老年晚期結直腸癌病人化療前后外周血T淋巴細胞亞群變化

老年晚期結直腸癌病人化療前后外周血T淋巴細胞亞群變化

張皓李曉林

目的研究化療對老年晚期結直腸癌病人外周血T淋巴細胞亞群的影響。方法收集30例老年晚期結直腸癌初治病人治療前及化療后的外周血T淋巴細胞亞群數據,與匹配的30例中青年結直腸癌病人及30例健康老年人群進行比較。結果化療前老年晚期結直腸癌組病人T淋巴細胞亞群CD3+、CD3+CD4+、NK、CD4+/CD8+表達明顯低于老年健康組,差異有統計學意義(P<0.05或0.01),CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+值低于中青年結直腸癌病人，差異有統計學意義(P<0.05或0.01)。老年晚期結直腸癌病人化療后T淋巴細胞亞群CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+表達較化療前明顯升高,差異有統計學意義(P<0.01)。結論老年晚期結直腸癌病人治療前存在明顯的免疫抑制狀態,化療可以顯著減輕晚期機體腫瘤負荷,從而一定程度上改善病人的免疫功能。

結直腸癌; 老年人; T淋巴細胞亞群

全球范圍內,結直腸癌的患病率在所有惡性腫瘤中居第三位,在我們國家也有較高的發病率和死亡率,嚴重威脅著人類的健康,化學治療在結直腸惡性腫瘤的治療中仍具有舉足輕重的作用[1]。臨床及流行病學研究發現，老年人群惡性腫瘤更為高發,老年人除了機體代謝、運動功能、認知水平的改變外,還存在內分泌環境及免疫系統的改變,免疫調節紊亂在腫瘤的發生、發展過程中起重要作用[2-3]。本研究比較老年晚期結直腸癌病人化療前后的T細胞亞群的變化,探討老年晚期結直腸癌病人化療前后免疫功能的變化,從而為進一步有效治療提供客觀依據。

1 材料與方法

1.1 一般資料 收集2015年1月至2016年12月我院經組織學確診、且未經化療和免疫治療的老年晚期結直腸癌病人30例(老年直腸癌組),其中男18例,女12例,年齡62～78歲,平均(67.2±3.3)歲,設2個對照組,其中一組為老年健康組30例,均來自本院體檢健康老年人群,男13例,女17例,年齡61～80歲,平均(68.3±4.2)歲,另一組為中青年結直腸癌病人組30例,男16例,女14例,年齡32～57歲,平均(47.4±3.9)歲。3組人群性別、原發腫瘤部位及KPS評分差異均無統計學意義(P>0.05)，老年結直腸癌組年齡與老年健康組比較，差異亦無統計學意義,具有可比性。見表1。

1.2 納入和排除標準 納入標準:(1)年齡≥60歲;(2)既往未行化療及免疫治療;(3)KPS評分≥70 分;(4)簽署知情同意書,知曉并配合醫護工作人員的診療活動。

排除標準:(1)同時合并有其他惡性腫瘤者;(2)心、肝、腎等重要器官有嚴重疾病者;(3)存在急慢性感染性疾病病人;(4)有心理或精神疾病無法配合正常診療活動者。

表1 3組一般臨床資料比較(n，n=30)

1.3 化療方案 給予結直腸癌病人XELOX方案化療:奧沙利鉑(江蘇恒瑞醫藥股份有限公司)130 mg/m2靜脈滴注2 h,化療第1天用藥; 卡培他濱(上海羅氏制藥有限公司) 1000 mg/m2口服,2次/d,化療第1～14天用藥。3 周為1個化療周期。

1.4 外周血T淋巴細胞亞群檢測

1.4.1 標本采集:老年結直腸癌組于化療前1 d及治療21 d后,清晨采病人外周血2 ml。并收集健康老年組和中青年結直腸癌病人組治療前的靜脈血2 ml。

1.4.2 實驗方法:將采取的2 ml全血與適量的相應抗體及同型對照抗體混勻,室溫條件下避光放置20～30 min,然后加入紅細胞裂解液裂解10 min,高速離心機1500 r/min離心5 min,去上清液后再洗滌2次,最后加0.5 ml PBS懸浮后上機檢測。分別計數10,000個淋巴細胞,標記出細胞百分率。

2 結果

2.1 各組治療前T淋巴細胞亞群比較 老年結直腸癌組病人T淋巴細胞亞群CD3+、CD3+CD4+、NK、CD4+/CD8+比率明顯低于老年健康組,差異有統計學意義(P<0.05或0.01)。老年結直腸癌組病人T淋巴細胞亞群CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+比率低于中青年結直腸癌組,差異有統計學意義(P<0.05或0.01)。見表2。

表2 各組治療前T淋巴細胞亞群比較(,%，n=30)

注:與老年結直腸癌組比較,*P<0.05,**P<0.01

2.2 老年結直腸癌組化療前后T淋巴細胞亞群比較 老年結直腸癌組病人化療后T淋巴細胞亞群CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+較化療前明顯升高,差異具有統計學意義(P<0.05)。見表3。

T淋巴細胞亞群治療前治療后PCD3+55.9±6.967.3±7.7<0.001CD3+CD4+30.6±7.741.1±9.4<0.001CD3+CD8+22.3±7.822.4±8.50.971NK22.2±8.122.8±9.10.774CD4+/CD8+1.7±0.72.1±0.90.006

3 討論

近年來,結直腸癌病人的免疫功能與病人的病理學特征及其預后的關系成為腫瘤研究的熱點之一。化療對晚期結直腸癌病人免疫功能的影響是雙刃劍。一方面,化療能夠通過殺滅腫瘤細胞減輕機體的免疫抑制狀態;另一方面,化療的非選擇性殺傷作用,對增殖活躍的淋巴系統同樣具有明顯的殺傷效果,但什么樣的作用占主導地位,決定了化療后機體免疫功能的變化[4-5]。

T淋巴細胞亞群是調節人體免疫系統的細胞群,觀察腫瘤病人化療前后T淋巴細胞亞群變化,可以有助于我們了解病人的免疫狀態,評價化療對機體免疫功能的影響及化療與機體免疫功能之間的關系,對我們選擇腫瘤的治療方案及預后的判斷有著重要的指導意義。

本研究顯示老年結直腸癌病人在治療前與老年健康組相比,CD3+、CD3+CD4+、NK、CD4+/CD8+值明顯下降,提示老年結直腸癌病人治療前處在明顯的免疫抑制狀態;與中青年結直腸癌組相比較,CD4+/CD8+下降更顯著,說明老年結直腸癌病人在治療前T淋巴細胞亞群受抑制的程度更嚴重。化療3周后,復查老年結直腸癌病人組CD3+、CD3+CD4+、NK、CD4+/CD8+較化療前數值明顯升高,說明化療可以有效減少晚期腫瘤病人機體負荷,并不同程度地改善病人的免疫功能。

在對老年晚期結直腸癌病人進行化療時,既要殺死腫瘤細胞,又要保護好機體的免疫功能。尤其在對老年晚期結直腸癌非手術綜合治療方面,在很大程度上是通過恢復病人免疫功能來實現的[6-7]。本研究顯示,化療對老年晚期結直腸癌病人機體免疫微環境具有一定的優化作用,通過活化抗腫瘤免疫應答,增強機體的抗腫瘤反應。

在臨床實際中,可能會影響病人免疫功能的原因很多,誘導抗腫瘤免疫激活因素還不完全清楚,而化療藥物對機體免疫細胞的作用機制以及作用時效均知之甚少。免疫療法在臨床應用的路上,仍有許多需要解決的關鍵問題,包括化療藥物的選擇、聯合的給藥方式以及免疫治療的切入時機等。動態監測老年晚期結直腸癌病人化療前后T細胞亞群的變化,對機體免疫狀態的反映和腫瘤預后的評判均具有重要的臨床意義和指導作用。

[1] 蔣蔚茹,劉杰.結直腸癌化療進展[J].中國腫瘤,2011,20(3):200-203.

[2] 韓立春,陳文慶,張雪瑩,等.DC-CIK 治療老年惡性腫瘤的臨床療效[J].中國老年學雜志,2015, 35(5):1295-1296.

[3] 岳倫莉,代洪玉,李萍,等.自體樹突狀細胞瘤苗誘導的殺傷細胞過繼免疫在老年性大腸癌姑息治療的臨床研究[J].四川醫學,2016, 37 (11):1228-1232.

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ChangesinperipheralbloodTlymphocytesubsetsinelderlypatientswithadvancedcolorectalcancerafterchemotherapy

ZHANGHao.DepartmentofOncology;LIXiao-lin.

DepartmentofGeriatricGastroenterology,theFirstAffiliatedHospitalofNanjingMedicalUniversity,Nanjing210029,China

ObjectiveTo investigate the changes in peripheral blood T lymphocyte subsets in elderly patients with advanced colorectal cancer after chemotherapy.MethodsPeripheral blood T lymphocyte subsets in 30 elderly patients with advanced colorectal cancer receiving initial treatment were detected before treatment and compared with those in young and middle-aged patients with colorectal cancer as well as healthy elderly population. Additionally, T cell subsets were compared in elderly patients with advanced colorectal cancer before and after chemotherapy.ResultsIn elderly patients with advanced colorectal cancer, the proportions of CD3+, CD3+CD4+, NK and CD4+/CD8+T lymphocyte subsets were significantly lower than those in healthy elderly population(P<0.05 or 0.01). Compared with young and middle-aged patients with colorectal cancer, the proportions of CD3+, CD3+ CD4+ and CD4+/CD8+ subsets were lower in elderly patients with advanced colorectal cancer(P<0.05 or 0.01). After chemotherapy, T lymphocyte subsets including CD3+, CD3+CD4+and CD4+/CD8+ increased evidently than those before chemotherapy (P<0.05).ConclusionsBefore treatment, elderly patients with advanced colorectal cancer are in an obvious immunosuppressive state. Chemotherapy can effectively reduce tumor burden in patients at advanced stage and improve patients’ immunologic function.

colorectal cancer; aged; T lymphocyte subsets

國家自然科學基金資助項目(81502608)

210029 江蘇省南京市，南京醫科大學第一附屬醫院腫瘤科(張皓)；老年消化科(李曉林)

李曉林，Email: lxl@njmu.edu.cn

R 735.3

A

10.3969/j.issn.1003-9198.2017.12.005

2017-05-16)