宮頸組織中白介素-2、白介素-4在HPV感染不同類型宮頸病變中的表達(dá)

劉易斯 王敏 陶陶

宮頸組織中白介素-2、白介素-4在HPV感染不同類型宮頸病變中的表達(dá)

劉易斯 王敏 陶陶

目的探究與分析IL-2、IL-4在HPV感染不同程度宮頸病變中的表達(dá)及意義。方法選取我院自2015年3月—2017年3月收治的40例行宮頸活檢組織切片顯示為正常宮頸組織作為正常組，另選擇同時(shí)期收治的行宮頸活檢組織切片顯示的CINⅠ 12例，CINⅡ10例，CINⅢ 9例，宮頸浸潤性鱗癌組織30例。采用原位雜交法檢測上述樣本中IL-2、IL-4及HPV16/18的表達(dá)水平。結(jié)果IL-2在HPV16/18陽性表達(dá)的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達(dá)率相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。即IL-2的表達(dá)與宮頸病變程度呈負(fù)相關(guān)（r=-0.783，P＜0.05）。IL-2在HPV16/18陰性表達(dá)的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達(dá)率相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。IL-4在HPV16/18陽性表達(dá)的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達(dá)率相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。即IL-4的表達(dá)與宮頸病變程度呈正相關(guān)（r=0.668，P＜0.05）。IL-4在HPV16/18陰性表達(dá)的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達(dá)率相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論在HPV感染宮頸組織后可見局部IL-2表達(dá)水平降低，IL-4表達(dá)水平升高，提示發(fā)生HPV感染宮頸的原因可能與宮頸局部免疫細(xì)胞水平降低有關(guān)。

白細(xì)胞介素-2；白細(xì)胞介素-4；人乳頭瘤病毒；宮頸病變

近年來，隨著Th1/Th2漂移的研究逐漸成為熱點(diǎn)，有部分專家學(xué)者認(rèn)為絕大多數(shù)宮頸癌患者體內(nèi)均存在著Th1/Th2的漂移現(xiàn)象，且隨著宮頸病變程度的不斷加重，此種漂移現(xiàn)象就更加明顯[1]。據(jù)研究資料顯示，HPV感染的宮頸病變患者中同樣存在著Th1向Th2的漂移現(xiàn)象，但相關(guān)報(bào)道較少[2]。我院現(xiàn)針對三者的結(jié)合展開研究，對IL-2及IL-4的表達(dá)水平展開研究，由于二者分別為Th1及Th2型細(xì)胞因子的代表，判斷其與HPV感染宮頸病變的關(guān)系具有重要的臨床意義，現(xiàn)將結(jié)果總結(jié)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院自2015年3月—2017年3月收治的40例行宮頸活檢組織切片顯示為正常宮頸組織作為正常組；另選擇同時(shí)期收治行宮頸活檢組織切片顯示的CINⅠ 12例，CINⅡ10例，CINⅢ 9例，宮頸浸潤性鱗癌組織30例。全部患者均符合第7版《婦產(chǎn)科學(xué)》診斷標(biāo)準(zhǔn)，組織切片經(jīng)HE染色病理診斷確診，均因陰道出血、接觸性出血、白帶異常等主訴來院檢查，且未接受過手術(shù)或放化療等治療，并排除了妊娠期及哺乳期患者，排除合并嚴(yán)重心肺肝腎疾病患者，排除了2周內(nèi)接受過局部抗病毒藥物治療者；排除了長期使用免疫抑制劑/增強(qiáng)劑等藥物者[3-4]。正常組年齡為25～67歲，平均年齡為（45.6±2.48）歲；CIN組年齡為26～68歲，平均年齡為（45.1±2.34）歲；宮頸浸潤性鱗癌組年齡為24～65歲，平均年齡為（44.2±2.56）歲，三組患者的一般資料對比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。并簽署了關(guān)于本次試驗(yàn)的知情權(quán)同意書，符合我院醫(yī)學(xué)倫理會審核批準(zhǔn)。

1.2 檢測方法

采用原位雜交法檢測上述樣本中IL-2、IL-4及HPV16/18的表達(dá)水平，其中IL-2、IL-4按照原位雜交試劑盒上說明書對切片中IL-2 mRNA及IL-4 mRNA進(jìn)行檢測，HPV16/18按照原位雜交試劑盒上說明書完成，陽性對照為IL-2、IL-4、HPV16/18表達(dá)呈陽性的子宮頸組織切片，陰性對照為PBS液代替探針[5]。所用儀器及相關(guān)試劑盒均由北京博奧森生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)提供。于光鏡下對切片組織進(jìn)行觀察，IL-2 mRNA及IL-4 mRNA的陽性結(jié)果為：可見宮頸鱗狀上皮細(xì)胞的胞漿內(nèi)存在均勻一致分布的棕黃色顆粒，HPV16/18的陽性結(jié)果為可見宮頸鱗狀上皮細(xì)胞細(xì)胞核內(nèi)存在均勻一致分布的棕黃色顆粒[6]。觀察部位分別如下：宮頸正常組定位在鱗狀上皮，CIN組定位在CIN病灶，宮頸鱗癌定位在病灶。在同一個(gè)切片中觀察5個(gè)高倍鏡視野，若觀察到陽性信號細(xì)胞存在10個(gè)以上則為陽性，在10個(gè)以下即為陰性[7]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，計(jì)量資料以（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）表示，兩個(gè)樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，多于兩組樣本均數(shù)的比較，采用方差分析（ANOVA）；不滿足正態(tài)分布的計(jì)量資料或等級資料采用Spearmen相關(guān)性分析；計(jì)數(shù)資料以（n，%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 IL-2在感染及未感染HPV16/18宮頸組織中的表達(dá)對比

IL-2在HPV16/18陽性表達(dá)的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達(dá)率相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），即IL-2的表達(dá)與宮頸病變程度呈負(fù)相關(guān)（r=-0.783，P＜0.05）。IL-2在HPV16/18陰性表達(dá)的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達(dá)率相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 IL-2在感染及未感染HPV16/18宮頸組織中的表達(dá)對比 [例（%）]

2.2 IL-4在感染及未感染HPV16/18宮頸組織中的表達(dá)對比

IL-4在HPV16/18陽性表達(dá)的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達(dá)率相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），即IL-4的表達(dá)與宮頸病變程度呈正相關(guān)（r=0.668，P＜0.05）。IL-4在HPV16/18陰性表達(dá)的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達(dá)率相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 IL-4在感染及未感染HPV16/18宮頸組織中的表達(dá)對比 [例（%）]

3 討論

在人類的免疫系統(tǒng)中，多按照細(xì)胞因子的分泌不同將CD4+細(xì)胞分為Th1細(xì)胞及Th2細(xì)胞，前者多包括腫瘤細(xì)胞因子、IL-2、IL-12等，后者多包括IL-4、IL-5、IL-6等，在一般狀況下，Th1與Th2多處于動態(tài)平衡狀態(tài)，一旦發(fā)生失衡，則可誘發(fā)多種疾病。IL-2作為一種具有強(qiáng)效免疫調(diào)節(jié)作用的淋巴因子，可維持T淋巴細(xì)胞正常分化與增殖，促進(jìn)提高自然殺傷細(xì)胞的活性，并促進(jìn)誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞及細(xì)胞毒性T細(xì)胞的分化與增殖，從而發(fā)揮顯著的抗病毒及殺滅腫瘤細(xì)胞的作用。而IL-4作為一類對多種細(xì)胞生長及分化可起到廣泛作用的細(xì)胞因子，同時(shí)還可促進(jìn)腫瘤組織產(chǎn)生IL-10降低抗原提呈細(xì)胞的表達(dá)，保證并維持Ⅱ型淋巴細(xì)胞在腫瘤組織中的浸潤，從而形成新的Th2細(xì)胞，來維持動態(tài)平衡。但有研究報(bào)道指出，腫瘤細(xì)胞在分化與增殖期間可通過直接分泌Th1細(xì)胞，促進(jìn)發(fā)生Th1向Th2漂移的過程，當(dāng)Th2類細(xì)胞形成后可對Th1細(xì)胞的增生產(chǎn)生抑制作用，而形成惡性循環(huán)，這就進(jìn)一步證實(shí)了以IL-2、IL-4為代表的Th1、Th2細(xì)胞與腫瘤的發(fā)生發(fā)展具有一定的相關(guān)性[8]。

HPV為一類在臨床工作中較為常見的DNA病毒，可對人體皮膚及黏膜組織產(chǎn)生侵蝕作用，且?guī)缀跞繉m頸癌組織中均存在著HPV感染的情況，并以HPV16/18型的感染作為常見。有專家學(xué)者在以往的研究報(bào)道中指出，隨著宮頸病變程度的增加，Th1型細(xì)胞因子下降情況就越明顯。本次研究結(jié)果顯示，IL-2、IL-4在HPV16/18陽性表達(dá)的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達(dá)率相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。IL-2、IL-4在HPV16/18陰性表達(dá)的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達(dá)率相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)果提示，若宮頸病變患者未合并發(fā)生HPV感染，那么其宮頸病變程度并不受到IL-2及IL-4的影響，但若宮頸病變患者合并發(fā)生HPV感染，那么隨著疾病程度的加重，IL-2及IL-4的表達(dá)也隨之出現(xiàn)變化，即IL-2的表達(dá)與宮頸病變程度呈負(fù)相關(guān)，而IL-4的表達(dá)與宮頸病變程度呈正相關(guān)。分析出現(xiàn)此結(jié)果的原因是當(dāng)IL-2水平降低時(shí)，可對T淋巴細(xì)胞的增殖與分化過程造成影響，對其調(diào)節(jié)做用產(chǎn)生阻礙，此時(shí)機(jī)體免疫細(xì)胞功能出現(xiàn)障礙，而當(dāng)IL-2的分泌量增加時(shí)，進(jìn)一步對IL-2的分泌產(chǎn)生抑制作用，增加了機(jī)體對HPV病毒的易感性，使得局部宮頸組織持續(xù)受到HPV的感染，表現(xiàn)出疾病的病程較長且難治愈。

綜上所述，在HPV感染宮頸組織后可見局部IL-2表達(dá)水平降低，IL-4表達(dá)水平升高，提示發(fā)生HPV感染宮頸的原因可能與宮頸局部免疫細(xì)胞水平降低有關(guān)，臨床醫(yī)師可針對此結(jié)果給予局部應(yīng)用細(xì)胞因子治療，從而提高HPV感染的治愈率，阻礙宮頸癌的進(jìn)一步發(fā)展，改善患者的生存質(zhì)量。

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Expression and Significance of IL-2, IL-4 in Different Types of Cervical Lesions With HPV Infection

LIU Yisi WANG Min TAO Tao Department of Obstetrics and Gynecology,Shengjing Hospital Affiliated to China Medical University, Shenyang Liaoning 110004, China

ObjectiveTo explore and analyze the expression and significance of IL-2, IL-4 in different types of cervical lesions with HPV infection.Methods40 routine cervical biopsys from March 2015 to March 2017 were displayed by our hospital diagnosed normal tissue as the normal group. At the same time, 12 cases of chronic cervicitis were displayed by our hospital diagnosed the CINⅠ, 10 cases were diagnosed CINⅡ, 9 cases were diagnosed CINⅢ, 30 cases of cervical invasion of squamous carcinoma were diagnosed. the level of the IL-2, IL-4 and the expression of HPV16/18 were detected by in situ hybridization method.ResultsThe positive expression rate of IL-2 in HPV16/18 positive expression group,CIN group and squamous cell carcinoma group were compared, the difference was statistically significant (P<0.05). There was a negative correlation between the expression of IL-2 and the degree of cervical lesions(r=-0.783,P<0.05). There was no significant difference in the positive expression rate of IL-2 between HPV16/18 negative expression group,CIN group and squamous cell carcinoma group (P>0.05). The positive expression rate of IL-4 in HPV16/18 positive expression group, CIN group and squamous cell carcinoma group were compared, the difference was statistically significant (P<0.05). There was a positive correlation between the expression of IL-4 and the degree of cervical lesions (r=0.668,P<0.05).There was no significant difference in the positive expression rate of IL-4 between HPV16/18 negative expression group, CIN group and squamous cell carcinoma group (P>0.05).ConclusionIn the cervical organization with HPV infection, the level of IL-2 expression has decreased, However the level of IL-4 has risen, which may reveal that cervical HPV infection in the tip may be associated with the drop of cervical local immune cell levels.

interleukin-2; interleukin-4; human papilloma virus; cervical lesions

R737

A

1674-9308（2017）27-0056-03

10.3969/j.issn.1674-9308.2017.27.030

中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院婦產(chǎn)科，遼寧 沈陽 110004

王敏