HPV分型檢測及其在宮頸病變中的應(yīng)用與臨床意義評估

江玲 周靜 萬啟軍

HPV分型檢測及其在宮頸病變中的應(yīng)用與臨床意義評估

江玲 周靜 萬啟軍

目的探究HPV分型檢測及其在宮頸病變中的應(yīng)用與臨床意義。方法選擇2015年5月—2016年5月我院符合研究標準的52例女性患者為研究對象,實施HPV分型檢測，對結(jié)果進行全面分析。結(jié)果宮頸炎，癌前病變（CIN I-III）和宮頸癌的HPV陽性情況對比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，其陽性率分別為43%、71%、80%、88%和100%。在HPV感染者中，高危型與單一感染為主要類型。結(jié)論HPV感染和宮頸病變發(fā)生情況存在較高關(guān)聯(lián)性。對疑似者實施HPV檢測有利于篩查各類宮頸病變，對于宮頸癌預(yù)防和治療來講，有著相當重要的現(xiàn)實意義。

宮頸炎；HPV感染；宮頸癌前病變；宮頸癌；檢測意義

宮頸病變包含宮頸炎、癌前病變與宮頸癌3個階段，結(jié)合實際情況，本文就上述疾病HPV感染情況和分型進行全面分析，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015年5月—2016年5月我院符合研究標準的52例女性患者為研究對象，在此其中患慢性宮頸炎者共計28例，宮頸癌者4例，癌前病變者20例（CIN-I者7例，CIN-II者5例，CINIII者8例）。年齡25～66歲，平均年齡為（48.03±5.64）歲。

1.2 樣本收集

依照我院制定的樣本收集操作流程，使用一次性無菌宮頸細胞收集刷，進入到受試者宮頸外口中，輕輕按壓，朝向固定方向旋轉(zhuǎn)3～4周，獲取脫落細胞[1]，同時將采樣刷浸泡在內(nèi)盛無菌NS溶液的標本管內(nèi)，在4℃環(huán)境下妥善保存，在7 d內(nèi)完成檢驗工作[2]。

1.3 設(shè)備與試劑

（1）實驗試劑：HPV分型檢測試劑盒（深圳亞能生物有限公司生產(chǎn)）分型檢測共計23類HPV亞型，在此其中包含18類高危亞型和5類低危亞型。

（2）設(shè)備：臺式高速冷凍離心設(shè)備為日本奧林巴斯公司生產(chǎn)；恒溫金屬浴箱為美國GE公司生產(chǎn)；微孔板恒溫振蕩器由杭州奧盛設(shè)備有限公司生產(chǎn)。

1.4 方法

取用處理好的標本，振蕩均勻，放入離心機內(nèi)，以13 000 rpm的速度離心5 min，棄上層清液，將沉淀物視為檢驗對象。在此其中加入50 μl的HPV-DNA提取液，振蕩均勻，100℃水浴10 min。以13 000 rpm的速度離心10 min，保留上層清液，等待使用。實施PCR擴增。洗膜，雜交和顯色環(huán)節(jié)依照說明書內(nèi)容進行，每次進行實驗均實現(xiàn)設(shè)置陰性和陽性對照物[3]。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

本實驗使用SPSS20.0專業(yè)統(tǒng)計學(xué)軟件，計量資料用（均數(shù)±標準差）表示，采用t檢驗，計數(shù)資料用χ2檢驗，P＜0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 癌前病變者HPV陽性情況

在所有受試者中，宮頸炎、CIN I、CIN Ⅱ、CIN III和宮頸癌的HPV陽性率分別為43%、71%、80%、88%和100%，不同類別的陽性率對比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，P＜0.05，見表1。

2.2 癌前病變者HPV陽性樣本高危/低危與混合亞型檢測詳情

在34例HPV陽性者內(nèi)，高危亞型相對常見，CIN III、CIN Ⅱ、CIN I宮頸癌和宮頸炎的檢出比例分別為86%、75%、60%、100%、75%，不同類型的高危檢出率，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，P＜0.05，見表2。

表1 癌前病變者的HPV陽性率情況

表2 癌前病變者HPV陽性樣本高危/低危與混合亞型檢測詳情

2.3 癌前病變者HPV多重和單一感染的檢出詳情

在34例HPV者中，單一感染極為常見，宮頸炎、CIN III、CIN ⅡCIN I、和宮頸癌的檢出率分別為75%、71%、75%、60%、75%。見表3。

3 討論

宮頸癌疾病的發(fā)生和發(fā)展主要是從宮頸上皮內(nèi)瘤病變到浸潤性癌的過程，其有著連續(xù)性的特點，該過程一般在7～8年左右[4]。在通常情況下，早期宮頸癌者可能不會出現(xiàn)顯著臨床癥狀若患者顯現(xiàn)出比較明顯的癥狀，那么通常已經(jīng)形成了浸潤癌，預(yù)后效果不佳。國內(nèi)文獻報道指出，宮頸癌疾病的遷延與HPV感染關(guān)聯(lián)性密切，其為乳頭瘤病毒科的雙鏈DNA病毒[5]，可定植在人體黏膜和皮膚上，這種感染種屬特異性極高。結(jié)合該特征，本文全面分析HPV的檢測在宮頸癌、宮頸炎和癌前病變中的意義與臨床應(yīng)用價值。在本次實驗結(jié)果可知，陽性水平隨著患者病變嚴重程度而呈現(xiàn)出了逐步上升的趨勢。對于已經(jīng)感染的HPV者的基因分型進行細化分析，結(jié)果證實，HPV58、33、52等亞型出現(xiàn)的概率較高，在此其中又以HPV16亞型最為常見，其和宮頸癌疾病的發(fā)生關(guān)聯(lián)性較強，和國內(nèi)報道結(jié)果相似。有學(xué)者指出，病毒載量的提升會導(dǎo)致宮頸病變升級，HPV負荷量和宮頸病變之間的關(guān)聯(lián)性較強，隨著病毒載量的上升，宮頸病變CIN II～III者的風(fēng)險上升，高危性HPV病毒載量和宮頸病變程度之間有較為明顯的劑量反應(yīng)關(guān)系，病毒載量越大，宮頸病變的風(fēng)險越大。另有學(xué)者提出不同觀點，高危型HPV病毒載量負荷和宮頸病變程度并不完全相關(guān)，一些宮頸癌患者的HPV病毒載量可能較低，10%左右的CIN II～III患者會出現(xiàn)DNA整合現(xiàn)象，這種情況在CINI中很少出現(xiàn)。迄今為止，醫(yī)學(xué)界對于單一/多重感染和宮頸病變的關(guān)聯(lián)性存在爭議，有學(xué)者指出，單一感染對于宮頸癌的發(fā)生和發(fā)展起到了促進作用，也有學(xué)者指出，多重感染并不會提升宮頸癌的發(fā)生率[6-9]。

表3 癌前病變者HPV多重和單一感染的檢出詳情

綜上所述，本實驗研究結(jié)果證實，HPV感染和宮頸病變發(fā)生情況存在較高關(guān)聯(lián)性。所以說，對疑似者實施HPV檢測有利于篩查各類宮頸病變，這對于宮頸癌預(yù)防和治療來講，有著相當重要的現(xiàn)實意義。

[1]常小壘，郭科軍，張頤. HPV亞型與子宮頸癌前病變及癌變的關(guān)系探討[J]. 中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2014，43（8）： 720-723，727.

[2]陳文學(xué)，張焜和，鄒學(xué)森，等. 導(dǎo)流雜交檢測人乳頭狀瘤病毒感染與宮頸癌臨床分期及病理分型關(guān)系[J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014，24（12）： 2882-2884.

[3]譚細鳳，徐慧君，郭麗華，等. 白細胞介素17在人乳頭狀瘤病毒感染的宮頸癌中表達變化及臨床意義[J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014，24（18）： 4609-4611.

[4]潘瓊慧，黃凌霄，陳育梅，等. P16INK4A、L1殼蛋白聯(lián)合檢測在宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變中的應(yīng)用研究進展[J]. 實用醫(yī)學(xué)雜志，2015，31（2）： 324-326.

[5]陳麗娟，強萍，陳萍，等. 宮頸癌前病變伴HPV高危型感染患者膦甲酸鈉氯化鈉注射液治療的效果研究[J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2015，25（20）： 4764-4766.

[6]陳劍，吳德群，程文國，等. 799例宮頸感染患者人乳頭瘤病毒檢測結(jié)果分析[J]. 山東醫(yī)藥，2015，55（3）： 101-102.

[7]劉鵬，李清友. HPV-DNA分型檢測聯(lián)合TCT檢查在宮頸病變篩查中的應(yīng)用[J]. 河北醫(yī)藥，2012，34（18）： 2805-2806.

[8]姜清明. 液基細胞學(xué)聯(lián)合HPV基因分型檢測在宮頸癌前病變篩查中的應(yīng)用[J]. 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)，2011，39（1）： 45-47.

[9]李君，何慧.淺析宮頸病變患者人類乳頭瘤病毒基因分型[J]. 中國繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育，2016，8（23）：61-63.

Application and Clinical Significance of HPV Typing in Cervical Lesions

JIANG Ling ZHOU Jing WAN Qijun Department of Gynaecology, Kunshan Hospital of Traditional Chinese Medicine, Kunshan Jiangsu 215300, China

ObjectiveTo explore the application and clinical signi fi cance of HPV typing and its application in cervical lesions.MethodsFrom May 2015 to May 2016, 52 female patients in our hospital were selected as the research object, and the HPV typing was carried out to analyze the results in an all-round way.ResultsThe positive rate of HPV in inflammatory,cervical precancerous lesion (CIN I-III) and cancer was statistically signi fi cant. The positive rates of each group were 43%, 71%, 80%, 88% and 100%, respectively. Among the HPV infected people, high risk and single infection are the main types.ConclusionThere is a high correlation between the incidence of HPV infection and the occurrence of cervical lesions. It is of great practical signi fi cance for the prevention and treatment of cervical cancer to carry out HPV detection for suspected people.

cervicitis; HPV infection; precancerous lesions of the cervix;cervical cancer; detection signi fi cance

R711

A

1674-9308（2017）30-0082-03

江蘇省昆山市中醫(yī)醫(yī)院婦科，江蘇 昆山 215300

10.3969/j.issn.1674-9308.2017.30.048