蘋果無病毒苗木的繁育技術

李曉瓊

【摘要】：蘋果病毒主要通過嫁接途徑傳染，隨接穗等無性繁殖材料擴散。因此，培育無病毒母本樹，栽培無病毒苗木，是防治蘋果病毒病的根本對策。而且無病毒苗木抗逆性強，能適應山地、灘地栽培，且具有良好的園藝性狀和生產性能，可減少化肥施用量，降低生產成本，減少環境污染，有利于生產無公害優質果品。

【關鍵詞】：蘋果樹；無病毒樹苗；培育技術

果樹病毒病及其類病毒病害均經嫁接傳染，隨繁殖材料遠距離傳播。而一旦感染病毒，終身則不得免除，加之目前沒有能夠有效防止病毒病的化學藥劑和生物制品。因此，果樹無病毒種苗的生產在病毒病防治上具有重要地位。

1、原種培育和保存

1.1待脫毒材料

凡準備進行脫毒處理的品種和砧木均應是通過國家或省農作物品種審定委員會審定的品種和砧木。選取經3年以上觀察未發現過銹果病、綠皺果病和花葉病癥狀的結果樹作為待脫毒材料母本樹，從其上采集接穗作為待脫毒材料。

1.2脫毒處理

1.2.1熱處理脫毒法

于每年4月中旬，從待脫毒品種植株上剪取接穗，采用切接法嫁接在盆栽實生砧苗上，每品種10-15盆。嫁接成活后，按常規苗在室外進行管理。翌年2月上中旬將待脫毒盆栽苗移入溫室，從地面以上20cm剪截留3-5個飽滿芽。同時將盆栽砧木移入溫室，使其萌動生長。待脫毒苗萌動長出幼葉后，移入恒溫熱處理箱，將溫度控制在28-30℃。3-5d后待盆栽苗長出3-5片新葉時，將溫度調至（38±1）℃，進行熱處理并開始計時。熱處理28d后，從抽發的新梢頂端，切取1.0-1.5cm的嫩梢，采用劈接或皮下嫁接法嫁接在預先準備好的盆栽實生砧木上，用塑料薄膜包扎，并套上白色透明塑料袋保溫，放陰涼處，2周后取下塑料袋，約10d后再移入溫室內有陽光處，待長出3-5片新葉后移到室外鍛煉10-15d，即可移入苗圃，按正常苗進行管理。

1.2.2莖尖培養脫毒法

（1）脫毒材料準備。從田間大樹上切取2-3cm長的新梢頂尖，用70%酒精浸漬30s，用0.1%升汞滅菌5min，無菌水沖洗3-5遍，在解剖鏡下剝離幼葉和葉原基，切取0.1-0.2mm的莖尖，接種到分化培養基上，在（25±2）℃、光照度1500-2000lx、光照10h/d的條件下培養。每個月換1次培養基，3-4個月后可分化出新芽。

（2）增殖培養。培養基、培養條件與初代培養相同，每隔30-40d轉接1次。增殖試管苗可采用酶聯免疫吸附法進行病毒初檢，帶毒樣品剔除或進行熱處理脫毒。

（3）誘導生根。從初檢不帶毒樣品上切取長1.5cm的嫩梢插入生根培養基中，在25℃下經15-20d即可長出新根。對生根率較低的品種可適當調整生長調節劑的濃度或加入間苯三酚或增加培養代數。

（4）移栽。栽前將組培生根苗置于強光下，閉瓶鍛煉2d（加少量水）。以腐殖土、砂或蛭石為基質，洗凈根部粘附的培養基后栽到基質中，澆透水，蓋上塑料薄膜和報紙保溫遮陰，10d后逐漸通風透光，每周澆1次1/4-1/8MS營養液促進生長。初春為移栽適期，溫度保持在15-25℃。（5）移入苗圃。將移栽成活的組培苗移到室外煉苗1-2周。圃地開溝打垅，施入基肥，將苗帶土移栽，灌足水。

（6）病毒檢測。8月份從移栽成活苗上剪取帶12-15個飽滿芽的枝條，按芽系編號，采用指示植物進行鑒定。檢測后保存無病毒的芽系，將帶病毒的芽系剔除或再次熱處理。

1.3脫毒材料的病毒檢測

經脫毒處理獲得的材料先通過血清學方法進行檢測，顯陽性反應的剔除，顯陰性反應的再采用木本指示植物法進行檢測。

1.4無病毒原種的保存

1.4.1保存方式

蘋果品種和砧木，經過脫毒處理和病毒檢測后，確認無病毒后即可作為無病毒原種，保存在培育原種的單位，保存的方式有田間原種保存圃保存和室內組培保存，有條件的建立基因庫保存。

（1）田間原種保存圃保存。無病毒原種樹最好盆栽于有防蟲保護網設備的網室內或專門的溫室里，并遠離有病毒潛伏來源的果園2km以上。（2）組培保存。由組織培養方法獲得的無病毒原種可以保留在瓶內繼代培養。如果需用接穗，可以擴繁幾代，移至田間。

1.4.2病毒檢測

無病毒原種樹每5年應進行1次病毒檢測，發現問題即剔除。檢測機構要將病毒檢測結果報告主管部門。

2、苗木繁育

2.1苗圃的建立

選擇的苗圃地應地勢平坦，有灌溉條件，土壤肥沃，有機質含量豐富，酸堿度適中，距一般蘋果、梨園或一般生產性苗圃50m以上，5年沒有種植過蘋果樹、梨樹或繁育過蘋果苗、梨苗，交通方便的地方。

2.2苗圃規劃和建設

苗圃規劃應從便于管理的角度出發，劃分為若干小區。規劃出實生苗播種區、無性系砧木繁殖區、成苗培養區以及休閑區等。并按規劃設計出各級道路、排灌系統，并統籌安排，平整土地，改良土壤，以及增施有機肥。

2.3實生砧木培育

砧木種子必須采自無病毒砧木采種園或經病毒檢測確認無病毒的種子。秋季或早春播種。播前每667m2施有機肥2500-3000kg、磷肥100kg，深翻土地，平整作畦，施用殺菌劑和殺蟲劑，進行土壤消毒。播種方法和田間管理與一般生產性苗圃相同。

2.4無性系砧木培育

無性系砧木繁殖材料，必須來自無病毒母本園。繁殖方法：（1）直接從無病毒母本園引進無性系砧木自根苗，經過一年集中培育，秋季嫁接栽培品種；（2）從無病毒母本園采集無性系砧木種條，嫁接在無病毒的實生砧木上，準備培養中間砧木，然后再嫁接無毒品種接穗；（3）用組織培養方法快速繁殖無病毒無性系砧木。

2.5嫁接苗的管理

2.5.1接穗的采集

接穗必須從無病毒蘋果品種采穗圃采集，剪下的接穗立即剪去葉片，按株分扎成捆，并登記母本樹的品種（品系）名稱及采集時間。

2.5.2嫁接

秋季采用芽接法，春季采用枝接法，接后要按品種、品系分別記載。補接時，必須保證與原來嫁接的母株相同，否則不予補接。

結語：

從原種培育和保存、母本園的建立、病毒檢測、檢察記載及苗木繁育管理技術等方面，詳細介紹了無病毒苗木繁育體系的各個組成部分及詳細操作規程，以期規范我國無病毒苗木繁育行為，推進我國苗木繁育產業健康發展。

【參考文獻】：

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