婦科千金片對(duì)大鼠大腸桿菌所致慢性盆腔炎機(jī)制的研究

王清　李紅月

【中圖分類號(hào)】R2 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】2095-6851（2017）11-0-01

慢性盆腔炎是指女性生殖器官、周圍的結(jié)締組織、盆腔腹膜發(fā)生的慢性炎癥。臨床上采用中西醫(yī)合并治療，或西藥單獨(dú)治療、中藥單獨(dú)治療等。雖然西藥在疾病的癥狀上有一定的療效，但是由于其副作用，特別是抗生素的耐藥性，很難根除病因。中藥治療安全性和有效性在臨床上也得到證實(shí)，效果比較理想。婦科千金片屬于國(guó)家中藥品種，但由于其作用機(jī)制不十分明確，但其臨床療效確切，在慢性盆腔炎疾病取得了較好的療效。

1 材料

1.1 動(dòng)物 健康成年雌性SD大鼠60只，體重（200±20）g，購(gòu)于三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院，合格證號(hào)SCXK（鄂）2016-0012。

1.2 藥物 婦科千金片，由株洲千金藥業(yè)股份有限公司提供，批號(hào)20160901

1.3 試劑 大腸桿菌懸液：取購(gòu)自宜昌市防疫站的標(biāo)準(zhǔn)大腸桿菌菌株，用肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)24h后，用生理鹽水稀釋成一定的濃度，進(jìn)行比濁度檢查，使其濃度達(dá)到6×106個(gè)/ml。白介素1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白介素6（IL-6）和白介素10（IL-10）檢測(cè)試劑盒，上海喬羽生物科技有限公司。

2 方法

2.1 造模 取60只體重為200-220g的健康成年雌性SD大鼠隨機(jī)分為6組：空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、假手術(shù)組、婦科千金片低、中、高劑量組，每組10只，低、中、高劑量組分別給予婦科千金片0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg。按文獻(xiàn)方法[1]除空白對(duì)照組外，其余動(dòng)物用戊巴比妥鈉35mg/kg腹腔麻醉，腹部常規(guī)消毒，取下腹部正中切口約2cm，暴露子宮，用4號(hào)針頭在一側(cè)子宮小心進(jìn)針，在注入菌液之前用注射器機(jī)械損傷子宮內(nèi)膜，然后向卵巢方向緩慢注入大腸桿菌菌液0.2mL，注畢，用鑷子夾緊針孔，防止菌液溢出，另一側(cè)子宮不注入菌液，分層關(guān)腹，消毒手術(shù)區(qū)。假手術(shù)組只打開(kāi)腹腔，暴露子宮，不進(jìn)行宮腔內(nèi)注射。造模后第10d開(kāi)始灌胃給藥，每天1次，連續(xù)28d，空白對(duì)照組，模型對(duì)照組和假手術(shù)組動(dòng)物每日給予等容量蒸餾水。

2.2 子宮組織因子炎癥介質(zhì)IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10的測(cè)定[2]

剪取造模側(cè)子宮一段，加10ml生理鹽水，以10000r/min勻漿10min，使組織充分勻漿化。將勻漿液以3000r/min離心15min，取上清液，按試劑盒要求采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（ELISA）測(cè)定勻漿IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10的含量。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS17.0軟件分析，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，首先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，若呈正態(tài)分布則采用單因素方差分析，若呈非正態(tài)分布則采用軼和檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

對(duì)血清IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10的影響空白組與假手術(shù)組無(wú)明顯差異，與模型組存在非常顯著性差異（P<0.01），提示造模成功；經(jīng)治療后，婦科千金片高、中、低劑量IL-1β、TNF-α、IL-6與模型組比較含量降低（P<0.01，P<0.05），IL-10與模型組比較含量升高（P<0.01，P<0.05）。

4 討論

盆腔炎的發(fā)病機(jī)制與自由基、性激素水平、細(xì)胞凋亡、免疫因素如細(xì)胞相關(guān)因子、炎癥介質(zhì)有關(guān)系。炎癥因子主要分為前炎因子和抑炎因子兩類，分別由Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞分泌[3]，前炎因子包括IL-1β、IL-6、TNF-α，主要的抗炎因子有IL-10。炎癥早期前炎因子可以促進(jìn)炎癥的發(fā)展，而抗炎因子可抑制炎癥反應(yīng)及促進(jìn)組織修復(fù)和再生。其中IL-6主要誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)，促進(jìn)淋巴細(xì)胞分化，催化和放大炎癥反應(yīng)和毒性反應(yīng)，造成組織細(xì)胞的損害。TNF-α由活化的單核細(xì)胞等產(chǎn)生，是天然免疫和特異性免疫的重要介質(zhì)，在炎癥信號(hào)傳導(dǎo)的通路中產(chǎn)生強(qiáng)大的連級(jí)效應(yīng)。即TNF-α產(chǎn)生的越多，輸卵管損傷越重，刺激了更多的單核細(xì)胞產(chǎn)生和合成了更多的致炎因子，如IL-1β、IL-6等，加重了組織的損傷和局部粘連等。IL-10是Th2類細(xì)胞的重要因子，是典型的抗炎與免疫抑制細(xì)胞因子并且可以調(diào)節(jié)Th1/Th2細(xì)胞亞群的失衡，使致炎因子與抗炎因子達(dá)到平衡，有利于慢性炎癥的恢復(fù)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：婦科千金片可以顯著降低慢性盆腔炎模型大鼠血清中異常表達(dá)的IL-6、IL-1β、TNF-α含量，提高IL-10的表達(dá)，同時(shí)可以通過(guò)增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，改善促炎因子/抗炎因子動(dòng)態(tài)平衡紊亂，平衡免疫過(guò)程，發(fā)揮對(duì)盆腔炎的治療作用。

參考文獻(xiàn)

.劉國(guó)生，王桐生，龍子江，章俊如，陳明.盆腔炎沖劑對(duì)大鼠慢性盆腔炎模型的影響[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2004，10（3）：24～26.

.邱賽紅，尹胭脂，余娜，曾小燕，李復(fù)元，孫必強(qiáng)等.紫英顆粒對(duì)慢性盆腔炎大鼠模型治療作用的研究[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，（5）：49～51

.李鑫，郭建生，師振予，聶晶.婦科千金片對(duì)慢性盆腔炎大鼠血清炎性細(xì)胞因子表達(dá)的影響[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，（5）：228endprint