利用酵母和芽孢桿菌培養海水輪蟲的技術初探

■ 甘松永 黃錦雄 張敏 林佩玲 石和榮 （廣東省海洋漁業試驗中心）

利用酵母和芽孢桿菌培養海水輪蟲的技術初探

■ 甘松永 黃錦雄 張敏 林佩玲 石和榮 （廣東省海洋漁業試驗中心）

褶皺臂尾輪蟲屬輪蟲門，單卵巢綱，單巢目，游泳臂尾輪蟲科，臂尾輪蟲屬。具有分布范圍廣，適應能力強，生長快，營養豐富，大小適中，適口性好的特點,是海水魚苗培育前期的理想餌料。隨著種苗培育密度不斷提高，作為優質活餌料的海水輪蟲的需求量也不斷增大，能否持續生產海水輪蟲，已成為種苗培育成敗的關鍵因素。

輪蟲的食性廣泛，單胞藻，細菌，酵母，甚至豆漿，發酵魚漿，有機碎屑，均可作為其培育的餌料。豆漿，發酵魚漿，有機碎屑一般用作土池培育輪蟲用，易受天氣，水質等因子影響，生產不穩定。室內工廠化培育輪蟲，常見用單胞藻方式進行培育，由于輪蟲食量大，受單胞藻培養場地的限制，在進行大規模輪蟲培育時很難做到足量供應。雖然采用特有的培育裝置，以濃縮小球藻為餌料，培育的輪蟲密度可達10,000個／mL以上，但這種輪蟲培育的成本過高，且濃縮小球藻不易獲得，不利于推廣。

在實際生產中，要進行大規模高密度的輪蟲培育，必然要有高濃度的餌料作為基礎。多種餌料混合培育比單一餌料培育出的輪蟲質量要好。利用輪蟲食性廣，濾食性的特點，本實驗方法選取食用酵母與芽孢桿菌作為輪蟲餌料進行高密度培養。

褶皺臂尾輪蟲的成蟲

1 材料與方法

1.1 材料

4個1 m3的長方形鋼化桶； 2臺醫用制氧機；食用面包酵母和芽孢桿菌（芽孢桿菌≥25億個細胞／g）；2臺定量泵；4個100 L塑料桶；收集網和顯微鏡，計數及水質分析用的工具。

1.2 方法

1.2.1 接種前的準備

培養容器（塑料桶）和所有工具用1 mg／L有效氯濃度消毒，用淡水沖洗干凈備用。

1.2.2 培養海水的處理

4個1 m3的長方形桶加入900L用1 mg／L消毒并曝氣好的過濾海水。

1.2.3 餌料的準備

預先用1 mg／L的二氯異氰脲酸鈉消毒并曝氣好的過濾海水，計算好用量，在1個100 L塑料桶里加一個空氣充氣的氣石,激活好芽孢桿菌。因面包酵母不耐鹽，所以要用淡水在1個100 L塑料桶里加一個空氣充氣的氣石來激活。芽孢桿菌激活后用150目篩絹網過濾，不要殘渣。激活后的酵母和芽孢桿菌分裝在另外2個100 L塑料桶，分別加一個氣石充氣保持均勻，使得酵母和芽孢桿菌不會因停放時間長而沉淀，以供定量泵自動投餌用。

1.3 接種

在1 m3長方形桶中接入沖洗干凈，不含有害生物的輪蟲，接種密度為800個/mL。

1.4 日常管理

1.4.1 充氣

醫用制氧機調節出氣量在4L／min，每部制氧機分接2個氣石，每個桶放一個氣石在中間位置，平均每個桶的充氧量在2L／min。每個桶再接入2個空氣充氣的氣石，保持微充氣，使輪蟲能均勻分布，不會在某一個地方密集。

1.4.2 培養條件控制

溫度25～32℃，鹽度15‰～25‰，溶解氧≦2 mg/L，非離子氨≦1 mg/L，pH 7～9。

1.5 投餌料

按100萬個輪蟲每天1 g酵母和1 g利生素的用量投餌。在剛接種給餌時，先人工加入1 d投餌量的10%，防止剛開始就出現餌料不足的情況，然后用定量泵少量多次自動給餌。在整個培養周期內，計算好投餌時的用水量，72h內不超過100 L，確保不會溢出培養桶。

1.6 觀察與檢查

在培養周期內，每天2次檢測輪蟲的生長情況和水質因子。計算輪蟲密度，做好餌料供給。

1.7 收集蟲體

采用一次性培養的方法。在收集輪蟲時，注意小心操作，尤其在水位較高時，注意水壓過大沖擊網袋，造成輪蟲死亡。收集完成后，沖洗好培養桶，加入消毒好的海水，接種輪蟲，進行下一周期的培養。

表1 輪蟲生長曲線

2 結果與討論

2.1 結果

運用市場上所售的面包酵母和芽孢桿菌當餌料，通過醫用制氧機制氧供給，加大水體含氧量，接種密度為800個／mL，經24h，36h，48h，72h培養，分別達到965個/mL，1,178個/mL，1,206個／mL，1,650個／mL（見表1）。

利用4個1 m3的長方形桶，采用一次性培養的方法，每天能收獲9億左右的輪蟲供給石斑魚育苗使用。

2.2 討論與小結

在利用濃縮小球藻培養輪蟲時，很多研究表明會產生大量泡沫，需要在培養水體中加入有吸附力的東西去除泡沫，防止泡沫溢出帶走輪蟲。利用濃縮小球藻培養輪蟲，大量產生泡沫這個問題很難得到有效的解決。本研究表明控制好充氣量，利用面包酵母和芽孢桿菌作餌料，不會像利用濃縮小球藻培育輪蟲那樣產生泡沫需加吸附的東西，輪蟲的排泄物和少量多余的殘餌，并不會漂浮在水體中，而是沉入桶底和吸附在桶壁，整個培養水體是干凈無雜質的。

激活后的酵母和芽孢桿菌，保存時間不能過長，每天分2次激活為好。

利用酵母和芽孢桿菌培育輪蟲和利用濃縮小球藻培育輪蟲比較，具有很多優越性。來源廣，生產酵母和芽孢桿菌的企業眾多，在市場上能方便買到，而生產濃縮小球藻的廠家屈指可數；保存方便，酵母和芽孢桿菌能在常溫下保存，濃縮小球藻需冷藏甚至冷凍條件下才能保存；保存時間長；成本低。

用酵母和芽孢桿菌作餌料培養的輪蟲 ，在不經強化的情況下，經過育苗生產實際的檢測，在魚苗生長前期過程中，并沒有出現營養不足現象。在后期，隨著魚苗生長，口徑增大，對輪蟲的需求減少，增加投喂枝角類，完全能正常生長。

本實驗在培養輪蟲時，關鍵的管理工作是防止感染原生動物,必須做到工具的徹底消毒和用水的安全，可以將危害降到最低。如果發現感染原生動物，有效而簡單的方法就是在收集好輪蟲后，在300目的網袋里用消毒處理好的海水反復小心沖洗，能將原生動物去除干凈。（參考文獻略）