復(fù)合酶制劑對蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、腸道健康微生物及養(yǎng)分利用率的影響*

周雪梅 ，楊在賓 **，姜淑貞 ，劉寧 ，黃曉輝 ，張麗麗

（1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，山東 泰安 271018；2.山東和美華集團(tuán)，山東 濟(jì)南 250000）

復(fù)合酶制劑對蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、腸道健康微生物及養(yǎng)分利用率的影響*

周雪梅1，楊在賓1**，姜淑貞1，劉寧1，黃曉輝2，張麗麗2

（1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，山東 泰安 271018；2.山東和美華集團(tuán)，山東 濟(jì)南 250000）

本試驗(yàn)旨在研究不同復(fù)合酶制劑對蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、腸道健康等的影響。本實(shí)驗(yàn)采用單因素試驗(yàn)設(shè)計，選取648只60周齡海蘭褐蛋雞，隨機(jī)分成4個處理，每個處理6個重復(fù)，每個重復(fù)27只雞。試驗(yàn)雞分別飼喂：基礎(chǔ)日糧，在基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)上添加3種不同復(fù)合酶2 mg/kg。預(yù)試期2周，收集基礎(chǔ)數(shù)據(jù)正試期為6周。以重復(fù)為單位測定生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、雞蛋成分和腸道微生物。同時，選用體重基本一致（1.85±0.43kg)，60周齡產(chǎn)蛋雞60只，隨機(jī)分成5個處理，每個處理6個重復(fù)，每重復(fù)2只。試驗(yàn)日糧處理1～4同生產(chǎn)試驗(yàn)，處理5測定內(nèi)源物質(zhì)，全收糞尿法測定日糧的養(yǎng)分利用率。研究結(jié)果表明：日糧添加復(fù)合酶制劑沒有改進(jìn)60周齡產(chǎn)蛋雞的進(jìn)食量、產(chǎn)蛋量、料蛋比、產(chǎn)蛋率、蛋重和破蛋率（P＞0.05）；不影響蛋形指數(shù)、蛋白高度、哈氏單位、蛋黃顏色、蛋黃比重、蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度、蛋殼比重（P＞0.05）；不影響雞蛋成分和日糧養(yǎng)分利用率（P＞0.05）。沒有改變盲腸乳酸菌數(shù)量（P＞0.05），降低了盲腸大腸桿菌數(shù)量（P＜0.01），與對照組相比，使用復(fù)合酶制劑可以使蛋雞盲腸大腸桿菌數(shù)量降低了10.70%。產(chǎn)蛋后期日糧添加復(fù)合酶制劑不能改善蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、雞蛋成分和日糧養(yǎng)分代謝率，可以改善腸道健康。

復(fù)合酶制劑；產(chǎn)蛋雞；生產(chǎn)性能；蛋品質(zhì)；腸道微生物；雞蛋營養(yǎng)成分；養(yǎng)分利用率

復(fù)合酶制劑是指由催化水解不同底物的多種酶混合而成的酶制劑[1]，是由多種酶按一定比例配合而成的一類生物制品，具有特殊的功能。消化酶分為蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、肽酶、麥芽糖酶、乳糖酶、蔗糖酶等，可以補(bǔ)充內(nèi)源酶的不足，并且激活內(nèi)源酶的分泌，提高家禽飼料養(yǎng)分的消化吸收[2]。非消化酶主要包括NSP酶和植酸酶，其中NSP酶包括半纖維素酶、纖維素酶和果膠酶，半纖維素酶又包括阿拉伯木聚糖酶、B-葡聚糖酶、甘露聚糖酶等[1]。在蛋雞日糧中添加一定比例的酶制劑能使可溶性非淀粉多糖（NSP）如纖維素、半纖維素、果膠等分解成可利用的多糖類[2]，并能有效破壞細(xì)胞壁中非水溶性屏障性抗?fàn)I養(yǎng)因子，進(jìn)而有利于細(xì)胞內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的釋放，同時有效緩解水溶性NSP導(dǎo)致的食糜粘度過大，從而提高飼料利用率，降低糞便粘度，腸道內(nèi)有害微生物的繁殖及降低排泄物中有機(jī)物的含量，具有一定的經(jīng)濟(jì)效益和環(huán)保效益[3-5]。張偉（2016）[6]報道在高產(chǎn)蛋雞日糧中添加酶制劑可以提高產(chǎn)蛋雞的生產(chǎn)性能。Bedford等[7]指出在肉雞小麥日糧中添加木聚糖酶可以改善肉仔雞的增重和飼料轉(zhuǎn)化率，降低小腸食糜粘性。研究表明，復(fù)合酶制劑不僅可以促進(jìn)有益菌的增殖，還可以減少有害菌的增殖，從而提高肉雞的健康水平[8,9]。但不同復(fù)合酶制劑對蛋雞的相關(guān)研究不多。本試驗(yàn)旨在研究不同復(fù)合酶制劑對蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、養(yǎng)分利用率、腸道健康及雞蛋營養(yǎng)成分的影響，從而證明復(fù)合酶制劑在蛋雞上的應(yīng)用功效，指導(dǎo)蛋雞生產(chǎn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 復(fù)合酶：E1：以蛋白酶為主，輔之以淀粉酶、木聚糖酶、纖維素酶；E2：以淀粉酶為主，輔之以蛋白酶、木聚糖酶、纖維素酶；E3：以木聚糖酶、纖維素酶為主，輔之以淀粉酶、蛋白酶。

1.2 生產(chǎn)試驗(yàn) 本試驗(yàn)采用單因素試驗(yàn)設(shè)計，選取648只60周齡的健康海蘭褐蛋雞，隨機(jī)分成4個處理組，每個處理組6個重復(fù)，每個重復(fù)27只雞。預(yù)試期2周，收集基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，正試期為6周，飼喂四個處理組。日糧：對照組，飼喂基礎(chǔ)日糧；3個試驗(yàn)組分別為基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)上添加3種不同復(fù)合酶，添加量為2mg/kg。試驗(yàn)雞采用舍內(nèi)籠養(yǎng)，自由采食和飲水。光照16h/d，地面光照強(qiáng)度為15Lx，溫度21～27℃，按正常程序防疫和雞舍消毒。試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧營養(yǎng)水平參照NRC（1994）蛋雞標(biāo)準(zhǔn)配制。

生產(chǎn)性能測定：正式試驗(yàn)期間，以重復(fù)為單位，每天記錄采食量、蛋數(shù)、蛋重、破損蛋數(shù)。計算試驗(yàn)蛋雞在每周的平均蛋重、平均產(chǎn)蛋率、破蛋率和料蛋比。

蛋品質(zhì)指標(biāo)測定：正式試驗(yàn)的第0天、第42天，每個重復(fù)取20枚雞蛋，其中10枚用于測定雞蛋的蛋殼厚度、蛋黃色澤、蛋形指數(shù)、總蛋重、蛋黃重等，其余10枚用于測定雞蛋全蛋中的粗蛋白、粗脂肪和干物質(zhì)含量。

蛋殼厚度：用螺旋測微儀測量蛋的鈍端、中端和銳端三處的蛋殼厚度，取其平均值作為蛋殼厚度。

蛋黃顏色：用羅氏比色扇測定。

蛋形指數(shù)：用游標(biāo)卡尺分別測量雞蛋的縱徑和橫徑，計算縱徑/橫徑的比值。

蛋黃含量（%）＝蛋黃重/總蛋重×100%。

蛋白含量（%）＝蛋白重/總蛋重×100%。

粗蛋白：半微量凱氏定氮法。

粗脂肪：索氏抽提法。

干物質(zhì)：直接干燥法。

盲腸內(nèi)容物菌群的測定：飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束（42d），每個處理屠宰6只，取樣測定盲腸微生物。盲腸內(nèi)容物菌群的測定計算公式：每克腸道內(nèi)容物菌落數(shù)＝㏒10菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)×每次稀釋取樣毫升數(shù)/接種用樣品毫升數(shù)/樣品克數(shù)。

2 代謝試驗(yàn)

選用體重基本一致 （1.85±0.43kg)、60周齡產(chǎn)蛋雞60只，隨機(jī)分成5個處理，每個處理6個重復(fù)，每重復(fù)2只。試驗(yàn)日糧處理1～4（同生產(chǎn)試驗(yàn)）；處理5：內(nèi)源空白對照，用于計算養(yǎng)分真實(shí)代謝率。單籠飼養(yǎng)，自由飲水，半自由采食。

試驗(yàn)采用不銹鋼收糞板全收糞、尿。試驗(yàn)分預(yù)試期和正試期，預(yù)試期7d，試驗(yàn)雞只飼喂試驗(yàn)日糧（內(nèi)源組飼喂基礎(chǔ)日糧），使雞只適應(yīng)試驗(yàn)籠和日糧；正試期3d，準(zhǔn)確記錄進(jìn)食量、排糞尿量（每個重復(fù)2只雞的排泄物混合），收集72h的排泄物（內(nèi)源組空腹1d，收集48h的排泄物）。

采取飼料樣品計算干物質(zhì)（DM）采食量并進(jìn)行化學(xué)分析。收集每個重復(fù)2只雞72h（內(nèi)源組48h）的排泄物并混勻稱重，-20℃冷凍保存，用于化學(xué)分析。每個飼料和排泄物樣品取兩個平行，進(jìn)行干物質(zhì)（DM）、有機(jī)物質(zhì)（OM）、粗蛋白質(zhì)（CP）、粗灰分(CA)和總能（GE）的測定。測定方法采用國際標(biāo)準(zhǔn)方法(AOAC)。所有樣品分析在山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究室進(jìn)行。

3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)采用SAS9.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。采用Duncan法多重比較，P＜0.05者為差異顯著。

DM、OM、CP和 GE 的表觀消化率（AD）和真實(shí)消化率（TD）用下式計算：

AD（%）＝[(A1-A2)/A1]×100。

TD（%）＝[(A1-A2+A3)/A1]×100。

式中：

A1＝營養(yǎng)成分（DM、OM、CP，mg）和總能（kcal）進(jìn)食量；

A2＝相應(yīng)營養(yǎng)成分（DM、OM、CP，mg）和總能（kcal）排泄物中排出量；

A3＝相應(yīng)營養(yǎng)成分（DM、OM、CP，mg）和總能（kcal）內(nèi)源排泄物中排出量。

表觀代謝能（AME）和真實(shí)代謝能（TME）（干物質(zhì)基礎(chǔ)）用下式計算：

AME(kcal/kg)＝(A4-A5)/A7。

TME(kcal/kg)＝(A4-A5+A6)/A7。

式中:

A4＝每只雞食入的總能(kcal)；

A5＝每只雞排泄物中的總能(kcal)；

A6＝每只雞內(nèi)源排泄物中的總能(kcal)；

A7＝每只雞干物質(zhì)的進(jìn)食量（kg）。

4 結(jié)果與分析

4.1 生產(chǎn)性能比較分析 試驗(yàn)全期，所有處理試驗(yàn)雞無死亡。不同復(fù)合酶制劑日糧對生產(chǎn)性能的影響見表1。分析結(jié)果表明：從統(tǒng)計上，進(jìn)食量、產(chǎn)蛋量、料蛋比、產(chǎn)蛋率、蛋重和破蛋率均沒有顯著差異（P＞0.05）。但是從數(shù)值上，產(chǎn)蛋量和蛋重有所增加，料蛋比、進(jìn)食量和破蛋率有所降低，因此，添加復(fù)合酶總體上應(yīng)該有改善蛋雞產(chǎn)蛋性能，提高飼料效率的趨勢。

表1 復(fù)合酶制劑對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

4.2 蛋品質(zhì)比較分析 不同復(fù)合酶日糧對蛋雞蛋品質(zhì)的影響見表2。分析結(jié)果表明：蛋形指數(shù)、蛋白高度、哈氏單位、蛋黃顏色、蛋黃比重、蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度、蛋殼比重的在統(tǒng)計上都未見顯著變化（P＞0.05），從數(shù)值上分析，各項(xiàng)指標(biāo)都有所改善，特別是蛋白高度、哈氏單位、蛋黃顏色和蛋黃比重改善幅度較大。

表2 復(fù)合酶制劑對蛋雞蛋品質(zhì)的影響

4.3 蛋雞盲腸微生物比較分析 日糧添加不同復(fù)合酶對蛋雞腸道微生物的影響見表3。分析結(jié)果表明：與對照組相比，日糧添加復(fù)合酶降低了蛋雞盲腸大腸桿菌數(shù)量（P＜0.01），尤其是復(fù)合酶制劑2和復(fù)合酶制劑3，乳酸菌處理間無差異 （P＞0.05）。從數(shù)值上分析（圖1），與對照組相比，添加復(fù)合酶可以使蛋雞盲腸大腸桿菌數(shù)量降低10.70%，乳酸菌數(shù)量提高8.93%。因此，添加復(fù)合酶可以提高腸道有益菌群數(shù)量，減少有害菌群數(shù)量，可以改善蛋雞腸道健康。

表3 復(fù)合酶制劑對蛋雞盲腸微生物的影響

圖1 復(fù)合酶制劑對蛋雞盲腸微生物的影響

4.4 雞蛋營養(yǎng)成分比較分析 日糧添加不同復(fù)合酶制劑對雞蛋營養(yǎng)物質(zhì)沉積的影響見表4。分析結(jié)果表明：各種成分在統(tǒng)計分析上都不顯著（P＞0.05），從數(shù)值上看各項(xiàng)指標(biāo)都有所改善，與對照組相比，添加飼料復(fù)合酶制劑使雞蛋粗脂肪提高了7.0%。

表4 復(fù)合酶制劑對雞蛋成分的影響

4.5 蛋雞養(yǎng)分利用率比較分析 日糧添加復(fù)合酶后，蛋雞日糧中各種營養(yǎng)物質(zhì)代謝率測定結(jié)果見表5、表6。分析結(jié)果表明：無論是表觀代謝率，還是真實(shí)代謝率，各種養(yǎng)分（DM、OM、CP、EE、GE）利用率均未出現(xiàn)差異顯著（P＞0.05），從在數(shù)值上，與對照組相比，日糧DM、OM、CP、EE和GE的表觀代謝率分別提高了1.59%、0.96%、2.14%、0.54%和1.09%；真實(shí)代謝率分別提高了1.55%、0.97%、2.09%、0.55%和 1.08%。

表5 復(fù)合酶制劑對蛋雞表觀代謝率的影響

表6 復(fù)合酶制劑對蛋雞真實(shí)代謝率的影響

5 討論

5.1 復(fù)合酶制劑對蛋雞生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)的影響 飼料酶制劑主要是降解類的酶制劑，把抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)（非淀粉多糖和植酸鹽）或營養(yǎng)物質(zhì)（蛋白質(zhì)和淀粉）降解為無抗?fàn)I養(yǎng)特性的成分或容易吸收的營養(yǎng)成分[10]。蛋白酶和淀粉酶主要是補(bǔ)充體內(nèi)消化酶，將大分子化合物水解為小分子化合物或其基本組成單位，直接為體內(nèi)提供可吸收的營養(yǎng)[10]。木聚糖酶和纖維素酶以降解單一組分抗?fàn)I養(yǎng)因子或毒物為目的。纖維素酶的作用機(jī)制可以促進(jìn)動物消化吸收[1]。飼料中加酶后消化道中酶種類增加，濃度提高，必然會增大酶促反應(yīng)速度，促進(jìn)飼料消化[11]。

目前，有關(guān)酶制劑對于家禽影響的研究，大部分結(jié)論表明其能提高家禽的生產(chǎn)性能。張偉[6]研究表明復(fù)合酶的添加可以提高平均每只蛋雞的產(chǎn)蛋性能，增加蛋重。孫旺斌[12]報道在蛋雞玉米-豆粕基礎(chǔ)日糧中添加0.4%的酶制劑可顯著提高產(chǎn)蛋率、降低料蛋比。Bustany[13]等研究表明，在肉雞日糧中添加酶提高了雞的活體重、采食量和飼料轉(zhuǎn)化率。本試驗(yàn)結(jié)果與上述文獻(xiàn)報道的一致，以蛋白酶為主的酶制劑降低了采食量、料重比和破蛋率，改善了蛋雞的生產(chǎn)性能，提高了養(yǎng)分利用率。

常用植物性飼料原料中NSP的含量較高，而飼料酶制劑中的木聚糖酶和纖維素酶作用細(xì)胞壁，使原來被細(xì)胞壁包裹的蛋白質(zhì)、鈣、磷等釋放出來，更易被蛋雞吸收，最終表現(xiàn)為蛋重增加，破蛋率降低[4]。微生物源性的蛋白酶在適宜的溫度和pH條件下，能夠不同程度地水解大豆中的蛋白酶抑制因子和凝集素，使其失活，從而使日糧中植物性蛋白的消化率明顯提高，從而提高了蛋雞的生產(chǎn)性能[4,12]。家禽有為能而食的特點(diǎn)，采食量的降低可能是由于添加酶制劑后提高了日糧代謝能的緣故[13]。

王景成等[14]研究結(jié)果表明木聚糖酶和植酸酶的添加對蛋黃重與蛋黃色澤均差異顯著。閆秋良[4]研究表明蛋雞日糧中添加復(fù)合酶制劑對雞蛋品質(zhì)無顯著影響，與白素君[15]、牛淑玲[16]的報道結(jié)果一致。據(jù)牛淑玲[17]報道，在蛋雞日糧中添加復(fù)合酶制劑或者單一酶，對提高蛋殼厚度、改善蛋殼品質(zhì)均有一定的促進(jìn)作用。本試驗(yàn)結(jié)果與上述文獻(xiàn)報道的一致，各項(xiàng)指標(biāo)都有所改善，特別是蛋白高度、哈氏單位、蛋黃顏色和蛋黃比重改善幅度較大。蛋殼的質(zhì)量主要由蛋殼的鈣沉積量決定，酶制劑使細(xì)胞內(nèi)容物中的鈣釋放出來，同時降低了雞消化道的粘性，增加了營養(yǎng)物質(zhì)的擴(kuò)散，促進(jìn)了食物在消化道的流動，有利于鈣的吸收和沉積作用，使蛋殼強(qiáng)度提高[4]。酶制劑提高了日糧色素的沉積和能量的消化而使蛋黃顏色較好；蛋白高度是雞蛋的新鮮程度的表現(xiàn)，其受日糧蛋白等營養(yǎng)成分的組成極其含量的影響，加酶有效降低抗?fàn)I養(yǎng)因子的作用，促進(jìn)營養(yǎng)成分的消化吸收，因此加酶組有提高蛋白高度的趨勢。雞蛋脂肪中磷脂質(zhì)含量較高，而磷脂主要集中在蛋黃中。磷脂質(zhì)的主要成分為卵磷脂和腦磷脂，卵磷脂為人體許多組織細(xì)胞不可缺少的組分，具有降低膽固醇、降低血鈣、軟化血管、防治脂肪肝，調(diào)節(jié)代謝、健腦補(bǔ)腦、增強(qiáng)體能、提高記憶力等功效[17,18]。酶制劑的添加使飼料中營養(yǎng)成分得到更好的釋放與吸收，蛋雞吸收更多營養(yǎng)的同時將營養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)送到雞蛋上，使得雞蛋的營養(yǎng)物質(zhì)積累的增多[19]。本試驗(yàn)中，飼料酶制劑的添加使雞蛋的水分減少，粗蛋白和粗脂肪得到了提高。這可能是由于復(fù)合酶可利用各種酶的協(xié)同作用，降解飼料中各種底物，最大限度地提高飼料中蛋白質(zhì)、淀粉和能量等營養(yǎng)物質(zhì)的利用率[2]。

5.2 復(fù)合酶制劑對蛋雞養(yǎng)分利用率、盲腸微生物的影響 日糧在單胃動物腸道前段不被消化，進(jìn)入小腸后段，為后段厭氧有害微生物增殖、發(fā)酵提供碳源。細(xì)菌數(shù)量的增多使宿主和細(xì)菌之間的營養(yǎng)競爭加劇，并使動物腹瀉率增加，從而影響動物生長和健康。腸內(nèi)細(xì)菌數(shù)量增多刺激了腸道,增加腸道粘膜層厚度，損害微絨毛，進(jìn)而減少養(yǎng)分吸收[20-21]。

Brenes等[22]報道在中等營養(yǎng)水平的小麥基礎(chǔ)日糧中添加以木聚糖為主的酶制劑，可以降低微生物的數(shù)量60%。非淀粉多糖酶通過調(diào)控動物胃腸道的微生態(tài)環(huán)境，抑制有害菌對腸壁的粘附，促進(jìn)有益菌的生長繁殖，維持正常的消化道環(huán)境[5]。本試驗(yàn)結(jié)果與上述文獻(xiàn)報道的一致，以木聚糖酶和纖維素酶為主的酶制劑顯著降低了盲腸大腸桿菌的數(shù)量，乳酸菌的數(shù)量有提高的趨勢。有研究表明，NSP酶的加入可降解回腸SNSP，從而阻斷SNSP進(jìn)入小腸后段，減少可供微生物增殖發(fā)酵的營養(yǎng)物質(zhì)，從而減少微生物的數(shù)量，提高回腸養(yǎng)分吸收利用率；另外，一部分NSP被降解成寡糖直接進(jìn)入盲腸，盲腸中寄生的細(xì)菌將寡糖發(fā)酵成單糖被動物機(jī)體消化吸收[23]。

6 結(jié)論

在產(chǎn)蛋后期日糧中添加復(fù)合酶制劑沒有改善蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、雞蛋成分和日糧養(yǎng)分代謝率（P＞0.05）。但不影響乳酸菌數(shù)量增加趨勢（P＞0.05），可以降低盲腸大腸桿菌數(shù)量（P＜0.01），與對照組相比，蛋雞盲腸大腸桿菌數(shù)量降低了10.70%。

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S816.79

B

1673-1085（2017）11-0007-06

2017-10-04

公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項(xiàng)：飼用植物活性組分替代抗生素產(chǎn)品（201403047）。

周雪梅（1990-），女，研究生，研究方向：動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)，E-mail:1292001462@qq.com。

**通訊作者：楊在賓（1961-），男，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向：動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)，E-mail:yzb204@163.com。