非小細胞肺癌患者肺癌自身抗體檢測的臨床意義

時廣利 張鑫桐 尹顏軍 白萬秋 孫勇

非小細胞肺癌患者肺癌自身抗體檢測的臨床意義

時廣利 張鑫桐 尹顏軍 白萬秋 孫勇

目的探討血清7種肺癌自身抗體在非小細胞肺癌(NSCLC)患者中的水平及其臨床意義。方法采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測健康人、肺部良性疾病患者和NSCLC患者血清中7種肺癌自身抗體(p53、PGP、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGEA1、CAGE)的表達量，并計算它們診斷肺癌的敏感性和特異性。結果NSCLC患者血清中7種肺癌自身抗體的表達水平顯著高于健康人對照組和肺部良性疾病組，差異有統計學意義(Plt;0.05)；肺癌自身抗體p53、PGP、GBU4-5和CAGE在Ⅲ期+Ⅳ期NSCLC中的表達水平顯著高于Ⅰ期+Ⅱ期(Plt;0.05)；血清7種肺癌自身抗體對NSCLC檢測的敏感性為54.5%、特異性為94.3%；7種肺癌自身抗體對I期、II期NSCLC檢測的敏感性為34.6%。結論血清肺癌自身抗體的檢測對于NSCLC的輔助診斷和早期診斷有一定的價值。

非小細胞肺癌；肺癌自身抗體；輔助診斷

肺癌是全球范圍內最常見的惡性腫瘤之一，嚴重威脅著人類的健康，其發病率和死亡率均排在第一位。肺癌患者中非小細胞肺癌(NSCLC)大約占80%左右，NSCLC的5年存活率不到20%，而及時發現并治療的ⅠA期NSCLC患者，其5年生存率可達80%左右[1]。由其可見，及時發現和治療早期肺癌能夠大大提高NSCLC患者的生存率。人體的免疫系統能夠對正在生長的腫瘤產生免疫反應，對腫瘤的免疫應答包括體液免疫應答和細胞免疫應答，并產生大量的自身抗體，使得在腫瘤早期就能檢測到高表達的自身抗體。本文重點研究血清7種肺癌自身抗體在NSCLC患者中的臨床意義，評價其對NSCLC輔助診斷和早期診斷方面的臨床應用價值。

資料與方法

一、研究對象

初治NSCLC患者130例，選自2016年2月至2016年11月首都醫科大學附屬北京胸科醫院初治住院患者，男性78例、女性52例。所有患者以往沒有接受過放療或者化療，并且全部經過組織學或細胞學方法確診。肺部良性疾病組56例，為北京胸科醫院收治確診的肺炎或肺結核患者，其中男性26例、女性30例。健康對照組50名，為首都醫科大學附屬北京胸科醫院體檢健康職工，其中男性24名、女性26名，身體各項檢測指標正常、無急性和慢性等疾病。

二、研究方法

采集NSCLC患者、肺部良性疾病患者和健康人空腹靜脈血4mL，所有標本分離出血清，-20℃凍存，集中進行檢測。全部標本均采用酶聯免疫吸附法(ELISA)進行7種肺癌自身抗體的檢測，包括腫瘤蛋白p53(p53)、神經元胞質蛋白基因產物(PGP)、干細胞轉錄因子(SOX2)、G抗原7(GAGE7)、腫瘤抗原(GBU4-5)、腫瘤-睪丸抗原(MAGEA1)、CAGE。檢測試劑盒由杭州凱保羅生物技術有限公司生產，應用Thermo Multiskan酶標儀進行測定。

三、統計學方法

統計學分析應用SPSS17.0軟件進行,計量資料以均數±標準差表示，并進行數據正態性分布檢驗，計量資料呈正態分布采用t檢驗，率的比較采用χ2檢驗，Plt;0.05時為差異具有統計學意義。

結 果

一、NSCLC患者和對照組血清中肺癌自身抗體的表達量

NSCLC患者血清中7種肺癌自身抗體(p53、PGP、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGEA1、CAGE)的表達量均顯著高于肺部良性疾病組和健康人組，差異有統計學意義，Plt;0.05。(見表1)。

表1 血清肺癌自身抗體在NSCLC和對照組中的表達量(均數±標準差)

二、NSCLC患者血清中肺癌自身抗體的表達量

7種血清肺癌自身抗體在肺鱗癌和肺腺癌中的表達量無顯著性差異(Pgt; 0.05)；血清肺癌自身抗體p53、PGP、GBU4-5和CAGE在Ⅲ期+Ⅳ期NSCLC中的表達水平顯著高于Ⅰ期+Ⅱ期，差異有統計學意義，Plt;0.05。(見表2)。

表2 血清肺癌自身抗體在NSCLC中的表達量(均數±標準差)

注：Ⅲ期+Ⅳ期與Ⅰ期+Ⅱ期比較，a,b,c,dPlt;0.05

三、血清肺癌自身抗體對NSCLC診斷的敏感性、特異性

7種血清肺癌自身抗體對NSCLC檢測的敏感性為54.5%，特異性為94.3%；7種血清肺癌自身抗體對Ⅲ期+Ⅳ期NSCLC檢測的敏感性明顯高于Ⅰ期+Ⅱ期，差異有統計學意義(Plt;0.01)；7種血清肺癌自身抗體對鱗癌和腺癌檢測的敏感性無統計學差異，Pgt;0.05。(見表3)。

表3 血清肺癌自身抗體對NSCLC檢測的敏感性(%)

注：腺癌與鱗癌比較，aPgt;0.05；Ⅲ期+Ⅳ期與Ⅰ期+Ⅱ期比較，bPlt;0.01

討 論

目前，肺癌最常用的診斷方法主要有痰脫落細胞檢查、支氣管鏡以及胸部X線等影像學檢查。但是，支氣管鏡的檢查方式為侵入性，對患者有較大的創傷性，并且每次未必能夠刷檢到癌細胞。痰脫落細胞和胸部X線檢查對于肺癌輔助診斷的敏感性較低，不是理想的診斷方法。盡管目前有學者建議肺癌的常規篩查可以用低劑量螺旋CT的方法，但是低劑量螺旋CT用于肺癌的篩查無標準化的方案，其臨床應用價值仍處于探討階段[2-3]。血液腫瘤標志物在腫瘤篩查中有著重要的臨床價值，并且具有取材方便、創傷性小、價格相對低廉、容易復檢等優點。但是，目前臨床上常用腫瘤標志物(CEA、NSE、Cyfra21-1等)的敏感性較低，尤其是在檢測早期肺癌(Ⅰ期+Ⅱ期)中的敏感性只有15%左右，這些腫瘤標志物在NSCLC的輔助診斷中有較大的局限性[4]。因此，目前臨床非常需要特異性和敏感性都比較理想的肺癌腫瘤標志物，尤其是檢測早期肺癌的腫瘤標志物。

在腫瘤發病早期，機體的免疫系統可識別腫瘤細胞內表達異常的蛋白，即腫瘤相關抗原(TAAs)。TAAs的過表達、突變、錯誤折疊、異常退化等改變可導致癌癥患者產生自身反應性免疫應答，并產生針對這些抗原的自身抗體，少量TAAs刺激即可引起B細胞產生大量的自身抗體[5]。因此，檢測TAAs的自身抗體可作為肺癌早期診斷的分子標記物。p53基因調控腫瘤的發生、生長及凋亡過程，多種癌癥存在p53基因的突變和過表達，并能在血清中檢測到p53蛋白的自身抗體[6]。焉春花[7]等的研究發現，NSCLC中PGP的表達與其神經內分泌分化關系密切。有研究[8]表明，利用免疫組化法檢測轉錄因子SOX2在肺鱗癌組織中的表達率可達到69%，在腺癌組織中的表達率為4.5%，在SCLC中的表達可達70%。GBU4-5作為肺癌早期篩查的標志物之一，和CAGE與其他不同的肺癌標準物聯合可明顯提高肺癌的診斷效率[9]。幸雯[10]等的研究表明，腫瘤-睪丸抗原(NY-ESO-1)、腫瘤蛋白P53(P53)、細胞周期素依賴性蛋白激酶2(CDK2)、膜聯蛋白A2(annexinA2)、胰島素樣生長因子mRNA結合蛋白1(IMPl)、泛素l(ubiquilinl)以及磷酸甘油酸變位酶(PGAMl)共7種自身抗體在NSCLC中檢測的敏感性為68.7%，特異性為91.1%。

本研究用ELISA法檢測健康人、肺部良性疾病患者和NSCLC患者血清中7種肺癌自身抗體(p53、PGP、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGEA1、CAGE)的表達量，研究結果顯示：NSCLC患者血清中7種肺癌自身抗體的表達水平顯著高于健康人對照組和肺部良性疾病組，差異有統計學意義(Plt;0.05)；肺癌自身抗體p53、PGP、GBU4-5和CAGE在Ⅲ期+Ⅳ期NSCLC中的表達水平顯著高于Ⅰ期+Ⅱ期(Plt;0.05)；血清7種肺癌自身抗體對NSCLC檢測的敏感性為54.5%、特異性為94.3%；7種肺癌自身抗體對I期、II期NSCLC檢測的敏感性為34.6%。結果表明，NSCLC患者血清7種肺癌自身抗體的檢測對于NSCLC的輔助診斷和早期診斷有一定的臨床應用價值。今后研究將進一步增加樣本量及樣本類型，探討肺癌自身抗體在肺癌療效監測和預后判斷方面的臨床應用價值。

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Detectionofauto-antibodiesoflungcancerinnon-smallcelllungcancerpatients

SHIGuang-li,ZHANGXin-tong,YINYan-jun,BAIWan-qiu,SUNYong
DepartmentofMedicalLaboratory,BeijingChestHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing101149,China

ObjectiveTo evaluate the clinical significance for diagnosis of detection of 7 types serum autoantibodies in non-small cell lung cancer patients (NSCLC).MethodsEnzyme linked immunosorbent assay (ELISA) method was used to examine the serum 7 types autoantibodies(p53, PGP, SOX2, GAGE7, GBU4-5, MAGEA1, CAGE)levels in NSCLC patients, healthy controls and patients with respiratory infection of the lung. The sensitivity and specificity of diagnosis for NSCLC were calculated.ResultsThe level of 7 types auto-antibodies in patients with NSCLC was significantly higher than that of patients with respiratory infection of the lung and healthy controls (Plt;0.05). The level of auto-antibodies (p53, PGP, GBU4-5 and CAGE) was significantly higher at stage Ⅲ and Ⅳ of NSCLC than that of stage at Ⅰ and Ⅱ (Plt;0.05). The sensitivity and specificity of 7 types auto-antibodies in NSCLC were 54.5% and 94.3%. The sensitivity and specificity of 7 types auto-antibodies in NSCLC of stages I and II was 34.6%.ConclusionThe detection of auto-antibodies in serum has certain clinical significance in aid diagnosis and early diagnosis of NSCLC.

non-small cell lung cancer; auto-antibodies of lung cancer; diagnosis

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.12.035

101149 北京，首都醫科大學附屬北京胸科醫院檢驗科

2017-04-21]