香薷傳統切制與產地加工炮制一體化比較研究

孫冬月+王曉婷+王馨雅+高慧

摘要：目的 通過香薷傳統切制與產地加工炮制一體化工藝的對比，為香薷產地加工炮制一體化技術實施提供可行性依據。方法 以軟化時間、切制段長、烘干溫度作為傳統切制工藝的考察因素，以切制段長、烘干溫度、烘干時間作為產地加工炮制一體化工藝的考察因素，采用L9（34）正交試驗，以香荊芥酚、麝香草酚、揮發油含量為綜合評價指標，分別優化傳統切制和產地加工炮制一體化工藝，并對2個優選出的工藝進行對比研究。采用Agilent 1200型高效液相色譜儀、ECOSIL-C18色譜柱測定香荊芥酚和麝香草酚含量，以乙腈-0.2%醋酸水溶液為流動相，梯度洗脫，波長274 nm，流速1.0 mL/min，進樣量20 ?L。按照2015年版《中華人民共和國藥典》揮發油測定法甲法測定揮發油含量。結果 優化的香薷傳統切制工藝為：3倍量水淋潤軟化1 h，切制1.0 cm，50～60 ℃烘干；優化的香薷產地加工炮制一體化工藝為：趁鮮切制1.0 cm，50～60 ℃干燥36 h。香薷產地加工炮制一體化最佳工藝條件下測得的香荊芥酚、麝香草酚、揮發油含量均高于傳統切制工藝。結論 產地加工炮制一體化技術簡單方便，能彌補傳統切制工藝繁瑣、有效成分易流失等不足，切實可行。

關鍵詞：香薷；產地加工炮制一體化；香荊芥酚；麝香草酚；揮發油

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2017.12.018

中圖分類號：R283.3 文獻標識碼：A 文章編號：1005-5304（2017）12-0072-05

Comparative Study on Traditional Cutting Processing and Integration Processing of Origin of Moslae Herba SUN Dong-yue， WANG Xiao-ting， WANG Xin-ya， GAO Hui （College of Pharmacy， Liaoning University of Traditional Chinese Medicine， Dalian 116600， China）

Abstract： Objective To provide the feasible basis for the implementation of integration processing technology of origin of Moslae Herba by comparing the traditional cutting processing and integration processing of origin of Moslae Herba. Methods Taking the softening time， the length of cutting section and the drying temperature as the investigation factors of the traditional cutting processing， and the cutting length， drying temperature and drying time as the investigation factors of the integration processing of origin， L9（34） orthogonal test was used. Carvacrol， thymol， volatile oil content were setting as the evaluation indexes， the traditional cutting processing and the integration processing of origin were optimized， and the two selected process were compared. The contents of carvacrol and thymol were deterrmined by Agilent 1200 high performance liquid chromatography and ECOSIL-C18 column. The mobile phase was acetonitrile-0.2% acetic acid， gradient elution， with wavelength of 274 nm， flow rate of 1.0 mL/min， sample volume of 20 μL. The extraction of the volatile oil was in accordance with the volatile oil determination method in Chinese Pharmacopoeia 2015 edition. Results The optimized traditional cutting processing： softening 1 h with 3 times amount of water， cutting to 1.0 cm， drying at 50–60 ℃. The optimized integration processing of origin： cutting to 1.0 cm in fresh， drying at 50–60 ℃， drying to 36 h. The contents of carvacrol， thymol， and volatile oil in the optimum integration processing of origin were all higher than the traditional cutting processing. Conclusion The technology of integration processing of origin is simple and convenient， which can make up the defects of the complicated traditional cutting processing and the lessen of effective components， and is feasible.endprint

Key words： Moslae Herba； integration processing of origin； carvacrol； thymol； volatile oil

中藥材產地加工和中藥炮制是中藥生產加工產業鏈中2個密切相連的環節，在某些中藥材生產中無法明確劃分，使有些中藥產地加工與炮制生產環節交叉重復，加工操作繁瑣，且易導致中藥飲片有效成分流失 [1]。本研究以香薷為研究對象，對全草類的產地加工炮制一體化技術應用進行探索。

香薷為唇形科植物石香薷Mosla chinensis Maxim.或江香薷Mosla chinensis‘Jiangxiangru的干燥地上部分，前者習稱“青香薷”，后者習稱“江香薷”。其味辛、性微溫，歸肺、胃經，具有發汗解表、化濕和中、利水消腫功效[2]。作為一種藥食兩用的傳統中藥，早在《本草綱目》就記載有“香薷乃夏月解表之藥，如冬月之麻黃”，具有良好藥用價值。香薷傳統切制法為：產地除根、凈制、陰干，至飲片廠后，加水淋潤軟化、切制、再陰干，工藝繁瑣，有效成分易流失，且加水量和軟化時間均較模糊，缺少量化可控的技術參數。為此，本課題將香薷產地加工與炮制生產相關工序進行有機整和，即產地凈制后趁鮮切制、干燥，為建立香薷產地加工與炮制一體化規范提供依據。

1 儀器與試藥

KQ-250DB型數控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；WGL-125B電熱鼓風干燥箱（天津市泰斯特儀器有限公司）；RO-2640P超純水器；Mettler AE240型十萬分之一分析天平（瑞士METTLER）；FA1004B電子天平（上海精密科學儀器有限公司）；Agilent 1200型高效液相色譜儀，包括四元梯度泵、在線脫氣機、柱溫箱、VWD檢測器、Chem-Station控制系統；ECOSIL-C18色譜柱（150 mm×4.6 mm，5 ?m）。

香薷藥材，2016年10月由本文第一作者采于江西吉安，經遼寧中醫藥大學翟延君教授鑒定為唇形科植物石香薷Mosla chinensis Maxim.的干燥地上部分，香薷傳統切制樣品與產地加工炮制一體化樣品均為自制。香荊芥酚（批號111691-201103）、麝香草酚（批號100508-200902），中國食品藥品檢定研究院。乙腈為色譜純，其余試劑為分析純，水為超純水。

2 方法與結果

2.1 香荊芥酚、麝香草酚含量測定

2.1.1 色譜條件及系統適用性試驗 ECOSIL-C18色譜柱（150 mm×4.6 mm，5 ?m）；流動相為乙腈-0.2%醋酸水溶液，梯度洗脫（見表1）；檢測波長：274 nm；流速：1.0 mL/min；進樣量：20 ?L。色譜圖見圖1。

2.1.2 對照品溶液的制備 分別精密稱定香荊芥酚和麝香草酚對照品適量，用甲醇溶解配成1 mg/mL的對照品貯備液，再配成香荊芥酚和麝香草酚分別為0.065 9 mg/mL和0.308 2 mg/mL的混合對照品溶液。

2.1.3 供試品溶液的制備 精密稱取各香薷飲片3.0 g置于250 ml錐形瓶中，加入200 mL甲醇，密塞，稱定質量，振搖5 min，浸漬過夜，超聲處理（功率100 W，溫度35 ℃）40 min，放至室溫，再次稱定質量，用甲醇補足減失的質量，搖勻，過濾，濃縮至20 mL，取適量，0.45 ?m微孔濾膜過濾，即得[3]。

2.1.4 方法學考察

2.1.4.1 線性范圍考察 分別精密吸取香荊芥酚（0.065 9 mg/mL）、麝香草酚（0.308 2 mg/mL）對照品溶液0.5、1、5、10、15、20、25 ?L，按上述色譜條件進行測定，以對照品進樣量（?g）為橫坐標，色譜峰面積積分值為縱坐標，繪制標準曲線，得香荊芥酚回歸方程Y=2491.7X+19.234，r=0.999 9，麝香草酚回歸方程Y=533.42X+19.234，r=0.999 9。結果表明香荊芥酚、麝香草酚分別在0.032 0～1.647 0 ?g、0.154 1～7.705 0 ?g范圍內呈良好的線性關系。

2.1.4.2 精密度試驗 精密吸取混合對照品溶液，按“2.1.1”項下色譜條件，連續進樣6次，測定峰面積，計算香荊芥酚和麝香草酚峰面積積分值的RSD分別為1.30%、1.03%，結果表明儀器精密度良好。

2.1.4.3 穩定性試驗 精密稱取香薷樣品，按“2.1.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.1.1”項下色譜條件，分別于0、3、6、12、18、24 h進樣，測定峰面積，計算香荊芥酚和麝香草酚峰面積的RSD分別為1.36%、1.48%，結果表明供試品溶液在24 h內基本穩定。

2.1.4.4 重復性試驗 取香薷同一批樣品各6份，按“2.1.3”項下方法分別制備供試品溶液，按“2.1.1”項下色譜條件進行測定并計算。傳統切制樣品中香荊芥酚和麝香草酚平均含量分別為0.205、0.347 mg/g，RSD分別為1.43%、1.52%；產地加工炮制一體化樣品中香荊芥酚和麝香草酚的平均含量分別為0.272、0.459 mg/g，RSD分別為1.29%、1.37%，表明本方法重復性良好。

2.1.4.5 加樣回收率試驗 精密稱取含量已知的樣品6份，每份0.3 g，分別精密加入0.1 mL香荊芥酚（0.2 mg/mL）和麝香草酚（0.3 mg/mL）對照品溶液，按“2.1.3”項下方法分別制備供試品溶液，測定含量，計算回收率，結果見表2。

2.1.5 樣品含量測定 取香薷飲片，按“2.1.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.1.1”項下色譜條件進樣，測定其峰面積，代入線性回歸方程，計算香荊芥酚和麝香草酚含量。

2.2 揮發油含量測定endprint

取香薷飲片60 g，精密稱量（準確至0.01 g），置圓底燒瓶中，加水600 mL，按2015年版《中華人民共和國藥典》揮發油測定法甲法提取揮發油，并計算各供試品中揮發油的含量。

2.3 傳統切制工藝優化

以軟化時間、切制段長、干燥溫度為考察因素，每因素設定3個水平，采用L9（34）正交試驗，優化香薷傳統切制工藝，因素水平見表3。按“2.1.3”項下方法制備傳統切制供試品溶液，以香荊芥酚、麝香草酚、揮發油含量為綜合評價指標，進行試驗，結果見表4，方差分析見表5。結果顯示，A、B、C因素對綜合評分的結果均有顯著影響。其中，C因素對綜合評分影響最大，由統計量K值確立為2水平。極差分析顯示，因素A和因素B相差不大，考慮因素C與其他二因素間的交互作用及實際情況，為了節省軟化時間，節約人力物力，確保飲片質量良好，將A因素定為1水平。綜合分析確定香薷傳統切制最佳工藝條件為A1B2C2，即淋潤軟化1 h，切制1.0 cm，50～60 ℃烘干。

2.4 產地加工炮制一體化工藝優化

以切制段長、干燥溫度、干燥時間為考察因素，每因素設定3個水平，采用L9（34）正交試驗，優化香薷產地加工炮制一體化工藝，因素水平見表6。按“2.1.3”項下方法制備產地加工炮制一體化供試品溶液，以香荊芥酚、麝香草酚、揮發油含量為綜合評價指標，進行試驗，結果見表7，方差分析見表8。結果顯示，因素A、B對綜合評分的結果有顯著影響，因素C對綜合評分的結果無顯著影響。極差分析顯示，各影響因素的主次順序是A（切制段長）>B（干燥溫度）>C（干燥時間）。對于因素A和B，考慮其與其他二因素間的交互作用及實際情況，均確定為2水平。由于因素C對結果無顯著影響，綜合分析確定香薷產地加工炮制一體化最佳工藝條件為A2B2C3，即趁鮮切制1.0 cm，50～60 ℃干燥36 h。

2.5 傳統切制工藝與產地加工炮制一體化工藝比較

凈選香薷藥材各3份，每份500 g，分別按“2.3”和“2.4”項下優化出的最佳工藝制備供試品溶液（傳統切制工藝為A1B2C2，即軟化1 h，切制1.0 cm，50～60 ℃烘干；最佳產地加工炮制一體化工藝為A2B2C3，即趁鮮切制1.0 cm，50～60 ℃干燥36 h）。按“2.1.1”項下色譜條件測定，結果見表9，表明香薷產地加工炮制一體化工藝中3個指標的含量均高于傳統切制工藝，且香荊芥酚含量有顯著差異（P<0.05）。說明香薷產地加工炮制一體化工藝穩定可行。

3 討論

由于香薷為全草類中藥，藥材植株蓬松，傳統切制工藝繁瑣，浪費資源，又易導致酸敗發霉等化學成分改變，不但降低生產效率，且增加了生產成本。產地加工炮制一體化能減少中間儲藏環節，避免由于貯藏造成的中藥材質量下降和損耗[4]。同時也能減少中間加工環節，省去廠房、設備等方面的投入，減少人力資源和能源的消耗，增加企業效益[5-6]。

由于傳統切制工藝缺少量化可行的標準，故本試驗對藥材加水量進行了考察，分別以1、3、5、7、10倍量水進行軟化，結果發現1倍量水藥材無法浸透，3倍量水可達到藥透湯盡，5倍量水藥透有部分余湯，7、10倍量有大量余湯，且伴有酸敗味，綜合考察，為節省水資源和充分軟化藥材，保證藥材質量，防止有效成分流失和化學成分改變，淋潤軟化的加水量確定為3倍量。在試驗過程中發現，由于香荊芥酚和麝香草酚是同分異構體，較難分離，故對流動相進行考察，篩選了乙腈與0.1%、0.2%磷酸水溶液的不同比例，結果發現，在乙腈-0.2%磷酸水溶液梯度洗脫、柱溫25 ℃、檢測波長274 nm、流速1 mL/min時，保留時間較短，色譜峰分離效果好且節省分析時間。在溫度指標的選擇中，通過前期預試驗發現，當溫度高于60 ℃時，指標性成分含量顯著降低，推測其與揮發性成分的熱穩定性有關，故本試驗在溫度選擇中以60 ℃為考察中點，分別考察20～30 ℃、50～60 ℃、80～90 ℃條件下傳統切制與產地加工炮制一體化工藝指標成分的等量性。

本試驗的最佳工藝組合是以香荊芥酚、麝香草酚和揮發油含量3個指標綜合加權評分，經過統計數據處理所得，結果香薷產地加工炮制一體化最佳工藝條件下香荊芥酚、麝香草酚和揮發油含量均高于傳統切制，且香荊芥酚含量有顯著差異（P<0.05）。因此，無論從統計結果還是實際情況考慮，香薷產地加工炮制一體化工藝都切實可行，具有推廣意義，這與近年來植物中藥應于產地加工炮制的倡導相符，為香薷產地加工炮制一體化規范的確立提供了依據。

參考文獻：

[1] 楊俊杰，李林，季德，等.中藥材產地加工與炮制一體化的歷史沿革與現代研究探討[J].中草藥，2016，47（15）：2751-2757.

[2] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[M].北京：中國醫藥科技出版社，2015：126.

[3] 李鵬，陳根順，徐麗芳，等.HPLC法測定香薷中4種成分的含量[J].中藥材，2009，32（8）：1236-1237.

[4] 楊俊杰，張振凌.藥用植物產區加工的目的和意義[J].時珍國醫國藥， 2005，16（4）：323-324.

[5] 楊俊杰，張振凌.中藥材產區加工與中藥飲片炮制一體化的探討[J].時珍國醫國藥，2005，16（9）：817-818.

[6] 康輝，張振凌.重視中藥材產地加工研究與管理[J].中國民族民間醫藥，2010，19（3）：24，26.

（收稿日期：2017-04-18）

（修回日期：2017-06-14；編輯：陳靜）endprint