數(shù)陰性的尿液標本20份進行儀器檢測,計算陰性率.

(3)尿沉渣定量計數(shù)板的測定.取均勻混合尿10 mL,1500 r/min離心5 min后用吸管吸去上清液9.8 mL,將剩余的0.2 mL尿沉渣充分混勻,用移液管吸取滴入計數(shù)板,稍等片刻,首先用低倍鏡觀察,用高倍鏡計數(shù)10大方格內(nèi)的有形成分(上皮、管形、粘液絲在低配鏡下計數(shù)),記錄實驗結(jié)果.所有標本均在2 h內(nèi)完成.結(jié)果計算:離心的尿液標本的細胞數(shù)(細胞數(shù)/μL)=10大方格的細胞數(shù)/濃縮倍數(shù).鏡檢由兩名經(jīng)驗豐富的主管檢驗師進行.

1.4 統(tǒng)計學分析

用quot;Excelquot;軟件對所有數(shù)據(jù)進行數(shù)學統(tǒng)計,SPSS 11.5軟件進行相關(guān)性分析.

2 結(jié)果

2.1 儀器性能評價

(1)精密度測定.對FUS-200全自動尿沉渣分析儀的精密度進行檢測的結(jié)果,見表1.高、中、低3種濃度的紅細胞懸液CV值分別為2.49%、5.48%、6.9%,顯示儀器測定精密度符合要求.

表1 精密度測定 (N=20次)

(2)線性測定.經(jīng)測定,RBC的相關(guān)系數(shù)為0.997,回歸方程為y=0.995x+25.67;WBC的相關(guān)系數(shù)為0.995,回歸方程為y=0.815x+20.54,儀器在該檢測范圍內(nèi)線性良好.

(3)攜帶污染率測定.攜帶污染率測定結(jié)果,見表2.紅細胞攜帶污染率為0.4%,白細胞攜帶污染率為0.54%,均lt;1%.

(4)儀器檢測穩(wěn)定性.儀器穩(wěn)定性測定結(jié)果,見表3.顯示儀器檢測在2 h時間段內(nèi)重復性、穩(wěn)定性良好,同時也反映儀器對標本混勻力度符合要求.

表2 互染率測定(%)

表3 儀器穩(wěn)定性測定

(5)通過人工計數(shù)和儀器檢測結(jié)果比對,陰性符合率達到100%.

(6)尿沉渣定量計數(shù)板鏡檢法與FUS-200檢測RBC、WBC結(jié)果比較,RBC的相關(guān)系數(shù)為0.947,回歸方程為y=1.948x+1.71;WBC的相關(guān)系數(shù)為0.912,回歸方程為y=2.45x+0.86.經(jīng)秩和檢驗,兩者均Pgt;0.05,無統(tǒng)計學意義.

3 討論

傳統(tǒng)尿沉渣顯微鏡檢查簡便易行,是臨床醫(yī)學檢驗工作中識別有形成分的quot;金標準quot;[6-8],但是其操作要求高,費時,重復性差,且不能定量報告結(jié)果,不利于臨床動態(tài)觀察[9].

迪瑞FUS-200全自動尿沉渣分析儀是國產(chǎn)的全自動尿液有形成分分析儀,采用流式細胞技術(shù)與自動粒子識別系統(tǒng)來分類和定量12大類尿液有形成分,保證尿中有形成分沒有重疊,計數(shù)準確;采用數(shù)字成像技術(shù),每個樣本650檢測RBC、WBC幀圖片,也就是650個視野(過去人工判讀觀察在10個視野左右,受個人因素影響),大大提高檢測容量,容量的加大也就保證最大限度的避免了陽性標本漏檢和誤檢,提高了檢測結(jié)果的準確性.其定量成分包括:紅細胞、白細胞、白細胞團、透明管型、未分類管型、鱗狀上皮細胞、細菌、酵母菌、結(jié)晶、粘液絲和精子等,并可同時給出直觀、清晰的各種有形成分的圖像信息.但全自動尿沉渣分析儀只能檢測尿液中完整的有形成分[10],無法檢測已經(jīng)破壞的細胞,這就要求尿液標本的新鮮,不可應用存放過久或者被污染的尿液標本.

本文研究顯示:該儀器的重復性好,攜帶污染率低,線性范圍廣,這與國內(nèi)大多數(shù)研究報道是一致的[11-12],檢驗前有效的混勻能保證在2 h的檢測過程中不受有形成分自然沉降的影響,結(jié)果穩(wěn)定性可靠、無漂移;儀器線性范圍廣,高值、低值標本無需稀釋或濃縮,符合不離心標本直接進行檢測的要求.盡管離心標本可以較好的濃縮尿液中的各類有形成分,提高陽性率和各種病理成分的撿出率,但離心過強不可避免會有部分細胞被破壞,離心太輕又不能完全沉淀有形成分,且在結(jié)果計算時除以濃縮系數(shù)又放大了該部分誤差[13-14].專家指出:不離心鏡檢法直接計數(shù)尿中紅、白細胞,只要在計數(shù)范圍達到一定量時,不但不會降低陽性檢出率,而且較真實地反映尿中紅、白細胞濃度,接近于真實,是檢查尿液有形成分的理想方法,但于現(xiàn)實工作中因效率低下和人工誤差而不實用.而FUS-200尿沉渣分析儀檢測不離心標本時做到對低含量目標也能檢出、無漏檢、無論大小目標都能識別,很好的解決了這個問題.

需要指出的是,鏡檢是形態(tài)學檢查的金標準,儀器分析、識別細胞還存在許多局限性.儀器對各類有形成分的自動識別,是會受各種因素的影響:① 焦距的影響:儀器提供了快捷調(diào)焦和標準調(diào)焦系統(tǒng),快捷調(diào)焦由操作者手工操作,以便固定當日檢測的焦距,卻因此易受人為因素的影響,造成儀器識別的準確性因人而異;② 受尿液成份的影響:尿液含多量粘液絲和磷酸鹽等多量結(jié)晶時,細胞形態(tài)模糊不清,儀器的識別的準確性會下降;③ 對高濃度標本:成堆存在的尿液有形成分,使儀器難以識別.

因儀器陰性過篩的可靠性,對陰性結(jié)果一般可以直接發(fā)出報告.而對尿液有形成分復雜的、儀器不能識別的成分,必須進行必要的人工圖像復核,可極大的降低尿有形成分的假陽性率[15],而尿液分析儀的尿常規(guī)檢查不能取代顯微鏡尿沉渣檢查,在臨床尿液檢查中,應做到兩種檢查方法相結(jié)合,才能確保診斷的準確率[16].

同時ISO15189認可,以及醫(yī)院等級達標也對尿沉渣的檢查提出了更高的要求,因此建立尿沉渣的質(zhì)量性能評價是十分必要的,我們不能只滿足于全自動尿沉渣分析儀的方便快捷,實驗室必須定期對儀器進行精密度、線性范圍、攜帶污染率、穩(wěn)定性能、陰性符合率等性能驗證,并定期進行校準和比對,定期做好室內(nèi)質(zhì)控,定期參加室間質(zhì)評活動,保證實驗結(jié)果的準確性、精確性.

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本文編輯 王婷

Performance Evaluation of FUS-200 Automatic Urine Sediment Analyzer

CAO Li, ZHANG Guangbo, XU Guanbin
Department of Blood Transfusion, The Third People's Hospital of Dalian, Dalian Liaoning 116033, China

ObjectiveIn this study, the quality performance of the FUS-200 automated urine sediment analyzer was evaluated, and its performance was proved to meet the clinical requirements and the ISO 15189 standard.MethodsWe evaluated the performance of FUS-200 automated urine sediment analyzer by precision, linearity, carryover contamination rate, stability, the negative coincidence rate and other indicators according to published standard.ResultsThe results of precision, linearity, carryover contamination rate were all in the allowable range.ConclusionPerformance verification of laboratory instruments must be performed regularly to ensure the accuracy of the test results.

automated urine sediment analyzer; linearity range; performance evaluation; precision; stability

R446.12

B

10.3969/j.issn.1674-1633.2017.10.023

1674-1633(2017)10-0086-03

2016-12-27

2017-02-26

作者郵箱:593299596@qq.com