植物細胞有絲分裂實驗方法再討論

吳津瑋(湖北華中師范大學第一附屬中學 湖北 武漢 430000)

按部就班的按照高中課程的實驗標準課本教科書中的方法來做觀察植物細胞有絲分裂實驗，做完后的實驗效果往往不是很理想，這同時也教學帶來了很多的困難與麻煩。因此，在按照課本知識的主線完成實驗的同時，我們還應該從實際操作的各個環節優化一下，結合實際做一些相應的調整與改進。

1 材料的選擇和根尖的培養

按照該實驗的要求，我們該選擇的是較為理想的植物細胞來觀察有絲分裂活動，選擇細胞較大，根尖較粗的植物來做實驗，最終覺得洋蔥最適合。但是，洋蔥的選擇是有時間的，在觀察根尖分生組織細胞的有絲分裂的實驗中，解離時間為上午10時至下午2時。此時洋蔥根尖分生區細胞處于分裂期的較多。

植物的根尖培養要注意方法。在實驗前3至4天，取一個洋蔥，放在廣口瓶上。瓶內裝滿水，讓洋蔥的底部接觸到瓶內的水面，把這個裝置放在溫暖的地方培養，待根長約5CM時，取生長健壯的根尖制成臨時裝片觀察。像一些較小的種子如油菜花，我們就可以將培養皿的底部和蓋都裁好合適大小的濾紙并用清水將其濕潤至倒扣無液體留下，蓋子上的濾紙要裁剪大一點，剛好能把玻璃蓋的側面都能擋上，再用水將濾紙潤濕，用手摸起來是濕潤的卻不滴水，然后再將種子擺放至濕潤濾紙上，放至25度左右的適宜條件下，濾紙定期檢查，不能太濕，以防根尖太細，細胞的分裂能力弱，分生組織部位太少，不利于后期的取材和制片觀察，也不能缺水導致太干燥，那也會會嚴重影響實驗材料的出芽率，導致沒有實驗材料［1］。

2 實驗操作方法的改進

在觀察有絲分裂實驗中，夾取根尖的次數比較多，為了防止我們在實驗過程中將根尖的分生區因后期的解離變軟后因夾取而弄散丟失分生區，在后期的操作過程中，我們取材料時將根尖多取一厘米左右，那么我們在后面的實驗過程中就可以用鑷子夾住根尖的上部分，有利于降低分生區的損耗，再在夾取根尖最后一步時將多余的根尖部位去掉，只留分生區部位，過多的根尖也只會造成細胞的重疊，不利于后期的顯微鏡觀察。

3 過程的改進簡易實驗方法

根尖的解離目的是用解離液中的鹽酸溶液將細胞間的中膠層溶解，使細胞不粘粘，分離開，有利于后期的單層細胞涂片，也有利于觀察分裂相。不同的溫度環境條件下，根尖的解離時間的效果是有區別的，溫度較低時解離時間就會變長，為了節省時間，更好的完成實驗，我們可以采用水浴的方式加熱，將實驗材料放入60度的恒溫溫水里加熱1－2分鐘就可以使根尖變透明變軟，達到理想的實驗效果。

裝片后根尖的染色。片子的染色是為了我們更能直觀的將染色體和細胞質清晰的分辨出。若是按照書中的方法我們很難清晰的看到分裂相。染色時間太短，會使得著色較淺，不容易區別出染色體;時間若是太長，染色體染色太深，會使得視野內多數都是一團團的紫色，更是分辨不出哪些是染色體和細胞質。對于著色比較困難的木本植物，我們可以進行一次預染，然后再進行一次吉姆薩然也進行染色，在染色的時候要一邊進行鏡檢，看看上色程度，找到合適的就趕緊將染液倒掉，然后用水流輕輕的沖刷玻片的背面，這樣就防止了背面的染液阻礙我們觀察分裂相了。

4 制作片子的關鍵

染色體根尖的制片有兩種:

4．1 壓片。直接在載玻片上放好解離后的根尖，然后再放入蓋玻片，用鑷子輕輕的敲，知道根尖都均勻的散開，該方法注意的是根尖部位不要取太多，這樣只會讓細胞重疊，很難觀察到清晰的分裂相，還有就是敲的時候要注意力度，太使勁就會將載玻片敲碎了。在敲的時候，要一邊敲一邊在顯微鏡下觀察，若是沒敲開，那細胞就會太密，互相重疊，影響觀察，慢慢敲，慢慢觀察至細胞逐漸出現單層就可以了。

4．2 涂片。將載玻片用純凈水清洗干凈，然后再放入冰箱中冷藏后，使用時拿出來要在盒里加入冰塊。直接取一張洗干凈的載玻片，在載玻片的中間滴一滴固定液，然后將解離好根尖用鑷子夾起直接涂在載玻片的中間位置上，注意不要一個位置重復涂點，這樣只會使染色體重疊，不利于后面的觀察，涂完后再滴一滴的固定液吹一下，并將多余的液體甩掉，最后再在酒精燈上撩一下，將染色體固定在玻片上。

結語:經過上述幾點對有絲分裂實驗方法改進的討論，要注意到取材和制片還有染色這三個重要的關鍵步驟在做實驗室要盡可能的合理的改進，這對于實驗的成功與否很重要。而我們這篇文章就討論了這幾個方面，所以，就會覺得整個實驗就會成功率高很多，因此，我們做實驗不要一味的只是局限于課本中的知識，我們也要多多查閱資料，盡可能的改進一下實驗方法，達到更好的實驗結果。

參考文獻:［1］王

晨昊．觀察植物細胞有絲分裂實驗的改進［J］．科技視界，2017，12(01):61－62．