3種驅蟲藥物對內蒙古呼盟地區綿羊胃腸道線蟲驅殺效果研究

羅曉平 ， 敖登高娃 ， 詹樹柏 ， 李軍燕 ， 巴 金 ， 烏云塔娜 ，耿萬恒 ， 高海英 ， 張 偉

(1.內蒙古自治區農牧業科學院獸醫研究所 ， 內蒙古 呼和浩特 010031 ；2.內蒙古農業大學獸醫學院 農業部動物疾病臨床診療技術重點實驗室 ， 內蒙古 呼和浩特 010018 ；3.內蒙古自治區呼倫貝爾市新巴爾虎右旗動物疫控中心 , 內蒙古 呼倫貝爾 021300)

3種驅蟲藥物對內蒙古呼盟地區綿羊胃腸道線蟲驅殺效果研究

羅曉平1,2， 敖登高娃1,2， 詹樹柏1， 李軍燕1， 巴 金3， 烏云塔娜3，耿萬恒1， 高海英1， 張 偉2

(1.內蒙古自治區農牧業科學院獸醫研究所 ， 內蒙古 呼和浩特 010031 ；2.內蒙古農業大學獸醫學院 農業部動物疾病臨床診療技術重點實驗室 ， 內蒙古 呼和浩特 010018 ；3.內蒙古自治區呼倫貝爾市新巴爾虎右旗動物疫控中心 , 內蒙古 呼倫貝爾 021300)

為了解草原放牧綿羊胃腸道線蟲對目前常用驅蟲藥物的耐藥情況，本研究選取呼倫貝爾草原放牧地區綿羊，采用伊維菌素、丙硫咪唑、氯氰碘柳胺鈉分組給藥，運用糞便蟲卵減少試驗進行耐藥性田間檢測。結果顯示，伊維菌素組和丙硫咪唑組給藥后30 d內試驗所設時間點均無羊只糞便蟲卵轉陰，且平均EPG仍達800以上；氯氰碘柳胺鈉組則在60 h時蟲卵即開始全部轉陰，30 d時僅有少數羊只檢出蟲卵。本試驗結果進一步證實該地區綿羊胃腸道線蟲對伊維菌素和丙硫咪唑產生了較強的耐藥性，而對氯氰碘柳胺鈉則相對敏感，研究結果為有效地防控家畜寄生蟲病提供重要的基礎研究資料。

伊維菌素 ； 丙硫咪唑 ； 氯氰碘柳胺鈉 ； 胃腸道線蟲 ； 耐藥性

我國內蒙古地區是牛羊養殖大省，據“內蒙古統計年鑒(2015)”截止到2015年6月底的統計，全區羊的存欄數約為1億零7百萬只，其中綿羊為8 260萬只。我區兩大天然牧場呼倫貝爾和錫林郭勒，放牧綿羊數量龐大，寄生蟲病復雜多樣，其中線蟲病占一半以上。每年都會因此給農牧民造成巨大的經濟損失。特別是綿羊胃腸道線蟲病是養羊業中最常見和最主要的寄生蟲病，其感染率高，感染強度大，分布廣泛，其中尤以捻轉血矛線蟲(Haemonchuscontortus)和細頸線蟲(Nematodirus)為甚[1-2]。

長期以來，對這些線蟲病的防治幾乎主要依靠化學藥物，但長期反復使用，易使蟲體產生耐藥性，近些年不少國家有這方面的報道。2004年，Anziani 報道，阿根延中部的血矛線蟲對伊維茵素和苯丙咪唑類驅蟲藥產生了耐藥性。同年，Suter在澳大利亞西部235個羊場調查發現,連續5年使用阿維菌素類藥物驅蟲后,產生耐藥性,并造成了很大的經濟損失。根據我們近些年對農牧業基層的寄生蟲病防治情況的了解以及試驗調查，發現不少地方的羊寄生性線蟲已經對伊維菌素產生了耐藥性[3-4]，農牧民普遍反映伊維菌素驅蟲效果不佳。西藏、青海、甘肅等數個地區的牛羊驅蟲臨床藥物試驗中，都有類似的情況反映[5]。

鑒于內蒙古呼倫貝爾地區綿羊胃腸道線蟲對常見驅蟲藥物的耐藥情況尚未見報道，我們選取呼倫貝爾西旗一天然牧場，運用糞便蟲卵減少試驗對綿羊進行耐藥性田間檢測，為合理使用驅蟲藥物，有效防控家畜寄生蟲病，提供重要的參考資料，同時也填補了國內在寄生性線蟲耐藥性研究領域中的空白。

1 材料與方法

1.1 試驗藥品 伊維菌素，給藥劑量0.2 mg/kg體重,內蒙古北奇藥械有限責任公司；丙硫咪唑，給藥劑量13 mg/kg體重，長春市騰宇獸藥有限公司；氯氰碘柳胺鈉，給藥劑量5 mg/kg體重，成都中牧生物藥業有限公司。

1.2 方法 參照Coles 等[6]制定的世界獸醫寄生蟲學促進協會(WAAVP)關于蠕蟲抗藥性檢測方法中的糞便蟲卵減少試驗進行，并做了適當的改進。

1.2.1 試驗動物篩選 選擇試驗前5個月未使用任何驅蟲藥驅蟲的放牧綿羊，給藥前1周對100只預選試驗羊只逐只打耳標號、直腸采集新鮮糞便，帶回實驗室采用改良麥克馬斯特蟲卵計數法進行糞便蟲卵檢查-統計每克糞便蟲卵數(EPG)。

1.2.2 試驗分組及給藥劑量 依據EPG 檢查結果，將感染線蟲且EPGgt;300的羊分為4組，其中藥物組3組，即伊維菌素組、丙硫咪唑組、氯氰碘柳胺鈉組，對照組1組，每組羊只20只。分組時先將羊只按EPG排序，使用報數分組法分組。藥物組依據試驗藥物的不同劑型采用相應給藥途徑或方法，對照組動物不給藥。

1.2.3 糞便蟲卵減少試驗 各試驗組分別于給藥后0 h、12 h、24 h、36 h、48 h、60 h、72 h、30 d分別對試驗組羊群直腸采糞進行EPG計數。糞便蟲卵減少率按如下公式計算。

蟲卵減少率(%)={(驅蟲前蟲卵數-驅蟲后蟲卵數)/驅蟲前蟲卵數}×100

2 結果

2.1 伊維菌素注射后不同時間點糞便平均蟲卵計數結果 伊維菌素給藥后經直腸采集糞便檢測結果顯示，線蟲感染強度總體呈緩慢下降趨勢，給藥30 d后糞便平均蟲卵數由給藥前的1 958減少為894(見圖1)。

圖1 3種藥物給藥后0 h～72 h各時間點平均EPG

2.2 丙硫咪唑口服后不同時間點糞便平均蟲卵計數結果 丙硫咪唑給藥后經直腸采集糞便檢測結果顯示，線蟲感染強度總體呈下降趨勢，給藥30d后糞便平均蟲卵數由給藥前的1274減少為890(見圖1)。

2.3 氯氰碘柳胺鈉注射后不同時間點糞便平均蟲卵計數結果 氯氰碘柳胺鈉給藥后經直腸采集糞便檢測結果顯示，驅蟲30d后糞便平均EPG由1466下降為8，12h～24h糞便蟲卵數快速減少，驅蟲達到預期效果(見圖1)。

圖2 3種藥物給藥后30d糞便蟲卵減少率比較

2.4 不同藥物給藥后各時間點糞便平均蟲卵計數結果 三種藥物給藥后，伊維菌素組和丙硫咪唑組羊只平均EPG均呈緩慢下降趨勢。前者平均EPG由給藥前1 958，驅蟲30 d后減少為894，糞便平均減少率為54.35﹪；后者平均EPG由給藥前1 274，驅蟲30 d后減少為890，糞便蟲卵平均減少率為54.51%；氯氰碘柳胺鈉組在給藥后的12 h～24 h內平均EPG急劇下降，60 h時趨于0，驅蟲30 d后糞便蟲卵平均減少率為99.58﹪(見圖2)；對照組平均EPG呈鋸齒形上下波動(見圖1)。

3 討論與小結

隨著不同驅蟲藥物的使用，多重耐藥性流行的問題也在不斷產生。例如，Martin等(1989)用糞便蟲卵減少試驗和蟲卵孵化試驗，檢測了丹麥15個地區的羊線蟲對伊維菌素和丙硫咪唑的抗藥性，結果表明,蟲體對這兩種藥物都產生了很嚴重的抗藥性。Maciel等(1996)用蟲卵減少試驗和幼蟲發育試驗檢測了烏拉圭45個羊場，結果26.7%對伊維菌素產生耐藥性，17.6%對丙硫咪唑產生耐藥性，35.3%對兩者的合劑產生耐藥性。這就提示了羊胃腸道線蟲多重耐藥性流行的嚴重程度。多重耐藥性現已成為一個全球性現象，據認為至今已存在于包括所有現用和已用過的抗蠕蟲藥物上[7-8]。

本試驗結果顯示，使用伊維菌素與丙硫咪唑驅蟲后30 d，糞便蟲卵減少率分別54.35%和54.51%，與對照組糞便蟲卵減少率49.55%非常相近。這表明內蒙古呼倫貝爾地區綿羊胃腸道線蟲對伊維菌素和丙硫咪唑同時產生耐藥性，也同時證實了多重耐藥性現象的存在。

使用氯氰碘柳胺鈉驅蟲后，60 h糞便蟲卵即全部轉陰，30 d后直腸采糞檢測，僅含有極少的線蟲蟲卵，表明該地區綿羊胃腸道線蟲對氯氰碘柳胺鈉非常敏感。氯氰碘柳胺鈉是一種廣譜驅蟲藥，對多種吸蟲類、線蟲類和節肢動物的幼蟲類蟲體均有良好療效，其抗線蟲和抗節肢動物的幼蟲驅殺活性則主要針對各種吸食血液或血漿的蟲體。我們近幾年在對呼倫貝爾地區進行流行病學研究時發現，該地區胃腸道線蟲優勢蟲種為Haemonchuscontortus和Nematodirus，而這兩種蟲種均為吸血型蟲體，加上本地區近20年從未用過氯氰碘柳胺鈉，所以該藥在本試驗中較其他兩種藥物對線蟲的驅殺作用最好。

綜上所述，就相關資料以及我們自己的抗藥性試驗來看，近年來，內蒙古其他地區乃至國內家畜中寄生蟲耐藥性問題已非常嚴重，特別是伊維菌素類藥物更具有代表性。因此本研究不僅為寄生性線蟲病的有效防控，提供有價值的臨床指導，也為深入研究線蟲耐藥機制提供素材來源。

[1] 蔡葵蒸. 羊胃腸線蟲對常用驅蟲藥抗藥性的初步研究[D]. 呼和浩特: 內蒙古農業大學博士學位論文, 2007.

[2] 郝成，楊曉野，蔡葵蒸，等.幼蟲發育試驗對毛圓科線蟲抗藥性的檢測[J]. 中國獸醫寄生蟲病，2007，15(6)：13-17.

[3] 徐倩倩，郭時金，沈志強. 寄生蟲耐藥性檢測方法研究進展[J]. 家畜生態學報，2013，34(10)：82-86.

[4] 蔡葵蒸，楊曉野，楊春生，等.用丙硫苯咪唑檢測羊線蟲抗藥性的體外蟲卵孵化試驗[J].中國獸醫科學，2007，37(08)：721-725.

[5] 蔡葵蒸，楊曉野，王曉亮，等. 寧夏羊胃腸道線蟲對現行驅蟲藥的抗藥性調查[J].中國獸醫科學，2007，37(06):491-495.

[6] Coles G C, Bauer C, Borgsteede F H M,etal.World Association for the Advancement of Veterinary Parasitology (WAAVP) methods for the detection of anthelmintic resistance in nematodes of veterinary importance[J].Vet Parasitol, 1992, 44(1/2):35-44.

[7] Eng J K, Blackhall W J, Osei-Atweneboana M Y,etal. Ivermectin selection on beta-tubulin: evidence inOnchocercavolvulusandHaemonchuscontortus[J]. Mol Biochem Parasitol, 2006,150(2): 229-235.

[8] Lopes W D Z, Teixeira W F P, Felippelli G,etal. Assessing resistance of ivermectin and moxidectin against nematodes in cattle naturally infected using three different methodologies[J]. Research in Veterinary Science, 2014, 96: 133-138.

ThestudyofanthelminthiceffectongastrointestinalnematodesofsheepbythreecurrentanthelminticsinInnerMongolia

LUO Xiao-ping1,2， AO Deng-gaowa1,2， ZHAN Shu-bai1， LI Jun-yan1， BA Jin3， WU Yun-tana3， GENG Wan-heng1， GAO Hai-ying1， ZHANG Wei2

(1. Inner Mongolia Academy of Agricultural amp; Animal Husbandry Sciences, Hohhot 010031, China; 2. Key Laboratory of Clinical Diagnosis and Treatment Technology in Animal Disease,Ministry of Agriculture, College of Veterinary Medicine, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China; 3. Animal Epidemic Disease Control Center of New Barag Right Banner in Hulunbeier in Inner Mongolia, Hulunbeier 021300，China)

To understand the current situation of resistance of gastrointestinal nematodes in sheep to current anthelmintics(Ivermectin, Albendazole, Closantel Sodium), an investigation was carried out by faecal egg count reduction tests in HulunBuir, Inner Mongolia, China. The results showed that an average EPG of more than 800 was observed in ivermectin group and albendazole group after 30 days, but there were no trans-negative sheep. The trans-negative rate of eggs was 100 in closantel sodium group after 60 hours, and a few eggs were found until 30 days. It is showed that a serious resistance to ivermectin and albendazole was found in this regions, but sensitive to chlorine sodium.

Ivermectin ； Albendazole ； Closantel Sodium ； Gastrointestinal Nematodes ； Drug resistance

LI Jun-yan

S855.9+1

A

0529-6005(2017)10-0035-03

2016-12-16

公益性行業(農業)科研專項項目(No.201303037)；內蒙古自治區農牧業科學院創新基金項目(2016CXJJMa)

羅曉平(1987-)，男，博士生，主要從事家畜寄生蟲病防治工作，E-mail:luoxpnmg@163.com

李軍燕，E-mail:zhanshubai@126.com