ER、PR、C-erbB-2、nm 23在67例乳腺癌中的表達及與臨床病理的關系

李春成，謝月英，周旭麗，劉偉

（湘潭市婦幼保健院病理科，湖南 湘潭 411101）

ER、PR、C-erbB-2、nm 23在67例乳腺癌中的表達及與臨床病理的關系

李春成，謝月英，周旭麗，劉偉

（湘潭市婦幼保健院病理科，湖南 湘潭 411101）

目的 探討雌激素受體（estrogen receptor,ER）、孕激素受體（progesterone receptor,PR)、C-erbB-2、nm 23在乳腺癌中的表達情況及其與臨床病理的關系。方法 采用免疫組化染色法檢測ER、PR、C-erbB-2、nm 23在67例乳腺癌中的表達情況，然后進行統計學分析。結果 67例乳腺癌中，ER、PR、C-erbB-2、nm 23陽性率分別為61.2%（41/67），43.3%（33/67），61.2%（41/67），58.2%（39/67），各免疫指標陽性率表達均有顯著統計學意義（P＜0.01）；它們的表達與淋巴結轉移明顯相關（P＜0.01），與患者年齡、臨床分期無關（P＞0.05），C-erbB-2在乳腺癌中的表達與腫塊大小明顯相關（P＜0.05），ER、PR、nm 23在乳腺癌中的表達與腫塊大小無關（P＞0.05）；ER、PR與C-erbB-2、nm 23在乳腺癌中的表達具有明顯相關性（P＜0.001）。結論 聯合檢測ER、PR、C-erbB-2與nm 23指標對乳腺癌的治療和預后判斷具有重大臨床指導意義。

乳腺癌；ER；PR；C-erbB-2；nm 23

乳腺癌是女性中最常見的惡性腫瘤之一，發病率明顯上升，全球每年有120～140萬新增乳腺癌病例，每年有50萬左右的患者死于該病，嚴重威脅著女性生殖健康[1-2]。乳腺癌的發生是多階段多因素影響發展而來的，起始于普通導管上皮增生，逐漸進展為導管原位癌、浸潤癌，最后發展為轉移。鑒于乳腺癌臨床發展的不穩定性，確定乳腺癌的腫瘤標記物對臨床治療、臨床分期、診斷以及復發和轉移、預后的監測是非常重要的[3]。ER、PR、C-erbB-2、nm 23等標記物已經應用于臨床實踐中。復習相關文獻[4-5]，發現它們在乳腺癌中的表達有所差異。雖然，以上生物分子標記物已分別在相關研究有所報道，但本研究通過聯合檢測以上標記物，分析其在乳腺癌的表達意義。因此，本研究通過收集湘潭市婦幼保健院病理科67例乳腺癌病例，采用免疫組化法聯合檢測ER、PR、C-erbB-2、nm 23腫瘤標記物在乳腺癌中的表達情況，統計學分析它們與臨床病理特征的關系，目的在于探討ER、PR、C-erbB-2和nm 23在乳腺癌發生、發展及靶向治療與預后的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2015年9月～2017年3月在湘潭市婦幼保健院乳腺外科手術切除的乳腺癌病理資料67例，所有病例均為女性，年齡22～65歲，中位年齡42歲；所有病例均為I～Ⅲ期可手術切除的患者，均經病理診斷確診，且在術前均未接受過放、化療及內分泌治療。

1.2 檢測方法

1.2.1 試劑 ER、PR、C-erbB-2、nm 23受體相應的單克隆抗體購置北中杉金橋生物技術有限公司，DAB顯色液、免疫組化試劑盒購自福州邁新生物技術開發公司,乙醇PBS緩沖液,二甲苯等其他試劑購于麗欣生物有限公司。

1.2.2 S-P免疫染色法 石蠟標本連續4 μm切片，貼附于載玻片后烤片。常規脫蠟，高溫修復抗原。按照免疫組化試劑盒操作步驟逐步進行。以PBS代替一抗作為陰性對照，癌灶旁正常乳腺組織作為陽性內對照。

1.2.3 結果判讀 ER、PR陽性表達于胞核，呈棕黃色；nm 23表達于胞質。判斷標準采用陽性細胞比例評定結果，陽性細胞數＜10%為陰性（-），10%～25%為弱陽性（+），26%～50%為陽性（++），＞50%為強陽性（+++）。陽性細胞數≥10%為陽性病例。C-erbB-2陽性判定根據腫瘤細胞膜著色強度和比例來確定，腫瘤細胞無著色為0分；任何比例的腫瘤細胞顯示弱的不完整的細胞膜著色或＜10%的腫瘤細胞顯示弱的完整的細胞膜著色為1分；≥10%的腫瘤細胞顯示弱的或中度完整細胞膜著色，或＜30%的腫瘤細胞顯示一致的強的完整的細胞膜著色為2分；≥30%的腫瘤細胞顯示一致的強的完整的細胞膜著色為3分。

1.3 統計學方法 采用SPSS 17.0統計軟件進行結果分析，計數資料采用c2檢驗,P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 ER、PR、C-erbB-2、nm 23在乳腺癌中的表達情況 67例乳腺癌中，ER、PR、C-erbB-2、nm 23陽性表達情況明顯不同。ER總陽性率為61.2%（41/67），PR總陽性率為43.3%（33/67），C-erbB-2總陽性率為 61.2%（41/67），nm 23總陽性率為58.2%（39/67）。各免疫指標陽性率表達均有顯著統計學意義（P＜0.01），見圖1，表1。

圖1 癌組HEA、ERB、PRC、C-erbB-2D、nm 23E在乳腺癌中的陽性表達SPX20Figure 1 Positive expression of cancer group HEA,ERB,PRC,C-erbB-2D,nm 23E in breast cancer SP X20

表1 ER、PR、C-erbB-2、nm 23在乳腺癌中的表達情況Table 1 Expression of ER,PR,C-erbB-2,nm 23 in breast cancer

2.2 ER、PR、C-erbB-2、nm 23在乳腺癌中的表達與臨床病理特征的關系 在67例乳腺癌中的表達與淋巴結轉移明顯相關（P＜0.01），與患者年齡、臨床分期無關（P＞0.05），C-erbB-2在乳腺癌中的表達與腫塊大小明顯相關，ER、PR、nm 23在乳腺癌中的表達與腫塊大小無關（P＞0.05）。在淋巴結陽性轉移病例中，ER、PR陽性表達率偏低，分別為22.6%（12/53）、24.5%（13/53），C-erbB-2明顯呈高表達，C-erbB-2和 nm 23 陽性表達率分別為 54.7（29/53）、17%（9/53）（P＜0.01），見表2。

表2 ER、PR、C-erbB-2、nm 23在乳腺癌中的表達與臨床病理特征的關系Table 2 Expression of ER,PR,C-erbB-2,nm 23 in breast cancer and its relation with clinical pathology

2.3 ER、PR與C-erbB-2、nm 23相關性分析 ER、PR與C-erbB-2、nm 23在乳腺癌中的表達具有明顯相關性（P＜0.001），見表3。

表3 ER、PR與C-erbB-2、nm 23相關性分析Table 3 Correlation analysis of between ER,PR and C-erbB-2,nm 23

3 討論

乳腺癌是一組復雜和異質性的腫瘤，生物學行為相差大，其發生、發展與預后受多種因素影響[5]。Sotiriou和Pusztai指出基因表達模型研究結果改變了乳腺癌的觀點,為乳腺癌提供了一種分子診斷新工具。譬如，ER、PR、C-erbB-2、nm 23等已經作為監測乳腺癌高風險和選擇有效治療的一種有效腫瘤標記物[6]。在這研究背景下，在乳腺癌靶向治療和預后監測中，建立一種穩定、有效的腫瘤標記物是非常有臨床價值意義。

乳腺癌是一種激素依賴性腫瘤，其生長、發育和細胞增殖均受ER、PR激素受體的影響[7]。ER和PR陽性表達率目前被臨床作為激素治療的真標準，廣泛應用于乳腺癌的分子診斷、后續外科治療、化療和放療中[8]。PR表達被認為是ER功能和乳腺癌預后的一個生物標記，同時PR也是調節ER功能的相關蛋白[9]。單獨ER陽性對內分泌治療反應占55%，ER、PR同時陽性對內分泌治療反應占75%～80%。當乳腺組織細胞發生癌變時，ER、PR可能丟失也可能保留，若ER、PR丟失，腫瘤生長增殖不受內分泌調控，其內分泌治療的有效率也不足10%[10]。已有研究結果提示浸潤性乳腺癌階段PR的陽性率約在50%～70%，基本上與ER接近[11]，郭少峰等報道ER、PR陽性表達率分別為58.1%、49.5%[12]。本組研究數據顯示，ER、PR陽性表達率分別為61.2%，43.3%，兩者表達率比較接近。此外，本研究在分析ER與PR相關性中，統計結果顯示ER表達與PR表達呈正相關，以上事實都證實了ER、PR的表達具有協同性特點，而不是獨立的乳腺癌療效和預后因素，這也解釋了在乳腺癌內分泌治療中，臨床為何要同時參考ER和PR在腫瘤的表達情況。總之，ER與PR可以作為乳腺癌診斷和治療的一種腫瘤標記物，其陽性表達率越高，內分泌治療效果可能越好。

C-erbB-2是EGFR家族成員之一，又稱neu基因，位于染色體17q21。在15%～35%浸潤性乳腺癌中，發現C-erbB-2的高表達，它的異常表達明顯增加乳腺癌轉移的風險，降低乳腺癌患者的生存率[13]。被認為是預后不良的一個腫瘤標記物，它的過表達與腫瘤細胞的侵襲性、抗激素治療、細胞毒性療法以及總體低生存率明顯相關[14]。nm 23是由美國國立癌癥研究所steeg等分離出的一種被認為與腫瘤轉移抑制相關的基因。其蛋白表達水平與腫瘤的浸潤轉移能力有關，高表達者具有低轉移性[15]。絕大多數學者認為，nm 23的表達率與腋窩淋巴結轉移、腫瘤的復發呈負相關[16]。本研究中，分析C-erbB-2與nm 23兩者相關性，結果顯示兩者關系明顯呈負相關。同時，在淋巴結陽性轉移中，C-erbB-2表達明顯升高，nm 23的表達明顯降低。此外，C-erbB-2的高表達還與乳腺癌腫塊的增大呈正相關，以上結果均顯示C-erbB-2有促進腫瘤轉移的潛能，以及nm 23抑制乳腺癌的轉移的生物活性。因此，C-erbB-2和nm 23可以作為乳腺癌轉移和預后監測的一種有效腫瘤標記物。

有學者認為激素受體的表達情況決定了患者對內分泌治療的反應性，是治療方案選擇的一個決定因素[17]。但也有研究報道，ER表達陽性的乳腺癌中，仍有40%的患者對內分泌治療無效[18]。多數學者認為這可能與其它腫瘤基因表達相關,比如，C-erbB-2癌基因的過表達，nm 23抑癌基因的表達降低,從而導致腫瘤細胞的運動能力增強，促進腫瘤的侵襲和轉移[19-20]。本研究結果顯示，C-erbB-2、nm 23與ER、PR表達具有一致性。在淋巴結陽性轉移病例中，ER、PR陽性表達率偏低，分別為 22.6%（12/53）、24.5%（13/53），C-erbB-2明顯呈高表達，C-erbB-2和nm 23陽性表達率分別為54.7（29/53）、17%（9/53）。以上數據也說明了乳腺癌的發生發展及治療受多種因素影響。因此，聯合檢測ER、PR、C-erbB-2與nm 23指標對指導乳腺癌的治療以及轉移和預后的監測具有重大臨床意義。但本研究有待更深入探討以上標記物與其它預后指標進行比較分析，以及從蛋白、基因表達水平上探討其在乳腺癌和癌前病變中表達差異，更全面揭示乳腺癌的治療和預后相關因素，從而使乳腺癌患者受益最大化。

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Expression of ER,PR,C-erbB-2,nm 23 in 67 breast cancer and its relation with clinical pathology

Li Chun-cheng,Xie Yue-ying,Zhou Xu-li,Liu Wei
(Department of Pathology of Maternal and Child Health Hospital of XiangTan,XiangTan,Hunan,411101,China)

Objective To investigate expression information of ER,PR,C-erbB-2,nm 23 in breast cancer and its relation with clinical pathology.Methods Using immunohistochenmical assay,the expression information of ER,PR,C-erbB-2,nm 23 in breast cancer were detected.The correlation between expression information of ER,PR,C-erbB-2,nm 23 and clinicopathological characteristics were retro-spectively analyzed.Results In the 67 breast cancer,the positive rates of ER,PR,C-erbB-2,nm 23 were 61.2%(41/67),43.3%(33/67),61.2%(41/67),58.2%(39/67),which positive rates were striking statistical significance(P＜0.01).Their expression were correlated with lymph nodes metastasis(P＜0.01)and had nothing to do with age and clinical stage of patient(P＞0.05),Lump size was obviously correlated with expression of C-erbB-2(P＜0.05)and incorrelated with expression of ER,PR,nm 23 in breastcancer(P＞0.05).Expression between ER,PR and C-erbB-2,nm 23 were significantly correlated(P＜0.001).Conclusion Combined detection of ER,PR,C-erbB-2,nm 23 was importantly clinical guidance significance with treatment and prognosis of breast cancer.

Breast cancer;ER;PR;C-erbB-2;nm 23

10.3969/j.issn.1009-4393.2017.33.002

李春成，E-mail:493423161@qq.com